《中央記憶T細胞對結核疫苗保護作用的免疫機制研究》是依託復旦大學，由范小勇擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：中央記憶T細胞對結核疫苗保護作用的免疫機制研究
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：范小勇
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
鑒於卡介苗(BCG)保護成人肺結核效力不足並在接種10-15年後免疫記憶逐漸喪失的事實以及抗原特異性中央記憶T細胞(TCM)與多種慢性病原體感染的免疫保護直接相關的有力證據，我們推測不能有效誘導機體產生高水平的TCM細胞群可能是導致BCG對成人肺結核保護力低下的主要原因之一。為驗證此假說，我們在預實驗中首先證實了健康成人的TCM細胞頻率要明顯低於兒童，接著擬綜合利用流式細胞表面染色、胞內因子染色等技術手段，分別在不同年齡段人群(健康人/TB患者)以及接種疫苗的小鼠(不同亞單位疫苗) 兩水平多層面地綜合分析多功能T細胞頻率、I型細胞因子動態變化、TCM與TEM細胞亞型及其功能變化等，以系統研究結核疫苗誘導的免疫學特徵特別是TCM頻率及其功能與抗結核免疫保護之間的關係，旨在嘗試解釋結核疫苗免疫保護或失保護可能的新機制，從而有助於有效評價並增強結核疫苗的保護效力，並用以指導結核新疫苗的合理設計。
結題摘要
鑒於卡介苗(BCG)保護成人肺結核效力不足並在接種10-15 年後免疫記憶逐漸喪失的事實以及抗原特異性中央記憶T細胞(TCM)與多種慢性病原體感染的免疫保護直接相關的有力證據，我們推測中央記憶性免疫水平不足可能是導致BCG對成人肺結核保護力低下的主要原因之一。為證，我們構建了表達結核分枝桿菌免疫優勢抗原Ag85A或嵌合抗原Ag85A- ESAT-6的DNA疫苗或構建了表達Ag85A/B嵌合抗原的重組仙台病毒載體疫苗，分別用這些不同形式的疫苗或免疫策略接種小鼠，綜合利用流式細胞表面染色、胞內因子染色等技術手段，分析不同免疫接種策略所誘導產生的多功能T 細胞頻率、I 型細胞因子動態變化、TCM與TEM細胞亞型及其功能變化等免疫學特徵；同時將免疫小鼠進行結核分枝桿菌標準毒株H37Rv的氣霧攻擊，利用CFU計數分析疫苗誘導產生的保護作用，用H&E染色分析感染後的病理損傷情況，並同步分析結核菌感染後的二次免疫應答水平及其記憶表型，重點分析疫苗誘導的中央免疫記憶水平在抗結核保護中的作用，以系統研究結核疫苗誘導的免疫記憶特徵及其功能與抗結核免疫保護之間的關係。最終，我們完成了不同疫苗誘導的免疫學特徵研究和Mtb 毒株攻擊實驗，確定了不同結核疫苗誘導的免疫記憶差異及其抗Mtb 感染保護力的關係，同時確定了測定分泌IL-2的中央免疫記憶T細胞頻率或IL-2的表達量可作為評估抗Mtb 感染保護力的一種新工具，對於結核病新新疫苗的開發或評價具有一定的指導意義。
