生物學,細胞生物學以其實驗條件便於控制,實驗穩定,重複性好,實驗周期短,儀器試劑(包括各類試劑盒)發展快,手段豐富,國際研究普遍(使新方法,新技術層出不窮),研究積累快,參考文獻豐富,可以觀察人體的不同組織的細胞,分子(這又強於動物實驗),給套用該方法技術研究創造了絕佳的條件已進行的研究揭示和開拓出生命科學廣大的未知領域. 由於分子生物學新興,發展快,給國內外,中西醫創造了同等的發展和套用的機會,再次使中,西醫有可能站到同一起跑線上.抓住這個千載難逢的機會,充分利用它,駕御它,必將給中醫學注入強大的生命.
基本介紹
- 中文名:生物學方法
- 外文名:biological method
保持中醫藥優勢的需要
繼承和發展中醫基礎理論的需要
二.分子生物學的主要技術和方法
(一)載體
載體的使用目的:
1)重組基因,以便放大某一基因片段,用於探針,基因功能檢測,報導基因研究等.方法是:把某一DNA片段插入到相應的載體(比如質粒,噬菌體,哺乳類細胞表達載體等),給予擴增,用以標記探針,測序,cDNA庫建立,基因功能檢測等多種分子生物學實驗.因此重組質粒就成為中醫藥實驗研究中最為常規的實驗.
通常,擴增目的DNA主要藉助兩類方法,即PCR技術和載體重組技術,鑒於PCR技術受到酶的性能和方法學等多方面的限制,某些DNA和超過一定長度DNA的擴增會有困難,所以載體重組技術倍受青睞.
2)DDPCR產物的克隆和測序.
3)RACEPCR產物的克隆和測序.
4)構建基因庫,cDNA庫,等.
5)基因功能檢測.
6)基因工程(包括基因治療之類).
1.質粒.質粒是一類雙鏈,閉環的DNA分子,長度為3kb左右,存在於細菌體中,獨立於細菌染色體之外進行複製和遺傳的輔助性遺傳單位.通過改造,使實驗室常用質粒具備了以下幾種特性:1)含有多克隆位點區域,可方便的插入目的DNA片段.2)對細菌的可轉移性,即在實驗中,可將質粒誘導入細菌.3)選擇標記.常用的有抗生素抗性基因.
這樣,一旦質粒進入細菌,便可使該細菌對相應的抗生素產生抵抗能力,在含這一抗生素的瓊脂平板上傳代,如此,便於鑑定質粒誘導入細菌成功與否.4)在細菌體內可獲得較高的拷貝數,例如一種叫pUC的質粒,在單一細菌體中的拷貝數可達500-700個.因此質粒已成為分子生物學中套用最為廣泛的載體.