《對蝦白斑綜合症病毒（WSSV）入胞機制研究》是依託廈門大學，由劉海鵬擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：對蝦白斑綜合症病毒(WSSV)入胞機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：劉海鵬
- 依託單位：廈門大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
白斑綜合症病毒（WSSV）是目前侵害對蝦等甲殼動物的首要病毒性病原，由於缺少可穩定培養的對蝦細胞系，我們對WSSV侵入宿主細胞的過程仍不清楚，嚴重限制了針對病毒入侵過程來設計新型抗病毒藥物。WSSV對螯蝦造血組織（Hpt）幹細胞具有高度感染嗜性，本項目擬在已成功分離可穩定培養的螯蝦Hpt幹細胞、利用差異基因篩選技術獲得366個WSSV感染後表達顯著上調的細胞基因等研究基礎上，以螯蝦Hpt幹細胞作為WSSV體外感染的有效宿主，通過蛋白晶體結構/同源建模分析、宿主基因功能阻斷、過表達顯性負突變體構建、細胞脂筏結構鑑定和電鏡等技術，重點考察差異表達因子中的層粘連蛋白受體和格線蛋白依賴型內吞是否參與WSSV入胞過程，並與其他細胞膜活動（如巨胞飲、膜穴樣凹陷依賴型內吞等）可能介導的WSSV入胞途徑進行比較，從細胞不同膜活動過程來解析WSSV入胞的分子機制，為WSSV防治提供理論依據和有效靶位。
結題摘要
白斑綜合症病毒（White spot syndrome virus，WSSV）是對蝦等多種甲殼動物包括螯蝦的主要病原。由於對蝦等甲殼動物細胞系研究相對滯後，目前人們對WSSV感染致病機制尤其是其入胞機制認識尚淺。螯蝦造血組織（hematopoietic tissue，Hpt）幹細胞是研究WSSV感染的有力模型，我們利用該原代培養細胞模型研究發現WSSV可利用包括格線蛋白介導的內吞、巨胞飲和膜穴養凹陷介導的內吞等多種內吞途逕入侵宿主細胞；此外，自噬可能也參與WSSV入胞過程。通過對一關鍵自噬相關蛋白Cq-GABARAP的功能研究，我們發現重組表達Cq-GABARAP（rCq-GABARAP）能夠結合病毒囊膜蛋白VP28，促進WSSV進入宿主細胞，具體機制可能涉及自噬及其對格線蛋白介導的內吞的上游Rac1信號通路的調控。與內吞途逕入胞不同的是，rCq-GABARAP並未增加病毒複製增殖，相反，感染後6 h的檢測結果顯示rCq-GABARAP明顯抑制病毒基因轉錄複製，該現象可能與rCq-GABARAP引起入胞病毒匯集成團有關。綜上，本研究為揭示WSSV感染入胞及其調控機制奠定基礎，為抗WSSV藥物研發提供重要理論依據。
