葡聚糖凝膠指的是由一定平均相對分子質量的葡聚糖(dextran) 和甘油基以醚橋形式相互交聯而成，具有立體網狀結構，套用面廣的一類凝膠，國外商品名為Sephadex。交聯度的大小，可通過控制交聯劑(一般為環氧氯丙烷) 和葡聚糖的配比以及反應條件來控制。
基本介紹
- 中文名稱：葡聚糖凝膠
- CAS No：11081-40-6
- 英文名稱：Sephadex G 15
中文別名,英文別名,物理化學性質,產品用途,簡介,方法分類,儲運特性,
中文別名
葡聚糖凝膠G15 100-200;葡聚糖凝膠G15 200-400;葡聚糖凝膠G15 60-100
英文別名
SEPHADEX G-15, FOR GEL FILTRATION, 40-120MICRON; Sephadex(R) G-15
物理化學性質
化學穩定性
葡聚糖凝膠不溶於一切溶劑（除非它被化學降解）。它在水、鹽溶液、有機溶劑、鹼和弱酸性溶液中都是穩定的，在強酸中凝膠骨架的糖苷鍵被水解。長期接觸氧化劑將破壞凝膠，因而應避免使用。
物理穩定性
葡聚糖凝膠並不熔融，可以在濕態、中性PH進行滅菌或在高壓滅菌器120℃、30分鐘而不影響它的色譜性質。乾態的凝膠加熱至120℃以上將開始焦糖化。葡聚糖凝膠的機械強度取決於交聯度。
產品用途
利用分子篩作用，進行多肽分離、脫鹽、清洗生物提取液、分子量測定。
交聯葡聚糖的商品名為Sephndex，不同規格型號的葡聚糖用英文字母G表示，G後面的阿拉伯數為凝膠得水值的10倍。
簡介
葡聚糖凝膠是一種珠狀的凝膠，含有大量的羥基，很容易在水中和電解質溶液中溶脹。G型的葡聚糖凝膠有各種不同的交聯度，因此它們的溶脹度和分級分離範圍也有所不同。葡聚糖凝膠的溶脹度基本上不因鹽和洗滌劑的存在而受影響。
葡聚糖凝膠有不同的粒度。超細級的葡聚糖凝膠是用於需要極高解析度的柱色譜和薄層色譜。粗級和中級的凝膠用於製備性色譜過程，可在較低的壓力下獲得較高的流速。另外，粗級也可用於批量工藝。
方法分類
1.乙醇浸泡：在室溫下，將乾粉浸泡於50-60%乙醇中至少24小時，並不斷攪拌以保證凝膠溶脹，用無鹽水洗去殘存的乙醇濾乾;
2.無鹽水浸泡：室溫下，在無鹽水中充分溶脹24小時，間隙攪拌，以保證凝膠的完全溶脹，然後；
3.鹽酸浸泡：在常溫下再用0.2NHCl浸泡12小時，間隙攪拌，濾乾，水洗至中性；
4.將溶脹好的凝膠脫氣後（真空抽濾或超音波）根據裝柱要求一次性置入柱內，注意保持濕態裝柱，並避免柱內產生氣泡或斷層；
5.上樣前平衡層析柱至少3-5個柱體積直到記錄儀基線變得平穩為止（流出液的PH值等於上柱的Buffer的PH值）；
6.凝膠過濾的上樣量一般為5%的柱床體積，我們建議初次上樣控制在1-2%的床體積，視分離情況可以調整；脫鹽時上樣量可以達到20%的柱床體積，柱高的選擇也與分離要求相關，柱高控制在40-50cm以下，過高的凝膠層會引起較大的反壓，應當儘可能避免。難分離物質要有一定柱高和流速控制，脫鹽時高徑比為5：1即可；
7.洗脫方法：可以用無鹽水，也可以採用上柱時的緩衝液洗脫；在上柱Buffer中加入NaCl等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以完全分離純化；
8.在位清洗（CIP）凝膠使用十次後作一次CIP，目的是去除柱床內沉澱的及頑固殘留的蛋白。方法是以
40cm/h用1M氫氧化鈉反向洗四個柱體積，再以至少三個柱體積平衡緩衝液再生。
儲運特性
1、未使用，室溫保存即可。
2、使用後保存方法如下：凝膠層析的載體不會與被分離的物質發生任何作用，因此凝膠柱在層析分離後稍加平衡即可進行下一次的分離操作。但使用多次後，由於床體積變小，流動速率降低或雜質污染等原因，使分離效果受到影響。此時對凝膠柱需進行再生處理，其方法是:先用水反覆進行逆向沖洗，再用緩衝溶液平衡，即可進行下一次分離。對使用過的凝膠，若短時間保存，只要反覆洗滌除去蛋白質等雜質，加入適量防腐劑即可；
3、若長期保存，則需將凝膠從柱中取出，進行洗滌、脫水和乾燥等處理後，裝瓶保存。
