盒式突變改造

一次可以在一個位點上產生20種不同胺基酸的突變體,可以對蛋白質分子中重要胺基酸進行"飽和性"分析。利用定位突變在擬改造的胺基酸密碼兩側造成兩個原載體和基因上沒有的內切酶切點,用該內切酶消化基因,再用合成的發生不同變化的雙鏈DNA片段替代被消化的部分。這樣一次處理就可以得到多種突變型基因。該方法叫做盒式突變改造。

蛋白質的改造,從簡單的物理、化學法到複雜的基因重組等等有多種方法。物理、化學法:對蛋白質進行變性、復性處理,修飾蛋白質側鏈官能團,分割肽鏈,改變表面電荷分布促進蛋白質形成一定的立體構像等等;生物化學法:使用蛋白酶選擇性地分割蛋白質,利用轉糖苷酶、酯酶、醯酶等去除或連線不同化學基團。

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