放射免疫測定技術

放射免疫測定技術(Radiomunoasay,RIA)用放射性核素標記來檢測抗原抗體反應的高靈敏度的技術。可用標記抗原或標記抗體檢測相應的抗體或抗原。待測抗原和標記抗原對有限量抗體存在競爭性結合,Ag*+ Ab4>Ag*-Ab; Ag + Ab一Ag-Ab; 抗原用核素(如I、H 等) 標記後仍能與相應抗體特異性結合; 將兩類抗原與抗體混合後,兩類抗原均能與抗體結合,當Ag* 和Ab 的數量恆定,且Ag* 與Ag 之和大於Ab 上結合點數目時,Ag* 與Ag 存在競爭抑制: Ag 數量增加,Ag-Ab生成量增加; Ag*-Ab 數量就減少,游離的Ag* 就增多。用層析等方法將Ag*-Ab 和Ag-Ab複合物(B) 與游離Ag*和Ag (F) 分離,測定B和F的放射活性。

繪製B/F和Ag量的關係曲線圖。預先用一系列已知濃度的未標記抗原和一定量的標記抗原及抗體混合,以相同方法繪製B/F 和Ag 量的關係的標準競爭抑制曲線圖。根據待測Ag 的放射性結合率,依標準曲線即能查出Ag 量。由於放射線對人體有一定的危害,目前逐漸用下列方法來取代放射標記。

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