《人精子泛素化的蛋白質組研究及功能意義》是依託復旦大學，由陳紅擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：人精子泛素化的蛋白質組研究及功能意義
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：陳紅
- 支持經費：8（萬元）
- 研究期限：2009-01-01 至 2009-12-31
- 負責人職稱：教授
- 申請代碼：C1105
- 批准號：30871316
項目摘要
已知形態正常與異常的人精子都會泛素化。申請人推測兩類精子泛素化的蛋白成分或修飾位點不同，形態正常精子的泛素化與受精有關。為此，本課題以無吸菸史且已生育的30～40歲男性捐精者為對象，按WHO標準以不連續Percoll梯度密度離心法分離精子，檢測其活力、形態和功能以確定活力精子組和無活力精子對照組。螢光探針標記精子及其線粒體的活力後，免疫螢光染色分析精子的泛素化與其表達UCHL-1/3和蛋白酶體的細胞定位、表達水平和細胞數量等關係，以及與精子活力、形態和線粒體功能的相關性；同時，套用體外精卵融合實驗，分別添加泛素、UCHL-1/3、蛋白酶體的特異性抗體或抑制劑，檢測卵母細胞受精率和精子線粒體功能的變化。最後，質譜法鑑定比較經泛素結合蛋白純化和蛋白凝膠電泳分離的精子泛素化蛋白的成分及泛素修飾位點的異同。從而深入探討人精子泛素化的分子機制及功能，為不孕不育症診斷治療及優生優育，提供新的干預手段。
