《基於GFP 的細胞蛋白質相互作用的檢測及定位新方法研究》是依託廈門大學，由張軍擔任項目負責人的青年科學基金項目。
《基於GFP 的細胞蛋白質相互作用的檢測及定位新方法研究》是依託廈門大學，由張軍擔任項目負責人的青年科學基金項目。項目摘要本項目根據水母綠色螢光蛋白(GFP)光譜變異型間的螢光共振能量傳遞現象,設計出細胞內、外蛋白質間作...
GFP作為一種報告分子，在檢測蛋白表達、蛋白和細胞螢光示蹤、研究蛋白質之間相互作用和構象變化中，起到了重要的作用。構造組成 由水母Aequoreavictoria中發現的野生型綠螢光蛋白，395nm和475nm分別是最大和次大的激發波長，它的發射波長的峰點是在509nm，在可見光綠光的範圍下是較弱的位置。由海腎（seapansy）所得...
10.3利用酵母雙雜交分析與蛋白質組學方法研究蛋白質間相互作用611 10.4用親和捕獲技術分析蛋白質相互作用612 10.5了解多蛋白質複合體的結構618 10.6FRET分析體內蛋白質相互作用623 10.7通過測定結合常數來分析蛋白質間相互作用626 10.8蛋白質微陣列促進大規模的蛋白質研究627 實驗方案 方案1用FLAG抗原表位標記蛋白...
特殊光學顯微鏡、雷射掃描共聚焦和雙光子雷射掃描螢光顯微鏡以及透射和掃描電子顯微鏡的原理及使用方法；第二、三篇從基礎性、綜合性與設計性實驗層面安排了40個實驗，涵蓋了細胞形態結構和生理活動、細胞分裂與染色體分析、細胞培養與細胞工程、細胞周期與細胞凋亡、細胞的遺傳轉化、基因編輯及蛋白質互作等實驗內容；附錄...
針對經典親和色譜中前沿分析和競爭置換分析方法的不足，推導獲得了測定藥物-蛋白質和蛋白質-蛋白質相互作用的理論公式。該理論以進樣量和溶質的容量因子為變數，克服了前沿分析和競爭置換分析法配體用量大和分析時間長等不足。分別採用競爭置換法和項目所得理論公式對GFP抗體與固定化GFP，三種Beta2-AR抗體與固定化Beta2...
我們根據M-CSF受體介導信號轉導的調控機制，設計建立重組藥物篩選細胞系（STAT1/ GFP-HL-60），並以此細胞係為模型篩選得到一些對M-CSF受體與STAT1高表達腫瘤細胞具有很強抑制效應的中草藥有效成分和小分子多肽，正在申請專利。此外我們還研究了Diallyl disulfide（DADS）對腫瘤細胞增殖周期的影響，率先證明了DADS可 通過...
因此研究谷蛋白內的蛋白轉運信號和胞內轉運途徑的分子基礎，在基礎理論和套用都具有重要意義。本研究將通過系列缺失與GFP融合和BiFC等技術，試圖明確谷蛋白在胞內轉運的保守轉運信號；通過長片段噬菌體展示結合BiFC技術，鑑定與谷蛋白在胞內轉運過程相互作用的蛋白質，試圖在分子水平上探討其分子基礎。
在此基礎上構建基因修飾動物模型，利用小動物腦成像、光遺傳、電生理等技術了解工作記憶損害的腦網路特徵及相關神經環路改變與行為異常的關係；繼而採用多種基因功能研究方法，探討易感基因的亞細胞定位、時空表達、基因轉錄調控、蛋白質相互作用和細胞信號轉導通路等。本研究預期結果將有助於闡釋分裂症工作記憶損害相關神...
用於培養狀態下細胞動態的研究。儀器可以自動聚焦、單細胞追蹤、多位點成像。成像速度高、圖像清晰度高 活細胞工作站可實現在細胞水平上的定性和定量分析、活細胞圖像處理、活細胞動態示蹤。在分子水平，可做到基因定位定量表達的動態分析、蛋白質合成降解運輸和相互作用的動態研究、細胞骨架的代謝動力學測定和細胞周期各時相...
套用蛋白質工程技術原理將肝癌細胞膜上GPI錨定蛋白GPC3 cDNA序列N末端與AFP抗原決定簇hAFP542-550DNA片段連線，分別構建含AFP啟動子的兩個重組質粒pcGPC3-GFP-hAFP542-550 和pcGPC3 -hAFP542-550-GFP。脂質體轉染質粒至肝癌細胞株HepG2和Hep3B，表達融合蛋白GPC3-hAFP542-550，使hAFP542-550靶向錨定表達在分泌AFP...
採用實驗室的靶點確認技術——固定mRNA分子後和寡核苷酸文庫液相雜交淘洗並篩選結合序列、從而篩選靶點並體外進行mRNA分子切割確認，因合成核酸分子難跨膜進入細胞，故分別設計構建靶點Ribozyme質粒（共表達GFP追蹤蛋白），用慢病毒轉染方式對相應細胞進行轉染，以GAPDH內參對照對基因表達的下調效率。採用RT實時Q-PCR...
本項目以前期構建成功的發光惡臭假單胞桿菌P. putida BLU為研究對象，通過表面活性劑的篩選及表面活性劑與細胞表面的作用解析，系統研究表面活性劑與該菌細胞表面的相互作用規律；建立螢光素酶發光反應及GFP螢光強度用於表征表面活性劑對整細胞內酶反應和蛋白特性影響的新方法，通過與表面活性劑對相應純蛋白的影響對比...
18.放射複合傷口中Bax,Bcl-2表達與細胞凋亡的關係 19.細胞凋亡在小鼠胸腺淋巴細胞輻射損傷與修復中的作用及其機制 20.兩種特異性磷脂酶C對中華大蟾蜍發育後期尾部程式性細胞死亡調節的初步研究 21.小鼠胚胎幹細胞體外定向心肌細胞分化的研究 22.核糧體蛋白RpL6/Taxreb107核定位信號的確定及啟動子分析 23.非高發區...
體外細胞培養使毒理學研究從簡單的整體動物實驗深入到複雜的細胞和分子水平，脫離了整體穩態和內分泌調控作用，從蛋白質、酶、受體、分子通道以及遺傳因素等方面解析了藥物與機體間的相互作用，在投藥準確性和結果可靠性上顯示了優越性。作為體外細胞實驗金標準的原代肝細胞培養技術廣泛套用在毒理學研究各領域，如通過測定...
7. 採用X、Y軸獨立的雙鏡掃描，掃描為線性掃描。8. 掃描解析度：可以在4 x 1至2。主要功能 雷射共聚焦顯微鏡為細胞生物學研究必需儀器設備，用於研究亞細胞結構、細胞內的物質包括囊泡、細胞器、蛋白質複合體等的轉運、分子相互作用、細胞骨架的動態變化、細胞分裂和細胞器發生過程等等重要生命活動，對細。
本課題組前期研究已經證實STO/BBX24是UV-B信號途徑的負調控因子。本項目在此研究基礎上，以野生型擬南芥、sto突變體和35S::STO-GFP超表達體為材料，利用分子免疫學技術，製備高親和力單克隆anti-STO抗體，通過ChIP-Seq 和CoIP技術篩選STO的互作分子（與STO結合的靶序列DNA和靶蛋白），構建候選互作分子的轉基因...
