植入前胚胎遺傳學高通量測序檢測技術規範

《植入前胚胎遺傳學高通量測序檢測技術規範》是2018年12月08日實施的一項行業標準。

基本介紹

• 中文名：植入前胚胎遺傳學高通量測序檢測技術規範
• 外文名：The Standard of High-throughout Sequencing in Preimplantation Genetic Screening techniques
• 標準編號：T/SZGIA 3—2018
• 發布日期：2018年12月07日
• 實施日期：2018年12月08日

起草人

許振朋、唐衛江、田志堅、程征宇、程奇、李陶莎、李倩一、杜佳婷、吳昊、張昌軍、鄭潔、黃榮。

起草單位

武漢華大醫學檢驗所有限公司，深圳基因產學研資聯盟，十堰市人民醫院，湖北省婦幼保健院，湖北省標準化與質量研究院。

適用範圍

本標準規定了植入前胚胎遺傳學高通量測序檢測技術中檢測前、中、後各環節的技術要求。 本標準適用於人體胚胎植入前的樣品進行高通量基因測序檢測技術的機構，通過來源於人體樣本來初步評估植入前胚胎遺傳學篩查的結果。

技術內容

全基因組擴增DNA產物的質控檢測主要包括兩個方面：濃度檢測及電泳檢測。DNA產物經Qubit檢測需濃度不低於30ng/μL，總量在1μg以上，才可繼續進行測序分析；DNA產物的電泳條帶範圍需在250bp以上且上限不大於2000bp，主條帶在750bp。樣品在質控檢測合格後進入文庫構建。

建庫起始量為300ng。目前使用 NEB 雙鏈DNA片段化酶打斷成主帶為150-200bp小片段DNA。隨後進行純化，純化後的DNA進行末端修復、接頭連線、PCR擴增及純化後文庫構建完成。文庫經BMG定量檢測合格後進行上機測序。