基本介紹
- 中文名：肉與肉製品喹乙醇殘留量的測定
- 外文名：Determination of olaquindox in meat and meat products
原理,試劑與儀器、設備,試劑,儀器和設備,分析步驟,抽樣,試樣製備,測定,色譜參考條件,測定,結果計算,允許差,最低檢出限和回收率,最低檢出限,回收率,液相色譜圖,
原理
用乙腈和水提取樣品中的喹乙醇，提取液經液液淨化後，濃縮，定容作為待測溶液，取一定量注入高效液相色譜儀，經分離，用紫外檢測器檢測，與標準比較定量。
試劑與儀器、設備
試劑
（1）水：三級水。
（2）乙腈：分析純。
（3）乙腈：色譜純。
（4）正己烷：分析純，重蒸餾，用乙腈飽和。
（5）喹乙醇標準品：純度99%以上。
（6）喹乙醇標準溶液：精確稱取喹乙醇標準品10 mg用甲醇溶解並定容至100 mL，配成濃度為0.100 mg/mL的標準儲備溶液，使用時逐級稀釋成適當濃度的標準工作溶液。
儀器和設備
（1）高效液相色譜儀：附紫外檢測器。
（2）組織搗碎機。
（3）離心機：3000 r/min～5000 r/min。
（4）旋轉蒸發儀。
分析步驟
抽樣
（1）零散樣品
若成堆產品，則在堆放空間的四角和中間設採樣點，每點從上、中、下三層取若干小塊混為一份樣品；若零散樣品，則隨機從3～5片胴體上取若干小塊混為一份樣品。每份500 g～l 500 g。
若成堆產品，則在堆放空間的四角和中間設採樣點，每點從上、中、下三層取若干小塊混為一份樣品；若零散樣品，則隨機從3～5片胴體上取若干小塊混為一份樣品。每份500 g～l 500 g。
（2）檢驗批
以不超過5000箱為一檢驗批。同一檢驗批內商品應具有同一特徵，如包裝、標記、產地、規格、等級等。
以不超過5000箱為一檢驗批。同一檢驗批內商品應具有同一特徵，如包裝、標記、產地、規格、等級等。
（3）抽樣數量
①肉
a) 500箱及以下取5箱；
b)501～1000箱取7箱；
c) 1001～3000箱取11箱；
d)3001～4000箱取13箱；
e)4001～5000箱取15箱。
②罐頭
a) 500箱及以下取5箱；
b)501～1000箱取7箱；
c)1001～3000箱取11箱；
d) 3001～4000箱取13箱；
e)4001～5000箱取15箱。
（4）抽樣工具及方法
①肉
每箱取樣一包，去掉塑膠薄膜，從每包肉樣中抽取肉塊不少於25g，總樣量不少於1 kg，放入清潔的容器內，填寫標籤，註明品名、日期、垛位、報驗號、申請單位、取樣人，並及時送交實驗室。
②罐頭
每箱取一罐，填寫標籤，註明品名、日期、垛位、報驗號、申請單位、取樣人，及時送交實驗室。
①肉
a) 500箱及以下取5箱；
b)501～1000箱取7箱；
c) 1001～3000箱取11箱；
d)3001～4000箱取13箱；
e)4001～5000箱取15箱。
②罐頭
a) 500箱及以下取5箱；
b)501～1000箱取7箱；
c)1001～3000箱取11箱；
d) 3001～4000箱取13箱；
e)4001～5000箱取15箱。
（4）抽樣工具及方法
①肉
每箱取樣一包，去掉塑膠薄膜，從每包肉樣中抽取肉塊不少於25g，總樣量不少於1 kg，放入清潔的容器內，填寫標籤，註明品名、日期、垛位、報驗號、申請單位、取樣人，並及時送交實驗室。
②罐頭
每箱取一罐，填寫標籤，註明品名、日期、垛位、報驗號、申請單位、取樣人，及時送交實驗室。
試樣製備
（1）肉
將所取全部樣品，充分攪碎混勻，取有代表性的樣品，總量不少於500 g，裝入清潔容器內，密封，冷藏。
（2）罐頭
將所取全部樣品整罐倒出，充分攪碎混勻，取有代表性的樣品，總量不少於500g，裝入清潔容器內，密封，冷藏。
註：在抽樣和制樣的操作中，應防止樣品受到污染或發生任何變化，以保證實驗樣品能代表總體樣本。
提取和淨化
準確稱取混合均勻的樣品20.00 g(精確到0.01g)置於組織搗碎機中加入80 mL乙腈和20 mL水，搗碎後將樣品離心，將上清液倒入500 mL分液漏斗中，向殘留物中加入50 mL乙腈，同樣均質、離心後，將上清液合併到分液漏斗中，加入100 mL正己烷，振搖5 min，靜置分層。將乙腈層轉移到250 mL旋轉蒸發瓶中，再用20 mL乙腈清洗正己烷層，將乙腈層合併於旋轉蒸發瓶中。60℃水浴將乙腈蒸至約1 mL，用流動相定容至5 mL，經0.45μm微孔濾膜過濾後供色譜測定。
將所取全部樣品整罐倒出，充分攪碎混勻，取有代表性的樣品，總量不少於500g，裝入清潔容器內，密封，冷藏。
註：在抽樣和制樣的操作中，應防止樣品受到污染或發生任何變化，以保證實驗樣品能代表總體樣本。
提取和淨化
準確稱取混合均勻的樣品20.00 g(精確到0.01g)置於組織搗碎機中加入80 mL乙腈和20 mL水，搗碎後將樣品離心，將上清液倒入500 mL分液漏斗中，向殘留物中加入50 mL乙腈，同樣均質、離心後，將上清液合併到分液漏斗中，加入100 mL正己烷，振搖5 min，靜置分層。將乙腈層轉移到250 mL旋轉蒸發瓶中，再用20 mL乙腈清洗正己烷層，將乙腈層合併於旋轉蒸發瓶中。60℃水浴將乙腈蒸至約1 mL，用流動相定容至5 mL，經0.45μm微孔濾膜過濾後供色譜測定。
測定
色譜參考條件
a) 色譜柱：ODS C183.9 mm×150 mm；
b) 流動相：乙腈+水(10+90)；
c)流速：1.0 mL/min；
d) 溫度：35℃；
e)檢測器：紫外檢測器；
f)檢測波長：380 nm。
b) 流動相：乙腈+水(10+90)；
c)流速：1.0 mL/min；
d) 溫度：35℃；
e)檢測器：紫外檢測器；
f)檢測波長：380 nm。
測定
根據液相色譜儀靈敏度，取標準系列各濃度20 μL分別注入液相色譜儀，測得該濃度標準溶液的峰面積（峰高）。以標準溶液濃度(μg/mL)為橫坐標，峰面積（峰高）為縱坐標繪製標準曲線。
取樣品溶液20μL注入液相色譜儀，測得喹乙醇的峰面積（峰高）。從標準曲線中查出相應的濃度 (μg/mL)。
取樣品溶液20μL注入液相色譜儀，測得喹乙醇的峰面積（峰高）。從標準曲線中查出相應的濃度 (μg/mL)。
結果計算
採用外標法用峰面積（峰高）定量，按式(1)計算喹乙醇殘留量：
式中
X——樣品中喹乙醇殘留量，單位為毫克每千克(mg/kg)；
c——樣品峰在標準曲線中查得的相應濃度，單位為微克每毫升(μg/mL)；
V——樣品最終定容體積，單位為毫升(mL)；
V0——標準溶液進樣體積，單位為微升(μL)；
V1——樣品溶液進樣體積，單位為微升(μL);
m——樣品質量，單位為克(g)；
1000--單位換算係數。
V1——樣品溶液進樣體積，單位為微升(μL);
m——樣品質量，單位為克(g)；
1000--單位換算係數。
允許差
本方法允許差≤10%。
最低檢出限和回收率
最低檢出限
本方法的最低檢出限為0.04 mg/kg。
回收率
本方法的回收率在70%～86%之間。
液相色譜圖
喹乙醇標準色譜圖
