定性聚丙烯醯胺凝膠電泳是在不加入SDS 和疏基乙醇等變性劑的條件下,對保持活性的蛋白質進行聚丙烯醯胺凝膠電泳,常用於酶的鑑定、同工酶分析和提純。未加SDS的天然聚丙烯醯胺凝膠電泳可以使生物大分子在電泳過程中保持其天然的形狀和電荷,它們的分離是依據其電泳遷移率的不同和凝膠的分子篩作用。
可以得到較高的解析度,尤其是在電泳分離後仍能保持蛋白質和酶等生物大分子的生物活性,對於生物大分子的鑑定有重要意義,其方法是在凝膠上進行兩份相同樣品的電泳,電泳後將凝膠切成兩半,一半用於活性染色,對某個特定的生物大分子進行鑑定,另一半用於所有樣品的染色,以分析樣品中各種生物大分子的種類和含量。