《蛋白激酶調控細胞抗病毒反應信號傳導的分子機理》是依託武漢大學，由吳叔文擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：蛋白激酶調控細胞抗病毒反應信號傳導的分子機理
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：吳叔文
- 依託單位：武漢大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
病毒感染細胞後，誘導I型干擾素的產生。I型干擾素通過誘導下游蛋白的表達，抑制病毒的複製或導致被感染細胞的凋亡，引起細胞抗病毒的固有免疫反應。機體主要通過Toll樣受體和RIG-I樣受體識別病毒核酸。受體檢測到病毒核酸物質後，招募下游的信號分子激活轉錄因子IRF3/IRF7和NK-kapaB。IRF3/IRF7和NF-kapaB進入細胞核和其他轉錄因子或共激活因子協同作用，誘導I型干擾素和其他炎症因子的表達。細胞抗病毒反應作用如果過強或不能及時被解除，會引起免疫疾病。最近發現了一些對細胞抗病毒反應有負調控作用的蛋白。細胞抗病毒反應仍有很多機制不清楚，本研究利用報告基因實驗從商品化的蛋白激酶庫中篩選新的調控細胞抗病毒反應的蛋白激酶，並利用多種生化、分子及細胞生物學的方法研究這些蛋白激酶調控細胞抗病毒反應的作用機制，為細胞抗病毒反應信號傳導分子機理的闡明做出貢獻。
結題摘要
通過克隆表達實驗對蛋白激酶表達庫進行了系統篩選並發現一個影響病毒誘導I型干擾素表達的新蛋白激酶——Nek6。表達外源Nek6能抑制病毒誘導的ISRE，IFN-beta啟動子的激活並抑制IFNB1及受其誘導細胞因子RANTES的表達。通過siRNA抑制內源Nek6的表達不僅可以協同仙台病毒對ISRE的激活，而且能顯著抑制水泡口炎病毒的複製。生化實驗進一步表明Nek6能夠以泛素化依賴方式促進活化IRF3的降解。以上研究工作充分說明了Nek6參與了細胞抗病毒信號轉導的負調控過程。在過表達實驗中我們發現Nek6激酶失活突變體失去了抑制活性，這表明Nek6對細胞抗病毒信號傳導的調控是依賴其激酶活性的。過表達條件下Nek6能夠對IRF3 173位絲胺基酸進行磷酸化修飾，173位絲氨酸發生突變後能夠抵抗Nek6引起的降解。我們的研究工作了闡明Nek6調控細胞抗病毒信號轉導的分子機制。
