排阻色譜法也稱空間排阻色譜或凝膠滲透色譜法,是一種根據試樣分子的尺寸進行分離的色譜技術。其被廣泛套用於大分子的分級,即用來分析大分子物質相對分子質量的分布。
基本介紹
- 中文名:凝膠排阻色譜法
- 性質:快速而又簡單的分離分析技術
性質
套用
要正確地選擇色譜分離方法,首先必須儘可能多的了解樣品的有關性質,其次必須熟悉各種色譜方法的主要特點及其套用範圍。選擇色譜分離方法的主要根據是樣品的相對分子質量的大小,在水中和有機溶劑中的溶解度,極性和穩定程度以及化學結構等物理、化學性質。
一、相對分子質量
對於相對分子質量較低(一般在200以下),揮發性比較好,加熱又不易分解的樣品,可以選擇氣相色譜法進行分析。相對分子質量在200~2000的化合物,可用液固吸附、液-液分配和離子交換色譜法。相對分子質量高於2000,則
可用空間排阻色譜法。
二、溶解度
水溶性樣品最好用離子交換色譜法和液液分配色譜法;微溶於水,但在酸或鹼存在下能很好電離的化合物,也可用離子交換色譜法;油溶性樣品或相對非極性的混合物,可用液-固色譜法。
三、化學結構
若樣品中包含離子型或可離子化的化合物,或者能與離子型化合物相互作用的化合物(例如配位體及有機螯合劑),可首先考慮用離子交換色譜,但空間排阻和液液分配色譜也都能順利地套用於離子化合物;異構體的分離可用液固色譜法;具有不同官能團的化合物、同系物可用液液分配色譜法;對於高分子聚合物,可用空間排阻色譜法。
色譜法基本要求:
1.掌握色譜法的分類,色譜流出曲線及有關術語;
2.掌握色譜法的基本理論,了解柱效的影響因素;
3.掌握分離度與柱效、選擇因子、容量因子、分析時間之間關係;
4.了解定性、定量分析方法;
5.掌握氣相色譜流程及氣相色譜儀的結構;
6.掌握氣相色譜固定相的特性;
7.掌握檢測器性能指標的描述方法;
8.掌握液相色譜儀的基本結構及基本概念;
色譜法基本要求
9.了解液相色譜法的主要類型及固定相、流動相的選擇。
10.了解色譜方法選擇。