溴酚藍，分子式：C19H10Br4O5S，淺黃色到棕黃色粉末；易溶於氫氧化鈉溶液，溶於甲醇、乙醇和苯，微溶於水(約0.4g/100ml)，最大吸收波長422nm。一種pH 指示劑，在pH 3.0~4.6範圍，顏色由黃變藍。常用做電泳指示染料，凝膠中電泳遷移速度在小分子核酸或蛋白質區域。
基本介紹
- 中文名：溴酚藍
- 英文名：Bromophenol blue
- 別稱：四溴苯酚磺酞
- 化學式：C19H10Br4O5S
- 分子量：670.02
- CAS登錄號：115-39-9
- EINECS登錄號：204-086-2
- 危險品運輸編號：UN 2265 3/PG 3
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性狀描述
淺黃色到棕黃色粉末；易溶於氫氧化鈉溶液，溶於甲醇、乙醇和苯，微溶於水(約0.4g/100ml)；最大吸收波長422nm
物理參數
熔點：273℃(dec.)(lit.)
分子結構數據
1、 摩爾折射率：123.26
2、 摩爾體積（cm3/mol）：304.5
3、 等張比容（90.2K）：893.7
4、 表面張力（dyne/cm）：74.1
5、 極化率（10-24cm3）：48.86
計算化學數據
1.疏水參數計算參考值（XlogP）:無
2.氫鍵供體數量:2
3.氫鍵受體數量:5
4.可旋轉化學鍵數量:2
5.互變異構體數量:3
6.拓撲分子極性表面積92.2
7.重原子數量:29
8.表面電荷:0
9.複雜度:662
10.同位素原子數量:0
11.確定原子立構中心數量:0
12.不確定原子立構中心數量:0
13.確定化學鍵立構中心數量:0
14.不確定化學鍵立構中心數量:0
15.共價鍵單元數量:1
貯存方法
1.儲存於陰涼、通風的庫房。遠離火種、熱源。
2.應與氧化劑等分開存放，切忌混儲。
3.配備相應品種和數量的消防器材。
4.儲區應備有泄漏應急處理設備和合適的收容材料。
合成方法
1.將苯酚紅溶於冰乙酸，攪拌下加入溴溶於冰乙酸的溶液，攪拌幾分鐘後傾入60℃熱水中，冷卻至室溫，放置過夜。過濾，依次用冰乙酸、苯洗滌濾餅，晾乾，得溴酚藍。
2.將酚紅溶於冰乙酸中，加熱至沸，滴加溴溶於冰乙酸中的溶液，黃色固體析出時，過濾，用乙酸洗去游離溴，置於空氣中乾燥後即得粗品。用冰乙酸或丙酮與冰乙酸混合溶劑重結晶，得純品溴酚藍。
3.將酚紅和溴分別溶於醋酸中，製成溶液。先將酚紅醋酸溶液加熱至沸，然後在攪拌下緩慢加入溴的醋酸溶液：當酚紅反應完全且黃色晶體不再析出後，冷卻，過濾。用少量醋酸洗去結晶中的游離溴後，用醋酸或丙酮 醋酸進行重結晶，在空氣中乾燥得純品溴酚藍。
用途說明
配置溴酚藍指示液。用途：變色範圍：pH2.8-4.6（黃-藍），酸鹼指示劑；非水滴定用指示劑，蛋白電泳染色；病毒化驗等。
配置方法
方法1：1%的溴酚藍
將托盤天平上稱取1g溴酚藍定溶於100ml無水乙醇中，轉移入滴瓶中，貼標籤備用。
方法2：0.05%的溴酚藍
配western blot用的2*SDS上樣緩衝液需要用到0.1%的溴酚藍，2-DE中溴酚藍一般也是配成0.1%母液。實際上，溴酚藍在水中的溶解度不高，直接將0.1g溴酚藍溶於100ml水是有困難的。下面是其較合適的配製方法：
0.05%的溴酚藍配製方法：取溴酚藍0.1g，加0.05mol/L氫氧化鈉溶液3.0ml使溶解，再加水稀釋至200ml，即得。 變色範圍pH2.8～4.6（黃→藍綠）。只是不知道加入NaOH會不會影響2-DE實驗。估計影響不大，因為指示劑用量畢竟很少。
方法3：1%溴酚藍
加1g水溶性鈉型溴酚藍於100ml水中，攪拌或渦旋混合直到完全溶解。溴酚藍其鈉鹽易溶解在水裡。
