蠟樣芽胞桿菌為革蘭氏陽性大桿菌，大小為1-1.3×3-5μm，兼性需氧，形成芽胞，芽胞不突出菌體，菌體兩端較平整，多數呈鏈狀排列，與炭疽桿菌相似。引起食物中毒的菌株多為周鞭毛，有動力。
基本介紹
- 中文名：臘樣芽孢桿菌
- 外文名：Bacillus cereus
- 種屬：芽孢桿菌科細菌
- 革蘭氏染色：為革蘭氏陽性粗大桿菌
- 細胞大小：(3～5)μm×(1～1.2)μm
- 形態及特點：β溶血性的桿狀細菌，無莢膜
作用機理,培養特性,耐熱性,流行情況,致病性,檢測步驟,菌數測定,分離培養,證實試驗,
作用機理
蠟樣芽孢桿菌在生長過程中產生多種活性物質對致病菌或條件致病菌有明顯的抑制作用；同時蠟樣芽孢桿菌能迅速消耗消化道內環境中的游離氧，形成腸道低氧環境，不利於腸道需氧生物的生長繁殖（球蟲），促進有益厭氧菌生長，並產生乳酸等有機酸類，降低腸道PH值，間接抑制其他致病菌的生長。
蠟樣芽孢桿菌能刺激動物免疫器官的生長發育，激活淋巴細胞，提高免疫球蛋白和抗體水平，增強細胞免疫和體液免疫功能，提高群體免疫力。
培養特性
蠟樣芽胞桿菌生長溫度為25-37℃，最佳溫度30-32℃。在肉湯中生長混濁有菌膜或壁環，振搖易乳化。在普通瓊脂上生成的菌落較大，直徑3-10mm，灰白色、不透明，表面粗糙似毛玻璃狀或融蠟狀，邊緣常呈擴展狀。偶有產生黃綠色色素，在血瓊脂平板上呈草綠色溶血。在甘露醇卵黃多粘菌素（MYP）平板上，呈伊紅粉色菌落。
耐熱性
蠟桿芽胞桿菌耐熱，其37℃16小時的肉湯培養物的D80℃值（在80℃時使細菌數減少90%所需的時間）約為10-15分鐘；使肉湯中細菌（2.4×107/mL）轉為陰性需100℃20分鐘。其游離芽胞能耐受100℃30分鐘，而乾熱滅菌需120℃60分鐘才能殺死。
流行情況
蠟樣芽胞桿菌作為一種食源性疾病的報導較多，在各種食品中的檢出率也較高，如1982年犬飼等對日本名古屋所采1641份食品樣品中，有193份檢出了該菌、陽性率為11.8%；1984年我國有關單位對南京市所采211份食品樣品中，有81份檢出了該菌，陽性率為38.4%。
蠟樣芽胞桿菌食物中毒通常以夏秋季（6-10月）最高。引起中毒的食品常於食前由於保存溫度不當，放置時間較長或食品經加熱而殘存的芽胞以生長繁殖的條件，因而導致中毒。中毒的發病率較高，一般為60-100%。但也有在可疑食品中找不到蠟樣芽胞桿菌而引起食物中毒的情況，一般認為是由於蠟桿芽胞桿菌產生的熱穩定毒素所致。1985年9月，美國緬因州的健康局報導了在一家日本餐館發生了食物中毒而導致的胃腸炎事件，經調查所有的食品其加工和儲藏都是規範的，僅用剩飯製作的炒飯其是冷藏儲放還是在室溫放置說不清楚，在炒飯中雖然找不到活的蠟樣芽胞桿菌，但是完全可能存在重新加熱過程中消除了活菌而沒有破壞熱穩定毒素的可能性。
致病性
蠟樣芽胞桿菌引起食物中毒是由於該菌產生腸毒素。它產生兩種性質不同的代謝物，引起腹瀉型綜合症的是一種大分子量蛋白；而引起嘔吐型綜合症的被認為是一種小分子量、熱穩定的多肽。
檢測步驟
菌數測定
以無菌操作將檢樣25g (m1)，用滅菌生理鹽水或磷酸鹽緩衝液做成 10-1-10 -5 的稀釋液按GB/T4789.2測定。取各稀釋液。0.1mL，接種在兩個選擇性培養基-甘露醇卵黃多粘菌素(MYP)瓊脂培養基上，用L形棒塗布於整個表面，置3 6 ℃士1 ℃培養12h -20h ，選取適當菌落數的平板進行計數，蠟樣芽胞桿菌在此培養幕上的菌落為粉紅色（表示不發酵甘露醇）周圍有粉紅色的暈（表示產生卵磷脂酶）。計數後，從中挑取五個此種菌落做證實試驗，根據證實的蠟樣芽胞桿菌的菌落數計算出該平板上的菌落數，然後乘其稀釋倍數，即得每克（毫升）樣品中所含蠟樣芽胞桿菌數。例如：將0.1m1的104樣品稀釋液塗布於MYP平板土，其可疑菌落為2 5個，取五個鑑定，證實四個菌落為蠟樣芽胞桿菌，則1g( ML ） 檢樣中所含蠟樣芽胞桿菌數為：
2 5 X 4 /5 X104 X10=2X106
分離培養
取檢樣或稀釋液劃線分離於選擇性培養基（MYP)上置37℃培養12h-20h，挑取可疑的蠟樣芽胞桿菌菌落 接種於肉湯和營養瓊脂做成純培養，然後做證實試驗。
證實試驗
本菌為革蘭氏陽性大桿菌，寬度在1um或1um以上，芽胞呈卵圓形，不突出菌體，多位於菌體中央或稍偏於一端。
本菌在生化性狀上與蘇雲菌芽胞桿菌極為相似,但後者可籍細胞內產生蛋白質毒素結晶加以鑑別。其檢查方法如下:取營養瓊脂上純培養物少許,加少量蒸餾水塗於玻片上,待自然乾燥後用弱火焰固定，加甲醇於玻片上,半分鐘後傾去甲醉,置火焰上乾燥，然後滴加0.5鹼性復紅液，並用酒精燈加熱至微見蒸氣維持l.5min，移去酒精燈,將玻片放置半分鐘，傾去染液,置潔淨自來水充分漂洗、晾乾、鏡檢。在油浸鏡下檢查有無游離芽胞和深染的似菱形的紅色結晶小體（如未形成游離芽胞，培養物應放室溫再保存1d-2d後檢查）如有即為蘇雲金芽胞桿菌,蠟樣芽胞桿菌檢查為陰性。
