《大豆對SMV抗性調控基因在不同階段的鑑定及功能分析》是智海劍為項目負責人，南京農業大學為依託單位的面上項目。
基本介紹
- 中文名：大豆對SMV抗性調控基因在不同階段的鑑定及功能分析
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：智海劍
- 依託單位：南京農業大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
大豆花葉病毒(SMV)病是我國大豆產區最重要的病害之一，嚴重影響大豆產量與品質。對大豆抗性基因及其功能研究將為闡明抗性機制奠定基礎。本項目在精細定位基礎上，利用與抗病基因緊密連鎖的標記，構建高世代剩餘雜合系（RHLs）。從剩餘雜合系中篩選對SMV表現抗和感的近等基因系(NILs)。對近等基因系進行重測序，分析抗感近等基因系間存在序列差異的基因，篩選與抗性可能相關的基因進行功能驗證；分析受SMV侵染後近等基因系在RNA水平和蛋白水平上存在顯著差異的基因，篩選出可能與抗病調控有關的基因和參與的Pathway。通過沉默近等基因家系在精細定位區段內的候選基因，利用Real-Time PCR觀察RNA和蛋白水平鑑定出的可能跟抗病相關的基因的表達，明確基因之間的關係。通過沉默Pathway中已知的關鍵基因後症狀的變化，確定與抗病反應有關的Pathway，並明確候選基因在該Pathway中的作用。
結題摘要
大豆花葉病毒(SMV)病是我國大豆產區最重要的病害之一，嚴重影響大豆產量與品質。對大豆抗性基因及其功能研究將為闡明抗性機制奠定基礎。本項目在把抗性基因定位在4條染色體基礎上，利用與抗病基因緊密連鎖的標記，構建高世代剩餘雜合系（RHLs），精細定位和克隆抗性候選基因，另外利用構建的近等基因系進行轉錄組重測序，蛋白質組差異蛋白比較，篩選出多個抗性相關基因，對不同途徑獲得抗性候選基因如Gm26420、Gm26460、Gm40990、Gm39300以及NAC、NIK基因通過SMV誘導的表達差異Real-Time PCR、基因沉默（VIGS）、遺傳轉化以及基因敲除等技術進行了候選基因功能驗證；通過候選基因與其它基因的互作分析，初步確定了候選基因可能參與的Pathway以及該候選基因在該Pathway中的作用。相關研究共發表標註論文25篇，其中SCI 論文12篇，申報專利1項，獲省部級及社會獎3項，超額完成項目考核指標。
