調控Wnt信號通路對特發性肺纖維化發生髮展影響的研究

《調控Wnt信號通路對特發性肺纖維化發生髮展影響的研究》是依託南京大學，由韓曉冬擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：調控Wnt信號通路對特發性肺纖維化發生髮展影響的研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：韓曉冬
• 依託單位：南京大學

項目摘要

特發性肺纖維化（IPF）是一種病因不明，以肺間質纖維化為特徵的疾病，其發病率高，治療效果差，5年生存率僅有30%-50%。研究發現Wnt信號通路參與了IPF的發生，激活Wnt信號通路可促進肺幹細胞向成纖維細胞分化，加快IPF進程。與此相反，我們的前期研究發現，抑制Wnt信號通路能夠促進骨髓間充質幹細胞向上皮細胞分化，提示研究Wnt信號通路調節可能為探討IPF發生的分子機制及臨床治療，提供新思路。本項目在我們的前期工作基礎上提出，以探討特異Wnt信號通路調節為切入點，開展以下研究：①建立IPF動物模型及肺幹細胞與肺泡上皮細胞共培養體系，進一步確認阻斷Wnt信號通路也能有效地促進肺幹細胞向肺泡上皮細胞分化；②篩選在肺幹細胞向成纖維細胞分化過程中起關鍵作用的Wnt蛋白，尋找治療特發性肺纖維化的關鍵靶點；③在IPF動物模型中證明選擇性阻斷特定Wnt信號通路有利抑制肺纖維化，促進肺泡上皮結構重建。

結題摘要

特發性肺纖維化（IPF）是一種病因不明，以肺間質纖維化為特徵的疾病，其發病率高，治療效果差，5年生存率僅有30%-50%。本項目研究了調控Wnt信號通路對IPF發生髮展的影響。首先我們成功建立小鼠肺間質幹細胞體外分離、純化、培養體系，並在小鼠體外肺間質幹細胞-肺泡上皮細胞共培養體系中，證明了Wnt信號通路參與肺間質幹細胞的分化，調控Wnt信號通路能夠決定肺間質幹細胞的分化方向，即激活Wnt信號通路能夠促進肺間質幹細胞向成纖維細胞分化，抑制Wnt信號通路則促進肺間質幹細胞向肺泡上皮細胞分化；然後，我們通過博來黴素氣管噴霧技術建立小鼠IPF動物模型，證明了肺纖維化動物肺組織內Wnt信號通路處於過度激活狀態，給予其Wnt信號通路廣譜抑制劑，阻斷Wnt信號通路，能夠抑制肺纖維化的發生髮展；接著，我們利用成纖維細胞轉化因子（TGF）誘導小鼠肺間質幹細胞向成纖維細胞分化，採用Affymetrix GeneChip Mouse Gene 1.0 ST Array基因晶片篩選出了在該分化過程中高表達的特定Wnt 蛋白，即Wnt5a、Wnt7a、Wnt7b、Wnt8a、Wnt8b、Wnt10a，並將以上結果在肺纖維化小鼠肺組織中予以確認；最後，我們選擇Wnt8b為作用靶點，分別在小鼠肺間質幹細胞向成纖維細胞分化體系以及博來黴素誘導小鼠IPF動物模型中，採用慢病毒分別上調、下調Wnt8b的表達，證明了抑制Wnt8b能夠特異性抑制小鼠肺間質幹細胞向成纖維細胞分化，同時能夠有效抑制IPF小鼠肺纖維化的發生髮展。研究成果以學術論文形式發表於SCI收錄期刊9篇及國核心心期刊1篇。本研究旨在探明IPF發生髮展的分子機制，尋找特異性抑制IPF發生的有效靶點，為臨床治療提供新思路。