多肽合成方法是把不同的或相同的多個胺基酸按指定順序連結起來構成肽鏈(含多個肽鍵-CONH-)化合物的合成方法。由德國化學家費舍爾(E.Fischer)所首創。進行多肽合成，必須首先解決兩個問題：①要將胺基酸兩個官能團中的一個(通常選氨基)封閉，即用保護基團保護起來，只讓沒被保護的那個基團(羧基)去同另一個胺基酸分子反應。採用的保護基團不僅要易於同被保護基團發生反應，還須在肽鍵形成後易去除。②要活化沒被封閉的官能團，使之能在較溫和的條件下發生反應。可作為氨基保護試劑的有氯甲酸苄酯和叔丁氧甲醯氯等，用來活化羧基的方法則是將羧基變成醯氯、酯、混合酸酐等衍生物或加縮合劑(失水劑)二環已基碳醯二亞胺，使氨基和羧基結合起來。
1962年梅瑞費爾德(R.Merrifield)引入了一個新的多肽合成方法——固相多肽合成法。其原理是讓第一個胺基酸附在一種不溶性高聚物分子上，然後再逐一同別的胺基酸連結，增長的肽鏈連結在不溶性高聚物上，這樣可大大地減少每次分離操作的損失，簡化提純手續，省去純化個別中間體的麻煩。並能使加料處理機械化和自動化，縮短了多肽合成周期。當完成多肽連線後，用還原性斷裂法把多肽同高聚物分離，再用色層法提純。固相法的建立和套用大大地促進了多肽合成研究。
