檢查前準備
向被檢測者解釋本操作的目的、方法等,以消除顧慮;選取患者血液、尿液及腦脊液等進行檢測。
操作方法
1.外毒素檢測
(1)生物學方法:操作複雜,且不易獲得敏感動物,動物的個體差異影響結果判斷,只有在發現新毒素的特殊情況下採用。
(2)免疫血清方法:具有快速、靈敏、特異的優點,且可進行大樣品量篩選。有沉澱反應、顆粒吸附凝集試驗(血凝試驗和膠乳凝集試驗)、固相放射免疫試驗、酶聯免疫吸附試驗和免疫印跡試驗。
(3)核酸和基因診斷技術:基因探針技術可檢查單個菌落產生毒素的性質,通常取病原菌染色體或質粒毒素基因片段製備成探針,利用放射性核素或非放射性生物系統標記,以檢查未知標本,不需要培養細菌,操作簡單。
(4)自動化檢測:儀器原理均根據微生物形態、代謝產物和血清學反應設計,包括細胞顆粒計數儀、光散射測定儀、顏色改變濃度儀、薄層掃瞄器和螢光光度計等。
2.內毒素檢測
(1)家兔熱原試驗:是將定量的被檢測標本通過耳緣靜脈注入家兔內,觀察家兔注射後體溫變化,判斷是否存在內毒素。
(2)鱟試驗:是目前檢測內毒素最敏感的方法,可檢測量微量的脂多糖(LPS)(0.01~1 ug/ ml)。取少量鱟試劑放於兩支試管中,加入蒸餾水使之溶解,其中一支試管加入少量標準內毒素,另一支加入蒸餾水進行對照,將上述兩支試管輕輕搖勻後,垂直置於37℃溫箱中,1h後觀察有無凝固,發生凝固者為陽性,不凝固者為陰性。
臨床意義
1.外毒素檢測
進行細菌鑑定,同時可區分產毒株與非產毒株,如白喉毒素、肉毒毒素的檢測等。
2.內毒素檢測
內毒素檢測靈敏度高,操作簡便、快速。內毒素檢測主要用於確診患者是否發生革蘭陰性菌感染和內毒素血症,陽性即有臨床意義;鱟試驗對革蘭陰性細菌內毒素以外的物質、革蘭陽性細菌、病毒毒素檢測均為陰性。