聚合酶鏈式反應檢查

聚合酶鏈式反應是一種在體外快速擴增特定基因或DNA序列的方法，故又稱為基因的體外擴增法。PCR技術類似於DNA的天然複製過程，其特異性依賴於與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。

基本介紹

• 名稱：聚合酶鏈式反應檢查
• 所屬分類：DNA

臨床意義

PCR能快速特異擴增任何已知目的基因或DNA片段，並能輕易在皮克(pg)水平起始DNA混合物中的目的基因擴增達到納克、微克、毫克級的特異性DNA片段。因此，PCR技術一經問世就被迅速而廣泛地用於分子生物學的各個領域。　異常結果： 各種疾病所致的異常，例如梅毒。①一期梅毒。即硬下疳 ，潛伏期2-4周，外生殖器部位發生暗紅色硬腫塊 、淺潰瘍 ，有軟骨樣硬度，周圍淋巴結腫大。②二期梅毒。在一期梅毒 1-2 個月之後，全身皮膚、黏膜發生對稱泛發皮疹、斑疹、丘疹、膿皰疹等。黏膜可發生黏膜斑、扁平濕疣，傳染性強。③三期梅毒。發生在感染後2-3年乃至10年，皮膚為樹膠樣腫，還可涉及骨、關節、心、血管，表現為主動脈炎、主動脈瓣閉鎖不全和主動脈瘤等，侵及神經為脊髓癆 ，全身麻痹 ( 麻痹性痴呆 )等等。　需要檢查的人群：疑似某種特定的疾病病人，進行分子特異性檢查。

注意事項

不合宜人群： 沒有　檢查前禁忌：注意正常的生活飲食習慣，注意個人衛生。　檢查時要求：積極配合醫生

檢查過程

PCR由變性--退火--延伸三個基本反應步驟構成：①模板DNA的變性：模板DNA經加熱至93℃左右一定時間後，使模板DNA雙鏈或經PCR擴增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結合，為下輪反應作準備;②模板DNA與引物的退火(復性)：模板DNA經加熱變性成單鏈後，溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結合;③引物的延伸：DNA模板--引物結合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP為反應原料，靶序列為模板，按鹼基配對與半保留複製原理，合成一條新的與模板DNA 鏈互補的半保留複製鏈重複循環變性--退火--延伸三過程，就可獲得更多的“半保留複製鏈”，而且這種新鏈又可成為下次循環的模板。每完成一個循環需2-4分鐘，2-3小時就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍。到達平台期(Plateau)所需循環次數取決於樣品中模板的拷貝。　PCR技術敏感性高，特異性強，操作簡便、快速，在生命科學研究、食品衛生、醫療、法醫及環境監測等諸多方面都具有重要的套用價值。