《泛素交聯酶RAD6在DNA損傷修復和腫瘤發生中作用的研究》是依託蘭州大學，由王德貴擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：泛素交聯酶RAD6在DNA損傷修復和腫瘤發生中作用的研究
- 依託單位：蘭州大學
- 項目負責人：王德貴
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
參與DNA損傷修復的蛋白會被招募到損傷位點聚集被稱為foci。泛素交聯酶(E2)形成的foci是短暫和微弱的，常規方法觀察不到。本人在實驗中摸索出了一種新方法可以觀察到E2的foci，通過這一方法我們觀察到了RAD6的foci，首次發現了RAD6和RNF168作為相互作用的泛素交聯酶和泛素連線酶共同定位於DNA損傷位點。更有趣的是我們發現了射線照射後RAD6基因缺失細胞內BRCA1和53BP1的foci減少，說明RAD6參與了DNA損傷反應BRCA1這條通路並可能和腫瘤發生有關。本項目擬進一步探討RAD6在這一通路中的位置和作用;明確RAD6與RNF168的作用底物和該底物的泛素化位點；明確RAD6在DNA損傷後細胞周期調控中的作用。通過對RAD6基因敲除小鼠的觀察明確RAD6在腫瘤發生過程中的作用。
結題摘要
我們通過共轉染泛素交聯酶E2和泛素連線酶E3的新方法觀察到了泛素交聯酶RAD6在DNA損傷位點的聚集(foci)，首次發現了RAD6和RNF168作為相互作用的泛素交聯酶和泛素連線酶共同定位於DNA損傷位點。我們發現了射線照射後RAD6基因缺失細胞內BRCA1和53BP1的foci減少，說明RAD6參與了DNA損傷反應BRCA1這條通路並可能和腫瘤發生有關。本項目我課題組研究了RAD6在DNA損傷修復通路中的位置和作用;發現了RAD6在DNA損傷修復通路中通過泛素化組蛋白H1.2傳導DNA損傷修覆信息，參與修復反應。並且發現RAD6在DNA損傷後細胞周期調控中發揮作用。通過對RAD6基因敲除小鼠的觀察了RAD6在腫瘤發生過程中的作用，只發現KO小鼠偶發腫瘤，從目前得到的數據分析腫瘤發生沒有統計學意義，尚不能說明RAD6基因敲除小鼠自發腫瘤發生率高於對照。通過MNU誘導膀胱癌發現KO小鼠MNU誘導腫瘤發生率高於對照。
