內容簡介
本書是作者在總結多年教學與科研工作的基礎上,參考了大量國內外相關資料編寫而成的。全書分為十一章,主要介紹現代食品微生物檢測的相關技術,包括免疫螢光抗體技術、酶聯免疫技術、放射免疫分析技術、單克隆抗體技術、免疫金技術、核酸探針技術、PCR技術、環介導等溫擴增技術、基因晶片技術、食品微生物自動化儀器與生物感測器檢測技術。本書對這些技術的原理及在現實生活中的套用有較為詳細的闡述,內容豐富,語言簡練,由淺入深,循序漸進,讓學生在掌握基礎知識的同時把握現代食品微生物檢測技術的最新動態與發展趨勢。本書可以作為食品科學與工程、食品質量與安全等專業的本科生、研究生的教材或教學參考書,也可供食品及相關行業的研究人員參考。
本書可以作為食品科學與工程、食品質量與安全等專業的本科生、研究生的
教材或教學參考書,也可供食品及相關行業的研究人員參考。
隨著科學技術日新月異的發展和人們生活水平的不斷提高,食品安全、衛生已成為人們關注的焦點。近些年來國際衛生組織及各國食品衛生、安全管理部門一直對食品微生物污染問題給予極大的重視和關注。食品微生物
檢驗是食品質量安全控制方面的重要技術之一,對控制微生物引起的食源性疾病具有重要作用,已成為食品安全中的重要研究領域。
近年來食品微生物檢測技術得到了很大的發展,正從傳統的培養和生理生化的方法向快速的免疫學檢測方法、
分子生物學檢測方法、快速的基於培養及生理生化特徵的檢測方法、自動化儀器檢測方法、生物感測器檢測方法方面發展。食品微生物檢驗技術現已被食品安全、食品科學與工程等相關專業列為主幹課程。編者在總結了自己二十多年的教學經驗和科研成果的基礎上,吸取了近年來國內外同類教材的優點,參考了大量科技文獻資料,編寫了這本《現代食品微生物檢測技術》以饗讀者。本書系統地介紹了近年來食品微生物檢驗技術中的新方法,具有以下幾個突出的特點:一是向讀者系統地介紹了當今食品微生物檢驗的新方法、新技術;二是為了便於讀者理解和實踐套用,本書注重
理論與實踐相結合,幾乎每章都有相應的套用實例。部分內容是編者多年的研究成果,期望對讀者有一定的實踐
指導意義;三是力求通俗易懂,深入淺出。本教材適合於本專科生及從事食品微生物檢驗的技術人員使用,既可以作為理論課的教材,也可以作為
實驗指導書或技術參考書。
本教材由張偉教授、袁耀武副教授、李英軍高級實驗師等人編寫。編寫分工為:緒論由陳珊珊、李英軍編寫,第一章由李艾、袁耀武編寫,第二章由王羽、馬曉燕編寫,第三章由張先舟、李英軍、齊哲編寫,第四章由李慧、亢春雨編寫,第五章由袁耀武、張會彥編寫,第六章由趙麗萍、王林編寫,第七、八章由張亞爽、亢春雨、馬玉清編寫,第九章由周巍、蘇旭東編寫,第十章由楊國興、李寧編寫,第十一章由宋明明、王雪靜編寫,全書由張偉教授、袁耀武副教授、李英軍高級實驗師及馬曉燕老師統一審定、校閱。
本書由集體編寫而成,傾注了每位編者的心血,但由於編寫人員的學識和寫作水平有限,書中難免會出現缺陷和疏漏,衷心希望讀者和同行專家批評指正。
編者
2007年6月於河北保定
目錄
緒論
第一節 病原微生物與食品安全
第二節 現代食品微生物檢測的研究內容
第三節 現代食品微生物檢測技術的發展趨勢及套用
第一章 免疫螢光抗體技術檢測食品微生物
第一節 螢光發射的原理
第二節 螢光抗體的製備
第三節 螢光抗體的標記與純化
第四節 螢光抗體的質量鑑定
第五節 免疫螢光抗體的染色技術
第六節 免疫螢光抗體技術在食品微生物檢測中的套用
參考文獻
第二章酶聯免疫技術檢測食品微生物22
第一節酶聯免疫測定的基本原理與常用的酶及其底物22
一、基本原理22
二、常用的酶及其底物22
第二節酶標記物的製備24
一、戊二醛法24
二、過碘酸鈉法25
三、酶標記物工作濃度的確定26
四、酶標記物的保存26
第三節酶聯免疫吸附測定技術26
一、基本原理26
二、ELISA的種類27
三、固相載體30
四、ELISA的測定方法31
第四節其他類型的ELISA32
一、斑點ELISA32
二、BASELISA33
三、免疫印跡法33
四、發光酶免疫測定33
第五節酶聯免疫測定技術在食品微生物檢測中的套用34
五、套用實例37
參考文獻37
第三章放射免疫分析測定技術檢測食品微生物39
第一節放射免疫分析基本原理39
一、基本原理39
二、常用的放射性同位素47
三、放射免疫技術基本類型48
第二節同位素標記物的製備49
一、直接標記法49
二、間接標記法52
三、同位素標記物的純化53
四、同位素標記物的鑑定58
第三節固相放射免疫測定技術61
一、SPRIA的種類62
二、固相載體62
三、SPRIA的測定方法65
四、放射免疫分析在食品微生物檢測中的套用66
參考文獻66
第四章單克隆抗體技術檢測食品微生物67
第一節單克隆抗體技術的基本原理67
一、抗原的概述67
二、抗體的概述67
三、單克隆抗體技術68
第二節單克隆抗體製備的基本技術70
一、免疫動物72
二、製備融合細胞76
三、細胞融合78
四、抗體檢測80
五、雜交瘤細胞的克隆化81
六、單克隆抗體的製備和凍存82
七、克隆抗體的純化85
第三節單克隆抗體在食品微生物檢測中的套用86
一、檢測致病菌及其毒素86
二、套用實例90
三、注意事項91
參考文獻91
第五章免疫金技術在食品微生物檢測中的套用92
第一節基本原理92
一、血清學誕生與免疫標記技術的出現92
第二節LAMP法引物的設計162
第三節LAMP法的基本原理164
第四節LAMP法的操作流程166
一、LAMP法的反應體系166
二、LAMP反應過程168
三、擴增產物的檢測168
第五節改良的LAMP反應169
參考文獻170
第九章基因晶片技術檢測食品微生物172
第一節基本原理173
第二節引物和探針的設計174
一、PCR引物與探針的設計思路174
二、PCR引物的設計174
三、基因晶片探針的設計174
第三節晶片製備175
一、載體175
二、點樣法176
三、光刻DNA合成法178
第四節基因晶片檢測模板的擴增、標記與雜交檢測179
一、樣品DNA的擴增與螢光標記179
二、探針的標記179
三、基因晶片的雜交檢測180
第五節基因晶片的掃讀181
一、雷射系統掃讀晶片181
二、CCD系統掃讀晶片183
三、基因晶片數據分析183
第六節晶片在食品微生物檢測中的套用184
一、實驗器材及材料187
二、實驗方法187
參考文獻191
第十章食品微生物自動化儀器檢測193
第一節全自動微生物鑑定儀器193
一、ATB Expression細菌鑑定及藥敏智慧型系統193
二、全自動微生物快速鑑定儀器VITEK系統197
第二節全自動微生物總數快速測定儀器198
一、微生物總數快速測定儀199
二、ISO—GRID檢測系統200
第三節全自動大腸桿菌快速測定儀器200
一、腸桿菌快速測定儀200
二、大腸桿菌螢光法現場快速定量檢測系統201
第四節其他快速測定儀器201
一、自動菌落計數系統201
二、套用電阻抗技術的全自動微生物監測系統——BACTOMETER203
三、全自動酶聯螢光免疫分析系統——mini VIDAS206
四、API—細菌鑑定系統207
第五節自動化儀器檢測食品微生物實例210
一、ATB細菌鑑定儀快速檢測食物中毒樣品中的麥氏弧菌210
二、螢光法快速檢測肉製品中的大腸桿菌210
三、利用mini VIDAS快速檢測金黃色葡萄球菌腸毒素210
參考文獻211
第十一章生物感測器212
第一節生物感測器的基本概念212
一、生物感測器的定義及基本組成212
二、生物感測器的分類和命名213
第二節生物感測器的工作原理213
一、分子識別213
二、生化反應中量的變化和信號的轉換214
三、生物放大214
第三節常見的生物感測器原理及其套用215
一、酶生物感測器215
二、組織感測器216
三、微生物感測器216
四、免疫感測器216
五、DNA生物感測器217