分子體克隆

分子體克隆是在分子水平上提供一種純化和擴增特定DNA片段的方法。常含有目的基因,用體外重組方法將它們插入克隆載體,形成重組克隆載體,通過轉化與轉導的方式,引入適合的寄主體內得到複製與擴增,然後再從篩選的寄主細胞內分離提純所需的克隆載體,可以得到插入DNA的許多拷貝,從而獲得目的基因的擴增。

cDNA克隆是以mRNA為原材料,經體外反轉錄合成互補的DNA(cDNA),再與載體DNA分子連線引入寄主細胞。每一cDNA反映一種mRNA的結構,cDNA克隆的分布也反映了mRNA的分布。特點是:①有些生物,如RNA病毒沒有DNA,只能用cDNA克隆;②cDNA克隆易篩選,因為cDNA庫中不包含非結構基因的克隆,而且每一cDNA克隆只含一個mRNA的信息。

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