定向克隆法

定向克隆法是指對外源DNA及載體均用兩種不同的限制酶消化,再將二者用DNA連線酶連線起來的方法,該法可以使外源DNA以固定的方向插入到載體中,亦可避免載體的自身環化。一般以單鏈噬菌體作為載體。單鏈噬菌體是含單鏈核酸的噬菌體。其中包括以f2為代表的RNA噬菌體,以φX174為代表的球狀DNA噬菌體,以fd為代表的纖維狀DNA噬菌體。

對於一個細胞來說,內源DNA是其基因組的序列(本身生物就有的DNA),而外源的DNA是通過基因工程導入的其他物種或細胞的DNA,也可以是人工合成的一段DNA。基因有兩個特點,一是能忠實地複製自己,以保持生物的基本特徵;二是基因能夠"突變",突變絕大多數會導致疾病,另外的一小部分是非致病突變。

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