肌酸激酶檢測試劑盒

用於體外定量測定人血清或血漿中肌酸激酶含量的試劑盒，它是採用分光光度法原理，利用全自動、半自動生化分析儀或分光光度計，在醫學實驗室進行肌酸激酶定量檢驗所使用的臨床化學體外診斷試劑。

基本介紹

• 中文名：肌酸激酶檢測試劑盒
• 外文名：Creatine Kinase Test Reagent
• 管理類別：Ⅱ類醫療器械
• 分類名稱：臨床檢驗分析儀器

分類

按檢測原理分為以下兩類

1. 肌酸激酶測定試劑盒（酶偶聯法）。包括連續監測法、IFCC推薦法、速率法、N-乙醯半胱氨酸法、磷酸肌酸底物法。

2. 肌酸激酶測定試劑盒（比色法）

原理

肌酸激酶（CreatineKinase,CK）通常存在於動物的心臟、肌肉以及腦等組織的細胞漿和線粒體中，是一個與細胞內能量運轉、肌肉收縮、ATP再生有直接關係的重要激酶，它可逆地催化肌酸與ATP之間的轉磷醯基反應。CK測定的方法主要有肌酸顯色法、酶偶聯法，還有螢光法和生物發光法。肌酸激酶檢測試劑盒常用的方法是肌酸顯色法和酶偶聯法。

1. 反應原理

（1）肌酸顯色法（比色法）

磷酸肌酸+ADP 肌酸　+　ATP

肌酸+雙乙醯+α-萘酚 紅色化合物(λ=540nm)

在一定範圍內，紅色深淺與肌酸量成正比，從而可求得血清中CK活性。在反應體系中加入Mg作激活劑；半胱氨酸供給巰基，保持CK活性中心必需基團不被氧化；氫氧化鋇和硫酸鋅沉澱蛋白並中止反應。

（2）酶偶聯法

磷酸肌酸+ADP 肌酸+ATP

ATP+葡萄糖 ADP+6-磷酸葡萄糖

6-磷酸葡萄糖+NADP 6-磷酸葡萄糖+NADPH

利用酶偶聯反應原理連續監測NADP還原生成NADPH，後者引起340nm吸光度的增高。在340nm監測單位時間內NADPH的生成量(ΔA/min)，可計算出CK的活性濃度。

2. 計算方法

（1）酶偶聯法

式中6220為NADPH在340nm的摩爾吸光度，2.30為反應液的總體積(ml)，0.10為血清用量(ml)。ΔA/min為平均每分鐘的吸光度變化值。

（2）肌酸顯色法（比色法）

適應症

心肌缺血、心肌梗死、甲狀腺功能亢進等疾病患者。

檢測樣本

人類血清

樣本要求

1. 空腹採血，採血前不宜做劇烈運動。

2. 可用乾燥管、肝素抗凝管採血加塞送檢。

3. 避免採用溶血、乳穈狀樣品。血液分離血清後2～8℃可穩定一周。

肌酸激酶檢測的意義

1．正常參考值

(1) 肌酸顯色法：8～60U/L(0.5～3.6U)。

(2) 酶偶聯法：男24～195U/L，女24～170U/L。

2. 肌酸激酶臨床意義

增高：
(1) 主要用心肌梗死診斷，CK升高幅度較AST和LDH都大，且出現早，2-4小時開始升高，12-48小時達到高峰，2-4天恢復到正常。尤其對心肌缺血和心內膜下心肌梗死的診斷比其他酶靈敏度高。故動態檢測CK變化有助於觀察病情和預後估計。
(2) 還見於進行性肌營養不良發作期、病毒性心肌炎、多發性心肌炎、肌肉損傷或手術後、腦血管疾病、酒精中毒、甲狀腺功能減退、肺梗塞等。
減低：見於甲狀腺功能亢進症。

進行肌酸激酶檢測的注意事項

檢查前：不可做劇烈運動，保證不食用含有EDTA、檸檬酸、氟化物等抗凝劑的食物。

檢查時：需要抽取少許血清。
不適宜人群：無。

使用磷酸肌酸檢測試劑盒的注意事項

1. 肌酸顯色法

(1) 肌酐、精氨酸、胍乙酸等也可與α-萘酚及雙乙醯產生顏色反應。故腎功能衰竭患者套用自身血清做空白對照，以消除肌酐的影響。

(2) α-萘酚為白色或略帶黃色之結晶，顏色過深，應在乙醇中重結晶後再用。

(3) Mg為激活劑，半胱氨酸提供巰基，氫氧化鋇和硫酸鋅沉澱蛋白並中和反應。

(4) 血清CK活性>200U/L時，套用已知CK活性正常的血清稀釋後重測，其結果乘以稀釋倍數。

2. 酶偶聯法

(1) 最好使用血清作標本，也可用肝素抗凝血漿，因CK活性不穩定，室溫僅能穩定4h，4℃僅穩定8～12h，故標本採集後應儘快分離血清，及時測定。不能及時測定，應避光、低溫保存。溫度升高引起的酶失活為不可逆的。

(2) 紅細胞內不含CK，輕度溶血無影響，但中、重度溶血可因紅細胞內釋放出的AK、ATP及G6P，使CK值假性升高。

(3) Mg、Ca、Mn對該酶有激活作用，Cl、So、Po、枸櫞酸、氟化物可抑制其活性。

擴展閱讀

[1] 葉應嫵等著：全國臨床檢驗操作規程 2006年第三版

參考文獻

[1] 尚紅著.全國臨床檢驗操作規程[M]北京:人民衛生出版社,2015

[2] 王鴻利、叢玉隆著 .實用檢驗醫學[M]北京：人民衛生出版社，2009年