把能夠承載外源基因，並將其帶入受體細胞得以穩定遺傳的DNA分子稱為基因克隆載體。
基本介紹
- 中文名：基因克隆載體
- 外文名：gene cloning vector
在轉基因研究中，單獨一個包含啟動子、編碼區和終止子的基因，或者組成基因的某個原件，一般是不容易進入受體細胞的，即使採用理化方法進入細胞後，也不容易在受體細胞內穩定維持。把能夠承載外源基因，並將其帶入受體細胞得以穩定遺傳的DNA分子稱為基因克隆載體。目的基因能否有效轉入受體細胞，並在其中維持和表達，在很大程度上取決於克隆載體。作為基因克隆載體一般具有以下條件。
1、在克隆載體合適的位置必須含有允許外源基因插入的克隆位點，並且這樣的克隆位點應儘可能的多。但是對於某種克隆位點來說，在克隆載體上一般只有一個。為了便於多種類型的DNA片段的克隆，克隆載體中往往組裝一個含多克隆位點的連桿。
2、克隆載體一般能在攜帶外源DNA片段進入受體細胞後，或停留在細胞質中進行自我複製；或整合到染色體DNA、線粒體DNA或葉綠體DNA中，隨著這些DNA的複製而同步複製；或自成染色體而和其他染色體一樣自我複製。如果要求克隆載體中的外源基因在受體細胞中能有效表達，克隆載體必須含有使外源基因得以表達的各種元件，構建成基因表達載體。
3、克隆載體必須含有供選擇轉化子的標記基因或報導基因。例如，根據轉化子抗藥性進行篩選的氨苄西林抗性基因、氯黴素抗性基因、卡那黴素抗性基因、鏈黴素抗性基因、四環素抗性基因等，根據轉化子藍白顏色進行篩選的β-半乳糖苷酶基因，以及表達產物容易觀察和檢測報導的報導基因gus（β-葡萄醛酸苷酶基因）、gfb（綠色螢光蛋白基因）等。
4、克隆載體必須是安全的，不應含有對受體細胞有害的基因，並且不會任意轉入除選定受體細胞以外的其他生物細胞，尤其是人的細胞。
