基本介紹
- 中文名：終止密碼子
- 琥珀突變：amber
- 時間：1962年
- 終止密碼子：UAG,UAA,UGA
簡介,發現過程,實驗方法,關鍵破譯,
簡介
終止密碼: UAG,UAA,UGA是終止密碼子。相應的DNA上的終止密碼子序列是TAG,TAA,TGA。
終止密碼子又稱“無意義密碼子”。不編碼任何氮基酸的密碼子，如UAA，UAG和UGA。當肽鏈延長到這3個密碼於的任塒1個剛，即行停止，從而使已合成的多肽鏈釋議出來，凶此終止密碼子柏當於1個停止信號。
密碼子UAA,UAG和UGA並不編碼任何胺基酸,因此,也稱為無義密碼子( nonsensecodon)但這個名稱並不恰當,因為它們雖然不編碼任何胺基酸,卻起著終止肽鏈合成的作用,因此,稱為終止密碼子( termination codon)。UAA也稱為赭石型( ochre),UAG稱為琥珀型( amber),UGA稱為乳白型(opal)密碼子。所有這3個密碼子均是作為脈鏈終止的密碼子,它們在蛋白質合成中起著終止肽鏈延長的作用。在第九章將談到,有兩個釋放因子RF1和RF2,它們分別識別2個終止密碼子:RF1識別UAA和UAG,RF2識別UAA和UGA。RF1和RF2均是蛋白質，這便表明，多核苷酸不僅可以和另一種多核苷酸相互作用，也可以和蛋白質起相互作用;也即是說,不僅鹼基與鹼基之間可以生成氫鍵而互相識別，也可以和蛋白質中的胺基酸生成氫鍵而被識別。
發現過程
1964年Yanofsky在研究E.coli色氨酸合成酶A蛋白時推測無義密碼子的存在。他的推測/是從兩個不同的角度：一是為trp A編碼的mRNA還編碼了trpB，trpC，trpD和trpE。即一個mRNA 分子中可以作為不同多肽的模板，那么有可能在翻譯時中途在某個位點（兩個肽的連線處〕停止，然後再從下一個新的起點翻譯，這樣使各個肽可以分開，而不至於產生一條很長的肽鏈。這就意味著終止密碼子的存在。另一個角度是他發現E.coli Trp-的突變株是不能合成完整的色氨酸合成酶蛋白，但繼續對它進行誘變可以得到回復突變。回復突變中有兩種，一種是個別發生了變化，而另一種是完全回復，沒有任何胺基酸組成的變化，這表明，E.coliTrp-不可能是任何移碼突變的結果，那么這類的突變很可能攜帶有阻止合成的無義密碼子。
由於頭部蛋白80%是由新合成的蛋白質組成。因此他們將各種突變型及野生型T4噬菌體侵染E.coli後10分鐘，把14C標記的胺基酸加到培養基中，過一段時間，從感染的E.coli 中抽提蛋白，頭部蛋白可以通過14C標記來加以鑑別。
實驗方法
他們的實驗方法不是對各種突變型的產物測序，而是先將野生型的頭部蛋白用胰蛋白酶和糜蛋白酶來處理，消化後所產生的極複雜的混合物中，通過電泳能分離、鑑定出8個各有特徵的頭部蛋白蛋白片段，分別是Cys, T7C(His), C12b(Tyr), T6(Trp), T2a(Pro), T2(Trp), C2(Tyr)和C5(His)片段。然後再測出各T4頭部蛋白突變型產物含有幾個以上的肽段來排序。表示排序的結果和精細作圖的序列相一致，不僅表明了基因和蛋白質的共線性關係，同時證明突變型頭部蛋白基因內有無義突變的存在，其位置應在各種突變產物的末端。
關鍵破譯
直到1965年Weigert,M.和Ggaren,A由鹼性磷酸酶基因中色氨酸位點的胺基酸的置換證明E.coli中無義密碼子的鹼基組成揭示了琥珀和赭石（ochre）突變基因分別是終止密碼子UAG和UAA。當時64個密碼中的61個已破譯，只留下了UAA、UAG 和UGA有待確定。Garen等為了鑑定無義密碼子採用了和Brenner相似的策略。他們從E.coli的鹼性磷酸酯酶基因 (pho A)中的一個無義突變品系中分離了大量的回復突變株，然後來探察每一個無義突變中在多肽中相當於已回復的無義密碼子位置上的胺基酸究竟是什麼胺基酸。可以看出無義密碼子是從該基因的色氨酸位點的密碼子產生的。在回復突變中，無義密碼子變成了Trp、Ser、Tyr、Leu、Glu、Gln和Lys的相應密碼子。僅有Trp的UGG變成UAG，然後在此基礎上回復突變成7種胺基酸，因此Trp 產生的無義突變的密碼子就是UAG。最後1967年Brennr和Crick證明UGA是第三個無義密碼子。根據無義突變的三種暱稱，三個終止密碼子UAA叫赭石（ochre）密碼子（相應於赭石突變）；UAG叫琥珀密碼子（相應於琥珀突變）；UGA叫蛋白石（opal）密碼子（相應於蛋白石突變）。
