《脂聯素對缺血腦組織血管新生作用的影響及其分子機制》是依託上海交通大學，由沈琳輝擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：脂聯素對缺血腦組織血管新生作用的影響及其分子機制
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：沈琳輝
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
脂聯素有抗動脈粥樣硬化的作用，在缺血環境中脂聯素表達增加對血管起到保護作用。本研究擬採用腦缺血小鼠模型，觀察脂聯素及其受體AdipoR1、AdipoR2表達的細胞定位及含量變化，明確腦缺血對三者的影響。將腺相關病毒（AAV）-脂聯素基因局部轉染，形成腦缺血區域脂聯素高表達，通過觀察腦梗塞面積、缺血區周圍新生血管數量和血管內皮生長因子(VEGF)的表達及脂聯素作用途徑中關鍵酶的變化，確定脂聯素是否通過刺激缺血周圍區腦組織的血管新生實現對缺血腦組織的保護。採用基因晶片篩選出在脂聯素干預後與血管修復相關且表達有顯著變化的基因，驗證並確定其中的關鍵候選基因；結合基因晶片篩選在細胞和組織水平觀察已知脂聯素信號通路的變化並探討有否新信號通路存在；採用RNAi干擾候選基因、用特定信號通路的抑制劑和激動劑、脂聯素受體抑制劑等方法確定候選基因功能及脂聯素作用靶點，闡明脂聯素對缺血腦組織保護作用的作用機制。
結題摘要
背景與研究方向：缺血性腦卒中是危害人類健康的常見疾病。既往研究發現缺血區域的血管新生對恢復神經功能至關重要。脂聯素是一種主要由脂肪細胞分泌的激素，有抗炎和抗動脈粥樣硬化的作用，對缺血性腦損傷具有保護作用，但脂聯素在抗缺血損傷中的機制目前仍不明確。本研究運用小鼠腦缺血模型，觀察脂聯素、AdipoR1、AdipoR2在缺血腦組織中的表達；通過腺相關病毒載體基因治療的方法，觀察腦缺血模型中脂聯素對血管新生的影響，採用基因晶片篩選出在脂聯素干預後與血管修復相關且表達有顯著變化的基因，驗證並確定其中的關鍵候選基因；闡述脂聯素在腦缺血中的作用機制。 主要內容、重要結果及關鍵數據：（1）缺血/再灌注後,在小鼠缺血側腦組織中脂聯素蛋白表達量增加，且脂聯素的表達僅位於血管內皮細胞。缺血側腦組織中AdipoR1的蛋白和mRNA表達量增高。（2）APN組小鼠缺血側大腦半球萎縮程度為明顯小於對照組（p<0.01）。APN組缺血周邊區血管密度高於對照組（p<0.05）。 （3）缺血/再灌注後，APN組小鼠P-AMPK、VEGF的表達量在缺血側腦組織中均增高(p<0.01)。 （4）APN組小鼠經AMPK抑制劑Compound C處理後，缺血側大腦半球萎縮程度大於對照組（p<0.05）；缺血周邊區血管計數明顯少於對照組（p<0.01）；缺血側腦組織中P-AMPK蛋白表達量、VEGF蛋白和mRNA的表達水平明顯低於對照組(p<0.01)。（5）缺血/再灌注損傷後，APN-成年組腦內缺血周邊區血管密度高於GFP-成年組（p<0.01）；APN-老年組腦內缺血周邊區血管密度為，顯著高於GFP-老年組（p<0.01）。APN治療後老年組小鼠腦缺血周邊區血管增生、新生血管及動脈增生較成年組更明顯。（6）缺血/再灌注損傷2周后， APN-成年組、APN-老年組DCX的表達明顯高於GFP-成年組、GFP-老年組。APN對老年組小鼠促神經發生作用更顯著（p<0.05）。（7）對脂聯素處理的小鼠缺血腦組織進行基因晶片檢測，未發現差異大於1.5倍表達基因。 科學意義：課題研究了缺血/再灌注損傷後脂聯素在缺血腦組織中的表達、相關介導受體及促進新生血管的形成、減少腦缺血損傷的機制。為今後脂聯素治療腦缺血提供理論依據。
