環狀芽胞桿菌半纖維素酶基因的克隆和結構與功能研究

環狀芽胞桿菌半纖維素酶基因的克隆和結構與功能研究

《環狀芽胞桿菌半纖維素酶基因的克隆和結構與功能研究》是依託四川大學,由曾凡亞擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

  • 中文名:環狀芽胞桿菌半纖維素酶基因的克隆和結構與功能研究
  • 項目類別:面上項目
  • 項目負責人:曾凡亞
  • 依託單位:四川大學
  • 支持經費:10(萬元)
  • 研究期限:1996-01-01 至 1998-12-31
  • 負責人職稱:教授
  • 申請代碼:C0602
  • 批准號:39570409
項目摘要
採用功能互補法,從芽胞桿菌BT-7的基因組文庫中,篩選到多個具水解木聚糖功能的陽性克隆。對這些克隆進行的限制酶作用和Southern雜交顯示,它們分屬三類不同的基因。克隆PBX3酶活性較高,對其進行的基因定位、次克隆和雙向測序與比較分析發現:BX3中的3.9kb片段包括了基因的功能區,且赤在Genbank中找到它的同源性序列,初步判段為一個新發現的內切木聚糖酶基因。同時,所有的三個克隆均能在大腸桿菌中正確表達和將酶蛋白分泌到胞外,胞外和胞周間質的酶活力點總活力的80%左右。利用聚丙烯醯胺凝膠申泳,結合酶活性染色,確定了被克隆到的木聚糖酶基因表達出的酶蛋白在對應的出發菌株中的木聚糖酶組分。另外兩個基因的測序和分析比較工作還在進行之中。

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