《凝集素對糖蛋白N—糖鏈的識別及其臨床套用》是依託復旦大學,由呂元擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名:凝集素對糖蛋白N—糖鏈的識別及其臨床套用
- 依託單位:復旦大學
- 項目類別:青年科學基金項目
- 項目負責人:呂元
- 申請代碼:H2601
- 負責人職稱:教授
- 研究期限:1993-01-01 至 1995-12-31
- 支持經費:3.5(萬元)
- 批准號:39200118
《凝集素對糖蛋白N—糖鏈的識別及其臨床套用》是依託復旦大學,由呂元擔任項目負責人的青年科學基金項目。
《凝集素對糖蛋白N—糖鏈的識別及其臨床套用》是依託復旦大學,由呂元擔任項目負責人的青年科學基金項目。項目摘要通過麥胚凝集素和蔓陀蘿凝集素序列親和層析分離並分析了正常人和各種肝病血清鹼性磷酸酶肝型同工酶,發現肝癌血清鹼性磷...
植物凝集素是一類具有特異糖結合活性的蛋白,具有一個或多個可以與單糖或寡糖特異可逆結合的非催化結構域。凝集素最大的特點在於它們能識別糖蛋白和糖脂,特別是細胞膜中複雜結構的糖鏈,即細胞膜表面決定簇。定義 植物凝集素最早發現於1888年,Stillmark在蓖麻(Ricinus communis L.)籽萃取物中發現了一種細胞凝集因子...
結論: (1)運用MALDI-TOF-MS建立了肝癌、肝病及正常人的血清糖蛋白N糖鏈譜圖; (2)凝集素晶片和糖基轉移酶晶片結果證實血清差異糖鏈的結構部分與肝癌組織特異性差異糖鏈結構相一致:如核心岩藻糖、平分型糖鏈結構; (3)與疾病進程相關的差異性糖鏈結構在不同轉移潛能肝癌細胞系以及肝癌細胞誘導EMT過程中存在一...
;②凝集素對糖肽的提取:凝集素是一類糖結合蛋白,能專一地識別某一特定結構的單糖或寡糖中特定的糖基序列並與之結合。核糖核酸酶B中的糖鏈為高甘露糖型,我們選用其特異性吸附凝集素---伴刀豆球蛋白(ConA)對含糖肽段進行提取,並直接進行MALDI-TOF-MS檢測,為今後糖肽序列分析及糖鏈結構分析奠定了基礎。
糖蛋白中的糖鏈變化較大,含有豐富的結構信息。寡糖鏈往往是受體、酶類的識別位點。1、 N-糖苷鍵型(N-連線)N-糖苷鍵型主要有三類寡糖鏈:① 高甘露糖型,由GlcNAc和甘露糖組成;② 複合型:除了GlcNAc和甘露糖外、還有果糖、半乳糖、唾液酸;③ 雜合型,包含①和②的特徵。五糖核心 2、 O-糖苷鍵型(O...
發展了凝集素親和色譜/肼化學法等富集糖肽的技術和外切糖苷酶分離糖鏈的技術,結合使用高精度的Orbitrap質譜儀解決了糖蛋白的糖基化位點分析問題;發展Nano-ESI/MALDI為離子源的多級串級質譜分析技術,部分解決了糖鏈分支結構的分析問題;發展了基於專家知識的糖蛋白子庫產生/搜尋和質譜儀器參數的反饋控制,編寫了GRIP糖...
同時,針對CLEC-2受體糖鏈鑑定發展的糖肽生物質譜鑑定新方法,進一步成功發展套用於了另一種C型凝集素受體LOX-1的糖基化修飾信息。因此在該項目資助下,我們建立和完善了糖生物學研究的技術平台,特別是建立了有效的微量(微克級)糖蛋白糖鏈解析方法,在糖鏈結構和功能分析這一國際性難題上取得了一些突破,獲得了...
這些惡性腫瘤分泌的特異性蛋白質(如腎癌尿中的γ-谷氨醯轉肽酶,胰癌白中的核糖核酸酶和膽管癌中的糧蛋的)均有糖鏈結構的相應改變,用凝集素可與正常糖蛋的區別面用於診斷,又研究了肺癌中Lewis 抗原的表達,發現發達量與轉移與否分化程度相關,尤以slex的關係最屬密切,以上研究有較亡的創新,潛在套用價值較...
套用 1)分離和純化含糖高分子;2)分離和純化細胞;3)鑑定微生物;4)選擇突變株細胞;5)研究細胞表面的結構特徵;6)鑑定糖鏈的結構;7)探索免疫反應的機理;8)作為組織化學和細胞化學的試劑;9)作為腫瘤細胞鑑定試劑和治療劑;l0)臨床上的其他用途。檢測方法 1、直接凝集法:可溶性的Lectin結合在微生物的表面。2...
同時,糖蛋白還是一種結合蛋白質,糖蛋白是由短的寡糖鏈與蛋白質共價相連構成的分子,糖鏈作為綴合蛋白質的輔基。寡糖和蛋白質有兩種結合方式:(1)糖的半縮醛羥基和含羥基的胺基酸(絲氨酸、蘇氨酸、羥基賴氨酸等)以O-糖苷鍵結合;(2)糖的半縮醛羥基和天冬醯胺的醯胺基以N-糖苷鍵結合。在自然界中的分布十分廣泛。
利用免疫組化技術,Con A可用於病理標本中的組織細胞的巨噬細胞展示,區分正常分泌ACTH的垂體細胞和分泌ACTH的腺腫瘤細胞。Con A加強谷氨酸鹽神經遞質受體的反應,已被用於研究糖基化在離子通道調節中的作用。以Con A為配基的親和層析介質廣泛用於糖蛋白的分離純化和多糖、糖蛋白糖鏈結構的研究。
該研究結果以研究論文的形式發表於糖生物學權威專刊glycoconjugate journal上。 糖蛋白定量是我們的重要研究目標。N-糖醯胺酶(PNGase F)在糖基化修飾研究領域的套用十分廣泛,PNGase F酶促18O標記定量技術已廣泛套用於糖蛋白定量。而長期以來,針對糖鏈的PNGase酶促18O標記定量始終沒有實現。為了徹底實現PNGase催化...
第一部分是基礎篇,包括後基因組研究的序曲-糖生物學、糖苷酶、糖基轉移酶、糖核苷酸轉運體、N-聚糖的多樣性、黏蛋白型糖鏈的多樣性、糖脂和糖脂微結構域、蛋白聚糖的多樣性、GPI錨定蛋白生物學意義、凝集素的生物學功能、細胞質PNGase和內質網品質管理等,為學習實驗篇部分的知識打下基礎。第二部分是實驗篇,包括...
因此,層粘連蛋白或其活性多肽對於損傷的神經具有治療的套用前景。(5)層粘連蛋白的碳水化合物與細胞之間的作用 研究表明,層粘連蛋白中含有12%~15%的碳水化合物。以外源凝集素親和層析從EHS肉瘤中純化分離到的層粘連蛋白中的碳水化合物的含量更是高達25%~30%。小鼠層粘連蛋白分子中,68個保守的天門冬氨酸殘基位點...
《C型肝炎病毒包膜糖蛋白糖基化的免疫功能研究》是依託武漢大學,由章曉聯擔任項目負責人的面上項目。項目摘要 C型肝炎病毒(hepatitis C Virus, HCV)包膜糖蛋白在免疫識別和感染過程中,以及在免疫反應中均起著重要作用,儘管病毒糖基化或糖鏈在病毒感染過程中的功能有些報導,但是這些複雜糖基化或糖鏈在免疫識別和...
芸豆凝集素(PHA)是一種糖蛋白,近來研究發現PHA具有抗HIV-1病毒活性,引起人們高度關注。本項目擬採用不同強度的物理加工技術(超聲、高靜壓或超高壓微射流均質處理等)對芸豆進行處理,對其所含凝集素PHA進行有效的分離純化,藉助光譜、質譜等先進手段對PHA的糖鏈結構(糖鏈中單糖組成及分子比例、糖鏈分子質量、糖...
N聚糖酶是細胞質基質中負責切除錯誤摺疊糖蛋白中天冬醯胺連線的寡糖鏈的酶。酶的作用有助於後續的蛋白質降解。糖鏈作為撮合蛋白質的輔基,一般都少於15個單糖,因此也稱為寡糖鏈。寡糖鏈的結構非常多,其可以與核酸和蛋白質相比較。糖鏈是由人體細胞中各種糖連線而成的鏈狀物質,是糖脂質和糖蛋白質的組成部分。在...
2、膜表面C 型凝集素 除可溶型C 型凝集素外,大部分C 型凝集素位於細胞膜表面,可分為經典與非經典 C 型凝集素。作為細胞表面受體,能夠識別廣泛的配體,包括糖鏈、蛋白質和脂類等。這些蛋白作為黏附受體、信號受體或吞噬受體,參與細胞間的黏附、識別以及外源 / 內源物質的吞噬清除和細胞內信號轉導,在維持機體...
第二節 動物凝集素的分類 第三節 P-型凝集素 第四節 I-型凝集素 第五節 C-型凝集素 第六節 S-型凝集素 第七節 選擇素 第八節 與糖胺聚糖相結合的信號傳導配體與受體蛋白 第九節 糖的免疫調控機制 參考文獻 第四章 糖生物合成缺陷性遺傳病 第一節 GDP-岩藻糖轉運蛋白缺乏症 第二節 N-糖鏈合成缺陷...
3.一種分離鑑定糖蛋白N-糖鏈結構的方法;關鋒、楊剛龍、譚增琦、李想、郭佳、龐星辰;201410291021.3 4.一種細菌納米磁小體-凝集素複合物及其製備方法與套用;關鋒、李想、楊剛龍、郭佳、劉昌梅;CN201510075253.X 5.富集和純化糖基化蛋白的方法;李錚、陳超、楊剛龍、崔亞麗;ZL200510096270.8 6.富集和純化糖結合...
凝血素是一種植物凝集素,其特點能與糖結合,是具有生物活性的糖蛋白,能凝固紅血球,因為植物凝集素與動物細胞上的特異糖基有很高的親和力,不同動物細胞表面有不同類型的糖基,所以不同來源植物凝集素與不同種動物的細胞膜有特異性結合反應。據Smith.K.J報導,這種凝集素受單個顯性基因控制。大豆凝血素與兔紅細胞...
4,糖鏈在受精過程中起著重要的作用。方法 活細胞中去糖基化的方法:1,衣黴素在體內阻斷N-連糖; 2,將內切神經氨酸酶注入發育中的視網膜提示了多唾液酸的特異性作用--將高純度酶注入細胞內+恰當的對照;3,將糖基修飾酶的cDNA在活細胞或動物中表達; 4,在培養環境中加入凝集素或抗體把特異的聚糖...
甲胎蛋白(AFP)是一種含有N-連線的雙糖鏈分子結構的糖蛋白,可來源於胎兒肝臟和卵黃囊。不同來源的AFP在糖鏈結構上存在一定的區別,這種分子結構上的差別可通過植物凝集素與其不同的親和力將其檢出,通常將這種不同構型的AFP稱為AFP異質體或亞型[3-6]。在某些兒童疾病中能發現血清AFP異常升高,如:性腺或性腺外...
人的血型是A型、B型、AB型還是O型,是由紅細胞膜脂或膜蛋白中的糖基(也稱為ABO血型抗原,ABO血型決定子)決定的。A血型的人具有一種酶(A酶),這種酶能夠將N-乙醯半乳糖胺添加到糖鏈的末端;B血型的人具有在糖鏈末端添加半乳糖的酶(B酶),AB血型的人具有上述兩種酶;O血型的人則缺少上述兩種酶,在抗原的...
β1,3-N-乙醯氨基葡萄糖轉移酶2 ( β3GnT-2 ) 催化合成糖蛋白糖鏈中的多聚乙醯氨基乳糖結構。本項目分析了β3GnT-2在人肝癌細胞株和原發性肝癌組織中的表達特徵。並通過凝集素印跡分析以及構建轉基因肝癌細胞,發現β3GnT-2在肝癌細胞膜蛋白,如CD24、EGFR等糖蛋白多聚乳糖胺鏈( polyLacNAc, PLN )...
大豆凝血素是一種植物凝集素,其特點能與糖結合,是具有生物活性的糖蛋白,能凝固紅血球,因為植物凝集素與動物細胞上的特異糖基有很高的親和力,不同動物細胞表面有不同類型的糖基,所以不同來源植物凝集素與不同種動物的細胞膜有特異性結合反應。簡介 凝血素,又稱血球凝集素,是一種以高親和性將聚糖結合在糖蛋白、糖脂...
許多糖蛋白同時具有N-連線的糖鏈和O-連線的糖鏈。O-連線的糖基化在高爾基體中進行,通常的一個連線上去的糖單元是N-乙醯半乳糖,連線的部位為Ser、Thr和Hyp的OH基團,然後逐次將糖基轉移到上去形成寡糖鏈,糖的供體同樣為核苷糖,如UDP-半乳糖。糖基化的結果使不同的蛋白質打上不同的標記,改變多肽的構象和...
凝集素:非免疫球蛋白本質的蛋白或糖蛋白,他能特異性識別並可逆結合複雜糖複合物中的糖鏈而不改變所結合糖基的共價鍵結構。大豆凝集素:指能與N-乙醯基半乳糖胺/半乳糖特異結合的糖蛋白約占蛋白質的3%,120KDa,四聚體,在小腸中有50%-60%不被降解。能與細胞表面的特殊糖蛋白和寡糖結合,凝集紅血球,破壞腸壁...
具有凝集原A的紅細胞可被抗A凝集素凝集;抗B凝集素可使含凝集原B的紅細胞發生凝集。分子基礎 血型實質上是不同的紅細胞表面抗原。紅細胞質膜上的鞘糖脂是AB0血型系統的血型抗原,血型免疫活性特異性的分子基礎是糖鏈的糖基組成。1960年,瓦特金斯(A. Watkins)確定了ABO抗原是糖類,並測定了其結構。A、B、O三種...