生物分離工程實驗（第2版）

《生物分離工程實驗（第2版）》是由劉葉青主編，高等教育出版社2014年出版的教材。該書主要適於生物技術和生物工程專業本科生使用，也適於相關專業研究生選用，還可供科研人員查閱參考。

全書共分為三篇，第一篇為生化物質分離純化技術的基本原理；第二篇為13個生物分離工程基礎實驗；第三篇設計了16個大型綜合實驗。

基本介紹

• 中文名：生物分離工程實驗（第2版）
• 作者：劉葉青
• ISBN：978-7-04-039215-9
• 頁數：244頁
• 出版社：高等教育出版社
• 出版時間：2014-03-14
• 裝幀：平裝
• 開本：16開
• 版面字數：370千字

成書過程

《生物分離工程實驗（第2版）》在第一版基礎上新增了親和沉澱、再生型兩水相萃取、金屬螯合層析等新內容（見第三篇實驗一、實驗四和實驗十六），新增了中試規模的實驗內容和放大計算。另外，原第三篇實驗一“四環素的沉澱法提取及鑑定”，鑒於四環素是老產品，已很少生產，故將其刪除，其中涉及的薄層層析分離技術在新增設的第二篇實驗十一中加以體現。

該書實驗內容中涉及的原理主要體現在第一篇中，新增了親和沉澱法（第一篇第四章第五節）、再生型兩水相萃取（第一篇第七章第六節）和離子交換設備與過程的放大（第一篇第十一章第六節）。

參加第2版編寫和修訂工作的編者除第1版人員外，徐環昕編寫了第一篇第十一章的第六節和第三篇綜合實驗十；馬小雷編寫了第二篇基礎實驗十一；丁兆陽編寫了第三篇綜合實驗一和第一篇第四章的第五節；萬俊芬編寫了第三篇綜合實驗十六；劉晶晶對第三篇綜合實驗四做了部分工作。此外，龔小雁、趙延斌、徐環昕等老師對該教材的再版提供了部分數字資源。該次修訂也得到了曹學君教授的支持。

2014年3月14日，《生物分離工程實驗（第2版）》由高等教育出版社出版。

內容簡介

《生物分離工程實驗（第2版）》共分為三篇，第一篇為生化物質分離純化技術的基本原理，簡明扼要地敘述了各種分離技術的基本原理；第二篇為13個生物分離工程基礎實驗，重點強調各種分離技術的參數測定及基本實驗技能的訓練；第三篇設計了16個大型綜合實驗，著重培養學生科研思維與技能。

該書實驗內容不僅有常用的傳統生物分離技術，如沉澱法、有機溶劑萃取法、離子交換和大格線樹脂吸附法，還涉及各種新分離技術，包括新型的萃取技術，膜分離技術，層析（色譜）技術和電泳技術。涉及的實驗材料不僅有微生物發酵液和基因工程菌的細胞培養液，還有動植物天然產物；不僅包括了中、小分子物質的分離過程，還有蛋白質和酶等生物大分子物質的分離純化技術。

教材目錄

前輔文 第一篇 生化物質分離純化技術的基本原理 第一章 培養液的預處理 一、 凝聚和絮凝 二、 加沉澱劑 三、 調節培養液的pH 四、 吸附作用 第二章 細胞破碎 一、 機械法 二、 非機械法 第三章 基因工程菌包含體的分離純化 一、 包含體的洗滌和目標蛋白的變性溶解 二、 目標蛋白的復性 第四章 沉澱法 一、 鹽析法沉澱蛋白質 二、 等電點沉澱法 三、 有機溶劑沉澱法 四、 其他沉澱方法 五、 親和沉澱法 第五章 膜分離技術 一、 膜分離技術的分類 二、 膜的性能參數 三、 膜的結構和材料 四、 膜組件型式和操作方式 五、 濃差極化 六、 影響膜分離的因素 七、 膜的污染和清洗 八、 膜親和過濾法 第六章 有機溶劑萃取法 一、 基本原理和操作 二、 分配係數和弱電解質的分配平衡 三、 影響萃取操作的因素 第七章 兩水相萃取 一、 基本概念 二、 成相系統 三、 分配平衡 四、 影響分配係數K*i的因素 五、 親和分配 六、 再生型兩水相萃取 第八章 反膠束萃取 一、 基本概念和反膠束相系統 二、 反膠束萃取過程 三、 影響反膠束萃取的因素 四、 親和反膠束萃取 第九章 超臨界流體萃取 一、 超臨界流體的特性 二、 超臨界流體的溶解性能 三、 超臨界流體萃取的基本操作和設備 四、 夾帶劑對超臨界CO2流體萃取的強化作用 五、 超臨界萃取的特點和套用 第十章 微波萃取技術 一、 基本原理 二、 微波萃取的特點 三、 影響微波萃取的因素 四、 微波萃取設備 五、 微波萃取技術的套用 第十一章 離子交換法 一、 離子交換劑 二、 離子交換樹脂的分類 三、 離子交換樹脂幾個主要的物理參數 四、 離子交換樹脂的交換能力和選擇性 五、 離子交換樹脂和操作條件的選擇 六、 離子交換設備與過程的放大 第十二章 大格線（大孔）樹脂吸附法 一、 大格線樹脂吸附劑的結構和類型 二、 吸附等溫線 三、 大格線樹脂吸附法提取生化物質工藝條件的選擇 第十三章 色層分離法 一、 基本概念 二、 凝膠層析 三、 離子交換層析 四、 親和層析 第十四章 電泳技術 一、 基本原理 二、 凝膠電泳 三、 SDS-聚丙烯醯胺凝膠電泳

四、 等電聚焦電泳 參考文獻 第二篇 生物分離工程基礎實驗 實驗一 絮凝技術預處理髮酵液及濾餅的質量比阻測定 實驗二 鹼性蛋白酶的鹽析沉澱 實驗三 Folin法測定鹼性蛋白酶活性 實驗四 有機溶劑萃取法中pH對表觀分配係數的影響 實驗五 反膠束萃取法pH對萃取率的影響 實驗六 PEG/(NH4)2SO4兩水相系統的相圖 實驗七 兩水相系統中蛋白質分配係數的測定 實驗八 考馬斯亮藍比色法測定蛋白質含量 實驗九 離子交換樹脂總交換容量的測定 實驗十 大格線吸附樹脂的吸附等溫線的製作 實驗十一 薄層層析法分離鑑定熊去氧膽酸和鵝去氧膽酸 實驗十二 凝膠層析法測定蛋白質相對分子質量 實驗十三 聚丙烯醯胺凝膠等電聚焦電泳測定蛋白質的等電點 第三篇 生物分離工程大型綜合實驗 實驗一 親和沉澱法純化牛血清白蛋白 Ⅰ 親和配基的連線 Ⅱ 親和沉澱法純化牛血清白蛋白的工藝研究 實驗二 用超濾技術濃縮和分離鹼性蛋白酶 實驗三 用兩種分離技術提取紅黴素的工藝比較 Ⅰ 有機溶劑萃取法製備硫氰酸紅黴素的工藝研究 Ⅱ 大格線樹脂吸附法提取紅黴素的工藝研究 Ⅲ 比色法測定紅黴素效價 實驗四 可再生型兩水相體系萃取紅黴素的研究 Ⅰ 無機鹽對再生型兩水相體系萃取紅黴素分配係數的影響 Ⅱ 可再生兩水相體系萃取紅黴素及高聚物的回收 實驗五 用反膠束萃取技術提取胰蛋白酶 Ⅰ 反膠束萃取法提取胰蛋白酶的工藝研究 Ⅱ 胰蛋白酶酶活和比活的測定方法 實驗六 超臨界法萃取青蒿素和高效液相色譜法檢測 Ⅰ 超臨界CO2流體萃取青蒿素 Ⅱ 用高效液相色譜（HPLC）鑑定青蒿素純度 實驗七 用微波萃取和大格線樹脂吸附法提取茶多酚 Ⅰ 微波萃取和常規萃取提取茶多酚的工藝比較 Ⅱ 大格線樹脂吸附法精製茶多酚 Ⅲ 酒石酸亞鐵分光光度法測定茶多酚含量 實驗八 用兩種分離技術提取檸檬酸的工藝比較 Ⅰ 鈣鹽沉澱法提取檸檬酸 Ⅱ 離子交換法提取檸檬酸 實驗九 離子交換法提取抗生素的工藝研究 實驗十 從甜菊葉中提取甜菊糖苷的小試及放大工藝 Ⅰ 從甜菊葉中提取甜菊糖苷的小試工藝 Ⅱ 從甜菊葉中提取甜菊糖苷的中試生產工藝 實驗十一 離子交換法製備純水 實驗十二 凝膠層析法純化胰激肽原酶 Ⅰ Sephadex G-75凝膠層析法純化胰激肽原酶 Ⅱ 紫外分光光度法測定胰激肽原酶活性 實驗十三 重組人酸性成纖維細胞生長因子的分離和純化 Ⅰ 菌體的細胞破碎和前處理 Ⅱ 親和層析法純化目標蛋白 Ⅲ SDS-聚丙烯醯胺凝膠電泳測定相對分子質量及純度 實驗十四 基因工程血管生長抑素包含體的變性和復性工藝研究 Ⅰ 菌體的細胞破碎和洗滌 Ⅱ 目標蛋白的變性溶解和凝膠層析純化的工藝研究 Ⅲ 目標蛋白的復性工藝研究 Ⅳ 四唑鹽（MTT）比色法檢測細胞活性 實驗十五 包含體TRAIL蛋白的復性和純化 Ⅰ 包含體TRAIL蛋白復性的前處理 Ⅱ 包含體復性方法的研究 Ⅲ 用親和層析和離子交換層析法分離純化目標蛋白復性液 實驗十六 金屬螯合親和層析純化重組內醯胺酶 Ⅰ β-內醯胺酶的誘導表達和菌體的收集破碎 Ⅱ 金屬螯合親和層析法純化β內醯胺酶 Ⅲ 聚丙烯醯胺凝膠電泳測定純度 Ⅳ 酶催化反應測定酶活 附錄 一、 實驗室常用酸鹼的密度和濃度 二、一些常見蛋白質相對分子質量參考值 三、 一些常見蛋白質的等電點參考值 四、 部分常見胺基酸的等電點參考值 五、 硫酸銨飽和度計算表 六、 酸度計標準緩衝溶液的配製方法 七、 常用緩衝溶液的配製方法

（註：目錄排版順序為從左列至右列）

教學資源

《生物分離工程實驗（第2版）》有配套的數字課程，該課程包含教學課件等內容。

課程名稱	出版社	出版時間	內容提供者
“生物分離工程實驗”數字課程（基礎版）	高等教育出版社 、高等教育電子音像出版社	2014年2月	劉葉青

教材特色

《生物分離工程實驗（第2版）》部分實驗自科研成果轉化而來，其內容貼近研究和套用；教材包含中試規模的實驗內容和放大計算，可加強學生的工程能力和操作動手能力，並使實驗更貼近於生產實際；每個實驗後的思考題中均有“預習”和“實驗結果和討論”兩部分，便於學生預習和思考。

作者簡介

劉葉青，1942年出生，華東理工大學阿華生物技術研究所副教授。