本法系用液相色譜法測定合成多肽中醋酸或醋酸鹽的含量。除另有規定外，按下列方法測定。
基本介紹
- 中文名：合成多肽中的醋酸測定法
- 學科：化學
- 用途：測量醋酸含量
- 性質：方法
合成多肽中的醋酸測定法
對照品溶液的製備 取冰醋酸適量，精密稱定，用流動相A-流動相B（95：5）的混合溶液定量稀釋製成每1ml中約含0.1mg的溶液（對照品溶液的濃度可隨供試品中醋酸的含量作適當調整）。
供試品溶液的製備 按各論項下的方法製備（取樣量應根據其醋酸含量而定）。
色譜條件及系統適用性試驗 用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填料的色譜柱（250mm×4.6mm，5μm），以磷酸溶液（在1000ml水中加磷酸0.7ml,用氫氧化鈉試液調節pH至3.0）為流動相A，甲醇為流動相B，進行梯度洗脫，流速為每分鐘1.2ml；檢測波長為210nm；理論板數按醋酸峰計算應不低於2000。醋酸峰的保留時間約在3~4分鐘。
測定法 精密量取對照品溶液和供試品溶液各10μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標法以峰面積計算多肽中醋酸的含量。
時間（分） | 流動相A(%) | 流動相B(%) |
0~5 | 95 | 5 |
5~10 | 50 | 50 |
10～20 | 50 | 50 |
20～22 | 95 | 5 |
22～30 | 95 | 5 |
