基本介紹
- 書名：國家理科基地教材:化學生物學實驗
- 出版社：科學出版社
- 頁數：201頁
- 開本：16
- 定價：39.00
- 作者：曾秀瓊 吳起
- 出版日期：2013年1月1日
- 語種：簡體中文
- ISBN：9787030365521
內容簡介,圖書目錄,文摘,
內容簡介
《國家理科基地教材:化學生物學實驗》共編寫41個實驗，包括生化分離分析實驗技術、生物材料製備實驗技術、化學中基因工程實驗技術、化學中蛋白質工程實驗技術和化學中細胞工程實驗技術。每個實驗都精心編寫了實驗導讀，提供了一定的背景材料，使學生能更好地了解這一交叉領域發展的基本狀況和最新進展。41個實驗既可單獨安排教學，也可相互聯繫組合成較系統和深人的實驗系列，以滿足不同學時數的教學要求。
圖書目錄
前言
第1章化學生物學實驗基本知識
1.1實驗室規則及須知
1.2實驗室安全及防護知識
1.2.1防生物源性危害的基本措施
1.2.2放射性和紫外線輻射的危害和防護
1.2.3特殊化學生物學試劑的安全使用與儲存
1.2.4化學生物學實驗室廢棄物的處理
第2章化學生物學實驗基本操作
2.1常用儀器的洗滌與清潔
2.1.1玻璃器皿的清洗
2.1.2其他材質器皿的清洗
2.1.3鉻酸洗液的配製方法和使用注意事項
2.1.4其他常用的洗液
2.2常用消毒滅菌方法
2.2.1物理消毒滅菌方法
2.2.2化學消毒滅菌方法
2.3離心技術
2.3.1離心技術的原理
2.3.2離心機的類型和轉頭的分類
2.3.3常用離心方法
2.4常用層析技術
2.4.1凝膠層析
2.4.2離子交換層析
2.4.3親和層析
2.4.4疏水層析
2.5電泳技術
2.5.1基本原理
2.5.2瓊脂糖凝膠電泳
2.5.3聚丙烯醯胺凝膠電泳
2.5.4等電聚焦電泳
2.5.5二維電泳
2.5.6毛細管電泳
2.5.7凝膠成像技術
2.6PCR技術
2.6.1PCR技術簡介
2.6.2PCR技術的基本原理和過程
2.6.3PCR反應的五個元素
2.7DNA測序技術
2.8細胞培養技術
2.8.1體外培養細胞的分類
2.8.2培養細胞的生長和增殖過程
2.8.3原代培養
2.8.4傳代培養
2.8.5細胞的凍存與復甦
2.9化學生物學樣品製備、純化、濃縮和乾燥
2.9.1材料的選取和前處理
2.9.2細胞的破碎
2.9.3蛋白質的提取和純化
2.9.4核酸的提取和純化
2.9.5樣品的濃縮和乾燥
第3章生化分離分析實驗技術
實驗1疏水作用色譜分離純化a一澱粉酶
實驗2親和層析樹脂的製備及溶菌酶的提取純化
實驗3香菇多糖的提取、純化及總糖含量測定
實驗4青黴素醯化酶米氏常數和反應活性的測定
實驗5靜電自組裝構築HRP多層膜電極檢測酚類物質研究
實驗6表面等離子光譜生物感測器研究抗原與抗體的相互作用
實驗7FRET法及螢光猝滅法測定蛋白酶的活性
第4章生物材料製備實驗技術
實驗8生物礦物和生物礦化——碳酸鈣多形的控制與製備
實驗9無定形碳酸鈣的製備和轉化
實驗10硫酸鏈黴素肺靶向明膠微球的製備及含量測定
實驗11聚乙烯亞胺一DNA複合物粒徑的測定
實驗12聚乙烯亞胺一阿黴素共聚物的合成
實驗13復凝聚法製備阿黴素微囊及細胞毒性評價
實驗14鹽酸左氧氟沙星不同晶形的製備及其表征
第5章化學中基因工程實驗技術
實驗15質粒DNA的提取與純化
實驗16大腸桿菌感受態細胞製備與質粒DNA的轉化
實驗17瓊脂糖凝膠電泳分離DNA片段
實驗18PCR基因擴增獲取毛囊DNA及其分離
實驗19植物組織中基因組DNA的提取與擴增
實驗20PCR_RFLP法檢測單核苷酸多態性
實驗2l基於連線反應的滾環擴增技術檢測單核苷酸多態性
實驗22枯草桿菌脂肪酶A的基因克隆
第6章化學中蛋白質工程實驗技術
實驗23醯化酶催化4—硝基咪唑的Markovnikov加成反應
實驗242'—脫氧尿苷衍生物的酶促合成的選擇性調控
實驗25酶催化Michael加成反應
實驗26Novozyrn435催化的1—位芳基取代的末端炔丙醇動力學拆分反應
實驗27金屬卟啉模擬的生物氧化過程
實驗28泛素蛋白的操控式分子動力學模擬
實驗29纖連蛋白在羥磷灰石上吸附一脫附過程的分子模擬
第7章化學中細胞工程實驗技術
實驗30動物細胞的培養
實驗31MTT法測定聚乙烯亞胺的細胞毒性
實驗32抗腫瘤藥物5—氟尿嘧啶對腫瘤細胞的抑制及細胞形態觀察
實驗33ATP生物螢光藥敏檢測技術檢測5一氟尿嘧啶對卵巢癌細胞的藥敏實驗
實驗34抗腫瘤藥物5—氟尿嘧啶對腫瘤細胞遷移的影響
實驗35聚乙烯亞胺—DNA複合物的製備和體外細胞轉染實驗
實驗36聚乙烯亞胺攜帶基因在細胞中的螢光染色實驗
實驗37聚乙烯亞胺作為基因載體材料攜帶TRAIL基因對細胞凋亡的影響
實驗38聚乙烯亞胺一阿黴素聚合物的細胞攝取實驗
實驗39硫酸氫氯吡格雷對人胃黏膜上皮細胞株GES—1增殖影響
實驗40喹諾酮類藥物鹽酸左氧氟沙星的抑菌實驗
實驗4l聚乙烯亞胺一阿黴素皮下注射體內滯留實驗
第8章附錄
8.1常用儀器的使用說明
8.1.1移液槍
8.1.2氣相色譜儀
8.1.3液相色譜儀
8.1.4紫外一可見分光光度計
8.1.5紅外光譜儀
8.1.6螢光分光光度計
8.1.7PCR儀
8.1.8表面等離子共振生物感測實驗儀
8.1.9蛋白質分離純化系統
8.1.10CHI電化學分析儀
8.1.11高速冷凍離心機
8.1.12COz培養箱
8.1.13倒詈相差顯微鏡
8.1.14酶標儀
8.1.15活體螢光成像系統
8.2常用緩衝溶液的配製
8.3常用特殊化學生物學試劑的配製
8.3.1細胞培養液的配製
8.3.2Mrrr溶液的配製方法
8.3.3HE染色液的配製
8.4Linux作業系統的基本操作
8.5生物信息資料庫
第1章化學生物學實驗基本知識
1.1實驗室規則及須知
1.2實驗室安全及防護知識
1.2.1防生物源性危害的基本措施
1.2.2放射性和紫外線輻射的危害和防護
1.2.3特殊化學生物學試劑的安全使用與儲存
1.2.4化學生物學實驗室廢棄物的處理
第2章化學生物學實驗基本操作
2.1常用儀器的洗滌與清潔
2.1.1玻璃器皿的清洗
2.1.2其他材質器皿的清洗
2.1.3鉻酸洗液的配製方法和使用注意事項
2.1.4其他常用的洗液
2.2常用消毒滅菌方法
2.2.1物理消毒滅菌方法
2.2.2化學消毒滅菌方法
2.3離心技術
2.3.1離心技術的原理
2.3.2離心機的類型和轉頭的分類
2.3.3常用離心方法
2.4常用層析技術
2.4.1凝膠層析
2.4.2離子交換層析
2.4.3親和層析
2.4.4疏水層析
2.5電泳技術
2.5.1基本原理
2.5.2瓊脂糖凝膠電泳
2.5.3聚丙烯醯胺凝膠電泳
2.5.4等電聚焦電泳
2.5.5二維電泳
2.5.6毛細管電泳
2.5.7凝膠成像技術
2.6PCR技術
2.6.1PCR技術簡介
2.6.2PCR技術的基本原理和過程
2.6.3PCR反應的五個元素
2.7DNA測序技術
2.8細胞培養技術
2.8.1體外培養細胞的分類
2.8.2培養細胞的生長和增殖過程
2.8.3原代培養
2.8.4傳代培養
2.8.5細胞的凍存與復甦
2.9化學生物學樣品製備、純化、濃縮和乾燥
2.9.1材料的選取和前處理
2.9.2細胞的破碎
2.9.3蛋白質的提取和純化
2.9.4核酸的提取和純化
2.9.5樣品的濃縮和乾燥
第3章生化分離分析實驗技術
實驗1疏水作用色譜分離純化a一澱粉酶
實驗2親和層析樹脂的製備及溶菌酶的提取純化
實驗3香菇多糖的提取、純化及總糖含量測定
實驗4青黴素醯化酶米氏常數和反應活性的測定
實驗5靜電自組裝構築HRP多層膜電極檢測酚類物質研究
實驗6表面等離子光譜生物感測器研究抗原與抗體的相互作用
實驗7FRET法及螢光猝滅法測定蛋白酶的活性
第4章生物材料製備實驗技術
實驗8生物礦物和生物礦化——碳酸鈣多形的控制與製備
實驗9無定形碳酸鈣的製備和轉化
實驗10硫酸鏈黴素肺靶向明膠微球的製備及含量測定
實驗11聚乙烯亞胺一DNA複合物粒徑的測定
實驗12聚乙烯亞胺一阿黴素共聚物的合成
實驗13復凝聚法製備阿黴素微囊及細胞毒性評價
實驗14鹽酸左氧氟沙星不同晶形的製備及其表征
第5章化學中基因工程實驗技術
實驗15質粒DNA的提取與純化
實驗16大腸桿菌感受態細胞製備與質粒DNA的轉化
實驗17瓊脂糖凝膠電泳分離DNA片段
實驗18PCR基因擴增獲取毛囊DNA及其分離
實驗19植物組織中基因組DNA的提取與擴增
實驗20PCR_RFLP法檢測單核苷酸多態性
實驗2l基於連線反應的滾環擴增技術檢測單核苷酸多態性
實驗22枯草桿菌脂肪酶A的基因克隆
第6章化學中蛋白質工程實驗技術
實驗23醯化酶催化4—硝基咪唑的Markovnikov加成反應
實驗242'—脫氧尿苷衍生物的酶促合成的選擇性調控
實驗25酶催化Michael加成反應
實驗26Novozyrn435催化的1—位芳基取代的末端炔丙醇動力學拆分反應
實驗27金屬卟啉模擬的生物氧化過程
實驗28泛素蛋白的操控式分子動力學模擬
實驗29纖連蛋白在羥磷灰石上吸附一脫附過程的分子模擬
第7章化學中細胞工程實驗技術
實驗30動物細胞的培養
實驗31MTT法測定聚乙烯亞胺的細胞毒性
實驗32抗腫瘤藥物5—氟尿嘧啶對腫瘤細胞的抑制及細胞形態觀察
實驗33ATP生物螢光藥敏檢測技術檢測5一氟尿嘧啶對卵巢癌細胞的藥敏實驗
實驗34抗腫瘤藥物5—氟尿嘧啶對腫瘤細胞遷移的影響
實驗35聚乙烯亞胺—DNA複合物的製備和體外細胞轉染實驗
實驗36聚乙烯亞胺攜帶基因在細胞中的螢光染色實驗
實驗37聚乙烯亞胺作為基因載體材料攜帶TRAIL基因對細胞凋亡的影響
實驗38聚乙烯亞胺一阿黴素聚合物的細胞攝取實驗
實驗39硫酸氫氯吡格雷對人胃黏膜上皮細胞株GES—1增殖影響
實驗40喹諾酮類藥物鹽酸左氧氟沙星的抑菌實驗
實驗4l聚乙烯亞胺一阿黴素皮下注射體內滯留實驗
第8章附錄
8.1常用儀器的使用說明
8.1.1移液槍
8.1.2氣相色譜儀
8.1.3液相色譜儀
8.1.4紫外一可見分光光度計
8.1.5紅外光譜儀
8.1.6螢光分光光度計
8.1.7PCR儀
8.1.8表面等離子共振生物感測實驗儀
8.1.9蛋白質分離純化系統
8.1.10CHI電化學分析儀
8.1.11高速冷凍離心機
8.1.12COz培養箱
8.1.13倒詈相差顯微鏡
8.1.14酶標儀
8.1.15活體螢光成像系統
8.2常用緩衝溶液的配製
8.3常用特殊化學生物學試劑的配製
8.3.1細胞培養液的配製
8.3.2Mrrr溶液的配製方法
8.3.3HE染色液的配製
8.4Linux作業系統的基本操作
8.5生物信息資料庫
文摘
著作權頁：
插圖：
改變凝膠濃度和交聯度，可獲得不同孔徑、密度、黏度、彈性以及機械強度的凝膠，以適應各種樣品的分離。
聚丙烯醯胺凝膠可以分為變性和非變性兩種，其中變性膠包括十二烷基硫酸鈉（SDS）PAGE和尿素—PAGE兩種。前者用於分離蛋白質，後者用於分離核酸。非變性凝膠電泳過程中，蛋白質和核酸保持原來的結構狀態，並根據相對分子質量、電荷與空間結構逐級分離。但是非變性PAGE得到的電泳譜圖往往包括非常複雜的結構信息，不容易判斷和分辨，於是發展了變陛PAGE技術。其中，SDS—PAGE在測定蛋白質相對分子質量信息方面套用非常廣泛。SDS是一種陰離子表面活性劑，它能夠斷裂分子內和分子間的氫鍵，使分子去摺疊，破壞蛋白質分子的二、三級結構。在樣品和凝膠中加人SDS以及還原劑（巰基乙醇）後，蛋白質分子被解聚成多肽鏈，解聚後的胺基酸側鏈和SDS結合成蛋白質—SDS膠束，所帶的負電荷大大超過了蛋白質膠束原有的電荷量，消除了不同分子間的電荷差異和結構差異對電泳遷移率的影響，使得蛋白質的電泳遷移主要取決於相對分子質量，因此SDS—PAGE是有效的測定蛋白質相對分子質量的方法。為了保證蛋白質與SDS的充分結合，它們的質量比通常為1：4或1：3。在聚丙烯醯胺凝膠中加入6～8mol·L—1尿素，就可使得核酸（DNA和RNA）變性，破壞其二級結構，因此其電泳遷移率主要由鹼基個數決定，用於分離不同長度的核酸。該方法對核酸的最高解析度可達單個鹼基。
插圖：
改變凝膠濃度和交聯度，可獲得不同孔徑、密度、黏度、彈性以及機械強度的凝膠，以適應各種樣品的分離。
聚丙烯醯胺凝膠可以分為變性和非變性兩種，其中變性膠包括十二烷基硫酸鈉（SDS）PAGE和尿素—PAGE兩種。前者用於分離蛋白質，後者用於分離核酸。非變性凝膠電泳過程中，蛋白質和核酸保持原來的結構狀態，並根據相對分子質量、電荷與空間結構逐級分離。但是非變性PAGE得到的電泳譜圖往往包括非常複雜的結構信息，不容易判斷和分辨，於是發展了變陛PAGE技術。其中，SDS—PAGE在測定蛋白質相對分子質量信息方面套用非常廣泛。SDS是一種陰離子表面活性劑，它能夠斷裂分子內和分子間的氫鍵，使分子去摺疊，破壞蛋白質分子的二、三級結構。在樣品和凝膠中加人SDS以及還原劑（巰基乙醇）後，蛋白質分子被解聚成多肽鏈，解聚後的胺基酸側鏈和SDS結合成蛋白質—SDS膠束，所帶的負電荷大大超過了蛋白質膠束原有的電荷量，消除了不同分子間的電荷差異和結構差異對電泳遷移率的影響，使得蛋白質的電泳遷移主要取決於相對分子質量，因此SDS—PAGE是有效的測定蛋白質相對分子質量的方法。為了保證蛋白質與SDS的充分結合，它們的質量比通常為1：4或1：3。在聚丙烯醯胺凝膠中加入6～8mol·L—1尿素，就可使得核酸（DNA和RNA）變性，破壞其二級結構，因此其電泳遷移率主要由鹼基個數決定，用於分離不同長度的核酸。該方法對核酸的最高解析度可達單個鹼基。
