細菌厭氧培養

培養方法

1．標本採集

採集標本時，除糞便、咽拭子、痰等標本外，其他樣本均應以嚴格無菌技術採集。採集時間宜於病程的急性期、早期、症狀典型期或用藥前。採集量不宜太少，標本盛於無菌容器內。標本運送應避免接觸空氣，必要時床邊接種。

2．培養方法

（1）厭氧缸法：將接種標本的平板或液體培養基試管放入厭氧缸內培養，厭氧缸是普通的乾燥缸，用物理化學方法除去缸內氧氣，造成無氧環境，以利於專性厭氧菌生長。常用的方法有抽氣換氣法和氣體發生袋法。

（2）厭氧袋法：即在無毒、透明不透氣的塑膠袋內造成無氧環境培養厭氧菌。塑膠袋內裝入氣體發生管、美藍指示劑管、鈀催化劑管、乾燥劑。放入已接種細菌的平板後，儘量擠出袋內空氣，然後密封袋口。先折斷氣體發生管，後折斷美藍指示劑管，若美藍無色表示袋內已達無氧狀態，可置於35℃培養箱內孵育。

（3）厭氧手套箱：是公認的培養厭氧菌的最佳儀器之一。它是一個密閉的大型金屬箱，箱前面有一個有機玻璃透明面板，板上裝有兩個手套，可通過手套在箱內進行操作。這種厭氧箱適於培養基還原、厭氧菌標本接種、分離培養、生化鑑定和體外藥敏試驗等厭氧菌培養的全套操作。

（4）焦性沒食子酸法：在一潔淨的玻片上鋪上紗布或濾紙，均勻撒上焦性沒食子酸，然後再混入碳酸氫鈉粉末或滴入氫氧化鈉溶液，迅速將已接種細菌的平板倒扣在上面，用融化的石蠟封邊，造成一個封閉空間。焦性沒食子酸與鹼反應後耗氧。該法用於厭氧不嚴格的厭氧菌的培養。

（5）皰肉培養基：皰肉和肉湯裝入大試管，液面封凡士林，造成無氧環境。

（6）黃磷法：在可密閉的玻璃容器底部裝水，上放一塊隔板，把接種細菌的培養皿用紙包裹，放在隔板上。在容器上部放一個敷有碳酸鈣的無菌平皿，將黃磷置於其中點燃，立即密閉容器，造成無氧環境。

培養陽性，結合臨床表現可診斷相應細菌感染。

厭氧菌感染常見於臟器膿腫、腹膜炎、膿性胸膜炎、蜂窩織炎、牙周炎、盆腔炎和闌尾炎。臨床已診斷的厭氧菌感染中，約80%是由擬桿菌屬、消化鏈球菌屬和梭菌屬這三大類厭氧菌引起，其中最常見的是脆弱擬桿菌、大消化鏈球菌和產氣莢膜梭菌。