多孢分離

簡介

即把多個孢子接種在同一培養基上，讓它們萌發共同生長交錯在一起，從而獲得純種的一種方法，由於多個孢子間的種性互補，基本上可以保持親本的穩定性，此法比較簡易。

斜面劃線法

按無菌操作規程，用無菌接種環從收到孢子的濾紙條上沾取少量孢子，在PDA試管斜面培養基上自下而上劃線，劃線時勿用力，以免劃破培養基表面，接種完畢，抽出接種種灼燒試管口，塞上棉塞，放置24°C恆溫培養箱中培養，待孢子萌發後（一般約15-20天），挑選萌發快，長勢旺的菌落，轉接於新試管培養基上再行培養。

塗布分離法

按無菌操作方法，取一小塊具有孢子的濾紙條，放入裝有無菌水的小三角瓶中，充分搖勻製成孢子懸浮液，然後用已滅菌的試管，吸取孢子懸浮液，滴1-2滴到PDA試管或培養皿培養基上，轉動試管使孢子懸浮液均勻分布於斜面上，或用玻璃塗布棒將平板上的懸浮液塗布均勻。孢子在培養基上經24°C恆溫培養萌發後，挑選幾株發育勻稱，生長速度快的菌落，移接於另一試管斜面培養基上，恆溫培養即為母種。