螢光定量通過螢光染料或螢光標記的特異性的探針，對PCR產物進行標記跟蹤，實時線上監控反應過程，結合相應的軟體可以對產物進行分析，計算待測樣品模板的初始濃度。
基本介紹
- 中文名：螢光定量
- 試劑：螢光染料
- 對象：PCR產物
- 作用：對PCR產物進行標記跟蹤
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螢光定量簡介
螢光定量通過螢光染料或螢光標記的特異性的探針，對PCR產物進行標記跟蹤，實時線上監控反應過程，結合相應的軟體可以對產物進行分析，計算待測樣品模板的初始濃度。
螢光定量
螢光定量注意事項
1.必須確定擴增的特異性 ；
2.只有相同目標的CT值才能相減（擴增效率有可能不同）；
3.的某次方只是理論值，實際擴增效率低於；
4.避免試用用Syber Green。
背景知識
螢光定量PCR技術是通過螢光染料或螢光標記的特異性探針，對PCR產物進行標記跟蹤，實時監控反應過程。隨著PCR 反應的進行，反應產物不斷累積，螢光信號強度也等比例增加。每經過一個循環，收集一次螢光強度信號，這樣就可以通過螢光強度變化監測產物量的變化，結合相應的軟體對產物進行分析，可以得到螢光擴增曲線，計算待測樣品初始模版的量。實時螢光定量PCR技術是一次由定性技術向定量技術的飛躍，運用該項技術，可以對DNA、RNA樣品進行相對定量、絕對定量和定性分析。
服務項目
1．相對定量
包括RNA提取、反轉錄和擴增，採用SYBR Green I法和TaqMan探針法兩種方式，一般採用2法進行計算。每個樣本重複三次，一般情況我公司提供內參基因引物。
2．絕對定量
送樣要求
細胞（≥10 ）、組織（≥300mg）、血液（≥1ml）、葉片（≥100mg）等樣品材料，基因組DNA或總RNA（體積≥20μl，濃度≥50 ng/μl）。
