矛頭蝮蛇血凝酶，是從矛頭蝮蛇的毒液分離出來的凝血物質，是17種胺基酸組成的單鏈糖蛋白，總胺基酸數231個。含兩種類酶成分：類凝血酶（巴西矛頭蝮蛇巴曲酶及磷脂依賴性凝血因子X激活物。本品的類凝血酶作用是切斷纖維蛋白原α鏈N端的A纖維蛋白肽，形成一種不穩定的纖維蛋白，能使血管收縮促進凝血；本品的類凝血激酶能促進凝血酶原轉變為凝血酶，能使即便是無鈣的血漿也能產生不穩定的纖維蛋白；另外，本品可提高血小板聚集功能，使之發生不可逆的聚集。以上三個方面共同作用，產生本品的止血效應。
基本介紹
- 藥品名稱：矛頭蝮蛇血凝酶
- 主要適用症：內、外、婦產、眼、耳鼻喉科疾病並發的出血
- 主要用藥禁忌：血栓或栓塞史者禁用
- 劑型： 注射劑
- 是否納入醫保：是
- 藥品類型：其他止血藥
- 不良反應：發生率較低，偶見過敏樣反應
- 注意事項： 限出血性疾病治療的二線用藥； 預防使用不予支付
適應症,臨床套用,不良反應,注意事項,藥典信息,基本信息,製法要求,性狀,鑑別,檢查,效價測定,類別,貯藏,製劑,
適應症
可用於需減少流血或止血的各種醫療情況，如：內、外、婦產、眼、耳鼻喉、口腔科疾病並發的出血及出血性疾病；也可用於預防出血，如手術前用藥，可避免或減少術中、術後出血；用於消化道出血、血友病血腫、血小板減少性疾病伴出血的輔助治療。本藥更適用於傳統止血藥無效的出血患者。
臨床套用
靜注、肌注或皮下注射：成人1～2KU/次，兒童0.3～0.5KU/次。緊急情況下，立即靜脈注射1KU，同時肌注1KU。各類外科手術，手術前1小時肌注1KU或手術前15分鐘靜注1KU；手術後每日肌注1KU，連用3天。
不良反應
1.不良反應發生率較低，偶見過敏樣反應。
2.本藥超常規劑量5倍以上使用時，可引起凝血因子Ⅰ降低、血液粘滯度下降，因此對大劑量治療尚有爭議。
注意事項
有血栓或栓塞史者禁用。偶有過敏反應。用藥期間注意監測出凝血時間。
（說明：上述內容僅作為介紹，藥物使用必須經正規醫院在醫生指導下進行。）
藥典信息
基本信息
本品系從矛頭蛾蛇（Bothrops Atrox）蛇毒中提取的具有止血作用的蛋白酶類物質，每1mg中含矛頭腹蛇血凝酶活力不得少於800單位，每1mg蛋白質中含矛頭腹蛇血凝酶活力不得少於2500單位。
製法要求
本品系從檢驗合格的矛頭腹蛇蛇毒中經透析、特異性親和色譜等多種色譜方法分離提取，並經冷凍乾燥製得。生產過程應符合現行版《藥品生產質量管理規範》的要求。
性狀
本品為白色凍乾塊狀物或粉末，無味。
本品在水中易溶。
鑑別
1、取本品，加水溶解並稀釋製成每1mL中含100µg的溶液，作為供試品溶液，取小試管，加入凝血質控血漿混懸液［凝血質控血漿（MDC Hemostasis）放至室溫，每支加水1.0mL，放置15分鐘，期間間或輕搖，每次使用前輕輕搖勻]0.2mL，置37°C±0.5°C水浴中2分鐘，加供試品溶液0.2mL，置37°C±0.5°C水浴中振搖，觀察，血漿應在10秒內出現白色絮團。
2、取試管1支，加0.4mol/L碳酸鈉溶液1mL、鑑別1項下的供試品溶液1mL與0.1mol/L福林試液1mL，置37°C±0.5°C水浴中20分鐘，溶液應呈藍色。
3、取本品與矛頭腹蛇血凝酶對照品適量，分別加水溶解並製成適宜濃度的溶液，作為供試品溶液與對照品溶液，依法測定（通則3405 第一法），供試品溶液的圖譜應與對照品溶液的圖譜一致。
4、照電泳法（通則0541第五法，還原型SDS-聚丙烯醯胺凝膠電泳法）測定。
取本品，加水溶解並稀釋製成每1mL中含蛋白質1mg的溶液，作為供試品儲備液，取此儲備液30µL，加還原型供試品緩衝液10µL，混勻，置沸水浴中加熱5分鐘，作為供試品溶液；取矛頭腹蛇血凝酶對照品適量，同法製備對照品溶液。取供試品溶液和對照品溶液各15µL，分別加至上樣孔，分離膠濃度為12.5%，用考馬斯亮藍R250染色，供試品溶液主帶的遷移率應與對照品溶液主帶的遷移率一致。
檢查
純度
（1） 照電泳法（通則0541第五法，非還原型SDS-聚丙烯醯胺凝膠電泳法）測定。
取鑑別4項下供試品儲備液30µL，加非還原型供試品緩衝液10µL，混勻，置沸水浴中加熱5分鐘，作為供試品溶液。取供試品溶液15µL，加至上樣孔，分離膠濃度為12.5%，用考馬斯亮藍R250染色，應顯示一條帶。
（2）照高效液相色譜法（通則0512）測定。
供試品溶液：取本品，加流動相A溶解並製成每1mL中約含蛋白質1mg的溶液。
色譜條件：用丁基矽烷鍵合矽膠為填充劑，以0.1%三氟乙酸的0.1%三乙胺水溶液為流動相A，以0.1%三氟乙酸的0.1%三乙胺乙腈溶液為流動相B，按下表進行梯度洗脫，檢測波長為280nm，進樣體積50µL。
時間（分鐘） | 流動相A（%） | 流動相B（%） |
0 | 60 | 40 |
10 | 34 | 66 |
20 | 60 | 40 |
35 | 60 | 40 |
測定法：取供試品溶液注入液相色譜儀，記錄色譜圖。
限度：按峰面積歸一化法計算，矛頭腹蛇血疑酶主峰面積應不低於總峰面積的95.0％。
分子量
照電泳法（通則0541第五法，還原型SDS-聚丙烯醯胺凝膠電泳法）測定。
取鑑別4項下的供試品溶液與分子量對照品溶液（系列標準蛋白質分子量範圍為10K~120K，照說明書使用），照鑑別4項下的方法測定。本品分子量應為36000±3000。
磷脂酶A
照紫外-可見分光光度法（通則0401）測定。
供試品溶液：取本品，加水溶解並稀釋製成每1mL中含10單位的溶液。
對照溶液：取磷脂酶A（蜂毒），加水製成每1mL中含3.6單位的溶液。
測定法：取37°C預熱的卵磷脂溶液（取卵磷脂0.67g，加水適量，溶解成膠體溶液後，調節pH值至8.95，加水至100mL）2mL，置1cm吸收池中，加37°C水浴中預熱的供試品溶液或對照溶液1mL，混勻，以水代替供試品溶液，同法操作，作為空白。在546nm的波長處分別測定吸光度為A1和 AS1，再於37°C±0.5°C水浴中保溫10分鐘，分別測定吸光度為A2和AS2。
限度：供試品溶液吸光度增加值不得大於對照溶液吸光度增加值（即每1單位供試品中磷脂酶A含量不得大於0.36 單位）。
單位定義：在37°C、pH8.5條件下，每分鐘使1.0µmol的L-α-磷脂醯膽鹼（L-α-卵磷脂）水解成L-α-溶血磷脂膽鹼和一個脂肪酸的酶量定義為1單位。
L-胺基酸氧化酶
照紫外－可見分光光度法（通則0401）測定。
供試品溶液：取本品，加水溶解並稀釋製成每1mL中含10單位的溶液。
對照溶液：取L-胺基酸氧化酶（東部菱背響尾蛇），加水製成每1mL中含0.056單位的溶液。
測定法：取37°C預熱的亮氨酸溶液[取亮氨酸0.1g，3,3-二甲氧基聯苯胺6.5mg，加三羥甲基氨基甲烷-HCl緩衝液（取三羥甲基氨基甲烷1.21g，置燒杯中，加水60mL溶解，用6mol/L HCl溶液調節pH值至7.6，轉移至100mL量瓶中，用水稀釋至刻度）溶解並稀釋至100mL]2.97mL，置1cm吸收池中，加37℃預熱的過氧化物酶溶液（取過氧化物酶10mg，加水溶解至10mL，臨用時配製）10µL，分別加入供試品溶液或對照溶液20µL，混勻，以水代替供試品溶液，同法操作，作為空白。在436nm的波長處分別測定吸光度為A1和AS1，再於37°C±0.5℃水浴中保溫5分鐘，分別測定吸光度為A2和AS2。
限度：供試品溶液吸光度增加值不得大於對照溶液吸光度增加值（即每1單位供試品中L-胺基酸氧化酶含量不得大於0.0056單位）。
單位定義：在37°C、pH6.5條件下，每分鐘使1.0µmol的L胺基酸氧化脫氨基的酶量定義為1單位。
磷酸酶
照紫外-可見分光光度法（通則0401）測定。
供試品溶液：取本品，加水溶解並稀釋製成每1mL中含10單位的溶液。
對照溶液：取磷酸酶（小麥胚），加水製成每1mL中含0.03單位的溶液。
測定法：取0.165%對硝基苯磷酸二鈉溶液（pH8.5）1mL，分別加入供試品溶液或對照溶液0.1mL，置37°C±0.5℃水浴中保溫30分鐘，再加0.02mol/L氫氧化鈉溶液10mL，搖勻，以水代替供試品溶液，同法操作，作為空白。在400nm的波長處分別測定吸光度。
限度：供試品溶液的吸光度不得大於對照溶液吸光度（即每1單位供試品中磷酸酶含量不得大於0.003單位）。
單位定義：在37℃、pH4.8條件下，每分鐘水解1.0µmol的對硝基苯磷酸二鈉的酶量定義為1單位。
神經毒
取本品，加氯化鈉注射液溶解並稀釋製成每1mL中含2單位的溶液，作為供試品溶液。取體重為300~500g的鴿子3隻，每1kg體重注射供試品溶液0.5mL，靜脈給藥，觀察24小時。動物不得出現神經行為異常，如步態不穩，翻正反射消失，前後肢握力減弱，抽搐，頸項強直等，或死亡，如3隻鴿子中有一隻出現上述神經行為異常或死亡，應另取鴿子5隻複試，均不得出現神經行為異常或死亡。
出血毒
取本品，加氯化鈉注射液溶解並稀釋製成每1mL中含50單位的溶液，作為供試品溶液。取體重18-22g的小白鼠5隻，每隻一側背部皮下注射0.2mL，另一側注射氯化鈉注射液0.2mL作對照，注射24小時後處死動物，剝皮觀察，與對照部位相比，小鼠背部均不得有出血現象。
細菌內毒素
取本品，依法測定（通則1143），每1單位矛頭腹蛇血凝酶中含內毒素的量應小於50EU。
異常毒性
取本品，加氯化鈉注射液溶解並稀釋製成每1mL中含1.0單位的溶液，依法測定（通則1141），按靜脈注射法給藥，應符合規定。
效價測定
酶活力
標準品溶液：取1支矛頭腹蛇血凝酶標準品（供效價測定用），精密加水1mL使溶解並定量稀釋製成每1mL中各約含0.2、0.5、1.0、2.0、3.0單位的溶液。
供試品溶液：精密稱取本品適量，加水溶解並定量稀釋製成每1mL中約含1.0單位的溶液。
測定法：取凝血質控血漿混懸液{凝血質控血漿（MDC Hemostasis）放至室溫，每支加水2.0mL，放置15分鐘，期間間或輕搖，每次使用前輕輕搖勻]0.1mL，分別加入20支試管中並置凝血分析儀中，37°C±0.5°C條件下預熱2分鐘，精密量取系列濃度的標準品溶液各0.2mL，迅速加入上述各試樣管中，記錄凝固時間，每種濃度重複測定4次，計算平均值（4次測定最大值與最小值之差不得超過平均值的10%，否則重測）。以標準品溶液濃度的對數為橫坐標，凝固時間對數為縱坐標，計算線性回歸方程（相關係數應大於0.99）。
取供試品溶液，照上法測定，從回歸方程求得供試品溶液濃度，並計算每1mg中矛頭腹蛇血凝酶活力。
矛頭腹蛇血凝酶單位定義：37°C±0.5°C條件下，每0.2mL酶溶液使0.2mL凝血質控血漿混懸液，在58~62秒出現白色絮團的酶量，以酶溶液的濃度計，定義為每1mL酶溶液中含矛頭腹蛇血凝酶1個單位。
蛋白質
取本品適量，精密稱定，照蛋白質含醯測定法（通則0731第二法）測定，計算每1mg中蛋白質的量（mg）。
比活力
本品矛頭腹蛇血凝酶活力單位除以蛋白質的量（mg）即得。
類別
止血藥。
貯藏
遮光，冷處保存。
製劑
注射用矛頭腹蛇血凝酶。
