李剛(中山大學生命科學學院副教授)

李剛(中山大學生命科學學院副教授)

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李剛,男,博士,中山大學生命科學學院副教授、博士生導師。

基本介紹

  • 中文名:李剛
  • 畢業院校:中山大學
  • 學位/學歷:博士
  • 專業方向:遺傳學
  • 任職院校:中山大學
研究方向,個人經歷,教育經歷,工作經歷,講授課程,學術成就,承擔課題,論文專著,

研究方向

  1. 分子酶學與酶工程:利用宏基因組、宏轉錄組等手段從極端環境、腸道微生物中挖掘與木質纖維素降解相關的酶,並探索其獨特酶學特性的分子機制,然後對其進行分子改造,並開展木質纖維素降解的套用研究;
  2. 藥用真菌的生物育種及發酵工程研究:利用紫外誘變、等離子誘變、太空誘變等手段對靈芝等藥用真菌進行菌種誘變和選育,建立並最佳化其大規模工業化生產和後處理的工藝條件,並開展其中試和產業化研究;

個人經歷

教育經歷

1.1990/9-1994/6,山東大學, 微生物學專業,學士。
2.1994/9-1997/6,中山大學, 遺傳學專業,碩士,導師:李寶健教授。
3.1997/9-2001/6,中山大學, 遺傳學專業,博士,導師:李寶健教授。

工作經歷

1.2001/7-2007/11中山大學生命科學學院,講師。
2.2007/12-至今,中山大學生命科學學院,副教授,博導;

講授課程

本科生課程:
“遺傳學”;
“生物工業下游加工技術”。
研究生課程:
“分子生物學與生物化學實驗操作設計與技能”;
“微生物基因工程與代謝工程”。

學術成就

在分子酶學與酶工程研究方面,本實驗室先後建立了從土壤、海水、海底沉積物、污水、污泥、動物糞便、白蟻腸道等多種環境樣品中提取高質量宏基因組DNA的技術,並掌握了構建庫容量大、多樣性好的宏基因組文庫的方法以及基於功能和序列兩種篩選策略的篩庫方法。利用上述技術平台,近10年來,我們總共篩選到10多個酶學特性優異、具有工業化套用潛力的酯酶、漆酶、蛋白酶和纖維素酶基因(Enzyme Microb Technol, 2017,106:97-105;Enzyme Microb Technol, 2016,84:24-31;J Agr Food Chem, 2015,63:894-901;BMC Microbiology, 2013, 13:237;Bioresource Technol, 2012,123:15-22;Appl Microbiol Biot, 2010, 87:1023-1031;Microb Cell Fact, 2008,7:38.)。其中一個來自粗糙脈孢霉的迷你纖維素酶TOX-1可耐受極端pH和高溫,經過後續的定向進化改造後,可能在飼料、生物能源等方面具有重要的套用前景,該研究成果發表在一區雜誌上(J Agric Food Chem,2016,64:4751-4757)。為了進一步改良所獲得酶的酶學特性,我們建立了一個基於OE-PCR技術和DNAWorks軟體的基因合成和定點突變平台(Mol Biotechnol,2007,37:195-200),並對一個雲芝漆酶和一個來自紅樹林的細菌漆酶進行了定向進化研究,使得它們的最適溫度和熱穩定性有明顯提高,對工業染料的降解能力也得到顯著提高(Appl Microbiol Biotechnol,2011,91:667-675)。
在藥用真菌的生物育種及發酵工程研究方面,本實驗室在國際上首次建立了靈芝的高效轉化系統(FEMS Microbiol Lett, 2006,256:203-208),並先後將白細胞介素2、p53腫瘤抑制基因等具有重大藥用價值的外源基因轉化靈芝,成功地獲得了轉基因靈芝新菌種。該項研究為世界上首例將有重要醫藥價值的外源基因轉入大型藥用真菌靈芝的研究。另外,我們還利用原生質體紫外誘變技術選育出了以“靈健二號”為代表的幾個優良的靈芝生產菌種(微生物學報,2001,41:89-93),並對靈芝的大規模工業化發酵生產進行了深入的研究,先後完成了靈芝的10噸罐和18噸罐規模的發酵試驗,並申請了國家專利。其中“靈芝十八噸罐發酵工藝”獲得“第七屆中國發明博覽會”金獎。該技術已投入生產套用,並有產品上市。

承擔課題

1、國家自然科學基金面上項目:"新疆火焰山熱穩定、高活性細菌纖維素酶的基因克隆、定向進化及其熱穩定機制解析" (項目編號31270156),2013.1- 2016.12,主持人。2、國家自然科學基金面上項目:"紅樹林環境宏基因組文庫中新型漆酶基因克隆及功能研究"(項目編號30970107),2010.1- 2012.12,主持人。
3、國家自然科學基金面上項目:"南亞熱帶森林片段化過程中厚殼桂種群保護遺傳學研究"(項目編號30300055),2004.1- 2006.12,合作單位負責人。
4、國家自然科學基金項目面上:"粗糙脈孢霉生物鐘基因prd-4的分子克隆"(項目編號30070420),2001.1-2003.12,項目組主 要成員(排名第二)。
5、廣東省產學研合作項目“海洋低溫新型酶製劑在洗滌劑中的研究與套用”(項目編號2016B090918019),2016.1-2018.12, 合作單位負責人。6、廣東省科技計畫項目:“近海紅樹林生境中宏基因組來源漆酶的定向進化及其產業化生產工藝研究” (項目編號2012B010300021),立項年度2013.1- 2015.1,合作單位負責人。7、廣東省自然科學基金面上項目:“造紙廢水沉積物中鹼性纖維素酶基因克隆及耐鹼機制解析”(項目編號S2012010010464), 2013.1-2014.12,主持人。
8、廣東省自然科學基金博士啟動項目:“靈芝漆酶基因的克隆及在畢赤酵母系統中的高效表達”(項目編號04300532), 2005.1-2007.1,主持人。
9、廣州市重大科技攻關項目:"利用基因工程開發靈芝研究(二)",(項目編號2001-Z-006-01),2001.7-2003.7,副主持人。
10、廣州市重大科技攻關項目:"利用基因工程開發靈芝研究(一)",(項目編號99-Z-021-01),1999.10-2001.5,副主持 人。
11、中山大學青年教師培育項目:“台灣乳白蟻腸道宏基因組中新型beta-葡萄糖苷酶基因的克隆及功能研究”(項目編號 11lgpy23),2011.1-2013.12,主持人。

論文專著

論文(2004-2018,*通訊作者):
1. Jia ML, Zhong XL, Lin ZW, Dong BX,Li G*. Expression and characterization of a new family of esterase isolated from a metagenomic library of paper mill sludge.Int J Biol Macromol(IF2017=3.909), 2018, accepted.
2. Gong BL, Mao RQ, Xiao Y, Jia ML, Zhong XL, Liu Y, Xu PL,Li G*. Improvement of enzyme activity and soluble expression of an alkaline protease isolated from oil-polluted mud flat metagenome by random mutagenesis.Enzyme Microb Technol, 2017,106:97-105.
3. Gao G, Mao RQ, Xiao Y, Zhou J, Liu YH,Li G*. Efficient yeast cell-surface display of an endoglucanase ofAspergillus flavuseand functionalcharacterization of the whole-cell enzyme.World J Microbiol Biotechnol, 2017,33:114.
4. Xiao Y, Zhang QS, Luo YQ, Zhang Y, Luo X, Wang YC, Cao WG, de Pinto V, Liu QY,Li G*.Neurospora crassa tox-1gene encodes a pH- and temperature-tolerant mini-cellulase.J Agr Food Chem(一區雜誌,IF2017=3.412), 2016, 64: 4751-4757.
5. Gao G, Wang An, Gong BL, Li QQ, Liu YH, He ZM,Li G*. A novel metagenome-derived gene cluster from termite hindgut: Encodingphosphotransferase system components and high glucose tolerant glucosidase.Enzyme Microb Technol, 2016,84:24-31.
6. Li L,Li G(並列第一),Cao LC, Ren GH, Kong W, Wang SD, Guo GS, Liu YH*. Characterization of the cross-linked enzyme aggregates of a novel β-galactosidase, a potential catalyst for the synthesis of galacto-oligosaccharides.J Agr Food Chem(一區雜誌,IF2017=3.412), 2015, 63: 894-901.
7. Zhang X, Li H, Li CJ, Ma T,Li G*, Liu YH. Metagenomic approach for the isolation of a thermostableb-galactosidase with high tolerance of galactose and glucose from oil samples of Turpan Basin.BMC Microbiol,2013,13:237.
8. Li G, Dong BX, Liu YH, Li CJ, Zhang LP. Gene synthesis method based on overlap extension PCR and DNAWorks program.Method Mol Biol, 2013, 1073:9-17.
9. Li CJ, Zhang X, Zhang LP, Wang A, Mao RQ,Li G*. Medium optimization for the production of a metagenome-derivedb-galactosidase by Pichia pastoris using response surface methodology.Afr J Microbiol Res,2013,7:1077-1085.
10.Li G,Jiang Y, Fan XJ, Liu YH.Molecular cloning and characterization of a novel β-glucosidase with high hydrolyzing ability for soybeanisoflavone glycosides and glucose-tolerance from soil metagenomic library.Bioresource Technol一區雜誌,IF2017=5.807), 2012, 123:15-22.
11. Sang SL,Li G,Hu XP, Liu YH.Molecular cloning, overexpression and characterization of a novel feruloyl esterase from a soil metagenomic library.J Mol Biol Biotechnol, 2011, 20:196-203.
12. Liu YH, Ye M, Lu Y, Zhang X,Li G*.Improving the decolorization for textile dyes of a metagenome-derived alkaline laccase by directed evolution,Appl Microbiol Biotechnol, 2011,91:667-675.
13.Wang K,Li G(並列第一),Yu SQ, Zhang CT, Liu YH. A novel metagenome-derived β-galactosidase: gene cloning, overexpression, purification and characterization,Appl Microbiol Biotechnol, 2010,88:155-165.
14.Ye M,Li G(並列第一),Liang WQ, Liu YH. Molecular cloning and characterization of a novel multicopper oxidase with laccase activity originating from mangrove soil via metagenomic approach.Appl Microbiol Biotechnol,2010,87:1023-1031.
15.Li G,Wang K,Liu YH. Molecular cloning and characterization of a novel pyrethroid-hydrolyzing esterase originating from the Metagenome.Microb Cell Fact(IF=3.831,二區雜誌), 2008,7:38.
16. Dong BX, Mao RQ, Li BJ, Liu QY, Xu PL,Li G*.An improved method of gene synthesis based on DNAWorks software and overlap extension PCR.Mol Biotechnol, 2007,37:195-200.
17. Dong BX, Ouyang L, Qin L,Li G*.A rapid and simple method for screening large numbers of recombinant DNA clones.J Rapid Meth AutMicrobiol,2007, 15:244-252.
18. Wang ZF,Li G*,Fu SL, Ren H. Isolation and characterization of microsatellite loci inCryptocarya chinensisin lower subtropical China, Conservation Genetics, 2007, 8:1235-1237.
19.Li G, Li RX, Liu QY, Wang Q, Chen M, Li BJ. A Highly efficient Polyethylene Glycol-mediated transformation method for mushrooms,FEMS Microbiol Lett, 2006,256:203-208.
20.Ouyang XZ, Ma XQ, Wang SL,Li G,He JG, Liu QY. A novel assay to quantitate in vivo perfect recircularizaiton rate of restriction enzyme – generated ends,J Rapid Meth Aut Microbiol,2006,14:283-290.
21. He R, Luo X, Wang Q, Zhang Y, Liu QY,Li G,Cui L, Wang ZX, Cao Y, Li ZJ, Cheng D, Zhang WQ, Li BJ, Pang Y. Rapid and efficient generation of PCR templates fromEscherichia coli,Saccharomyces cerevisiaeandOryza- sativabyusing microwave and boiling,J Rapid Meth Aut Microbiol,2005,13:19-28.
22.Wang Q, Liu QY,Li G,Li BJ. A novel method of DNA shuffling without PCR process.Chinese Sci Bull,2004,49:689-691.
專著:
1.《分子生物學實驗方法與技巧》,2010年6月。申煌煊主編,李剛副主編。廣州:中山大學出版社。
2.《現代遺傳學學習引導》,2012年4月。賀竹梅,李剛,梁前進,程焉平編。北京:高等教育出版社。

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