基因誘捕

基因誘捕是以胚胎幹細胞和誘捕載體為基礎的一種基因突變技術。誘捕載體主要包含剪接受體等。

基本介紹

• 中文名：基因誘捕
• 學科：生物
• 技術：基因突變技術

定義

基因誘捕（gene trap）是基於小鼠胚胎幹細胞（ES 細胞）和誘捕載體所建立的一種高通量的基因突變技術。常用於將一個插入型突變引入哺乳動物的基因組中，這一技術通常由基因誘捕載體（gene trap vector），也稱報告載體實現。

載體和特點

誘捕載體的主要部件包含：不含啟動子的報告基因（reporter gene），剪接受體（splice acceptor, SA），轉錄終止序列（polyA）等遺傳標記。

誘捕載體的特點是： 無啟動子的報告基因上游有一個剪接受體位點。當整合到宿主細胞基因組後，在內源性基因的順式調控元件啟動子、增強子的轉錄活性作用下，通過mRNA 前體的剪接，上游編碼基因與報導基因產生融合轉錄（fusion transcript），融合轉錄載體在插入位點能夠模仿內源基因的表達，使得內源基因表達終止，達到突變內源基因的目的。

報告基因

基因誘捕載體一般帶有選擇標記和報告基因。1、選擇標記通常為藥物抗性基因neo。2、報告基因的正常表達則可以鑑定陽性整合克隆：當載體插入到未分化胚胎幹細胞，表達報告基因時，其表達產物的特性可以作為鑑定手段，並可定性分析載體在體內的時空表達。報導基因主要有lacZ基因、β-geo基因、綠螢光蛋白基因等幾類。

報告基因為基因誘捕提供了篩選、鑑定的方式，其目的在於方便有效地鑑定誘捕克隆。必要時可以聯合使用幾種報告基因，用以提高誘捕陽性率。