《一種腸胃疾病用藥組合物》是湖南新匯製藥股份有限公司於2012年05月17日申請的發明專利，該專利的公布號為：CN102641497A，專利公布日：2012年08月22日，該專利申請號為2012101543379，發明人是何述金，常耀台，賈林，周代俊，周準。
《一種腸胃疾病用藥組合物》涉及一種含有纖維素酶活力的腸胃疾病用藥組合物。該組合物採用了新工藝製備的二次猴頭菌培養物，即採用無菌培養、二次培養、低溫乾燥、低溫滅菌所得到的二次猴頭菌培養物，再與5味中藥組合而成，該組合物由於採用了新工藝製備的猴頭菌培養物，其纖維素酶活性得到了保留，提高了藥效。
2020年7月14日，《一種腸胃疾病用藥組合物》獲得第二十一屆中國專利優秀獎。
基本介紹
- 中文名：一種腸胃疾病用藥組合物
- 公布號：CN102641497A
- 發明人：何述金，常耀台，賈林，周代俊，周準
- 公布日：2012年08月22日
- Int. Cl.：A61K38/47(2006.01)I；A61K36/8905(2006.01)I；C12N1/14(2006.01)I；A61P1/04(2006.01)I
- 申請號：2012101543379
- 專利代理機構：北京風雅頌專利代理有限公司
- 申請日：2012年05月17日
- 代理人：李弘; 陳安平
- 申請人：何述金
- 專利類型：發明專利
- 地址：湖南省長沙市望城經濟開發區唯羅克路18號
專利背景,發明內容,專利目的,技術方案,改善效果,附圖說明,技術領域,權利要求,實施方式,榮譽表彰,
專利背景
猴頭健胃靈是國家藥典品種，它的功能主治是：舒肝和胃，理氣止痛。用於肝胃不和，胃脘脅肋脹痛，嘔吐吞酸；慢性胃炎、胃及十二指腸潰瘍屬上述證候者；是一種治療胃病的特效藥。特別是對幽門螺旋桿菌有較強的抑殺作用，長期服用對消化道癌變有一定的預防作用，並且能緩解其症狀，無毒副作用，是目前市場上治療胃病的新特藥。
猴頭健胃靈膠囊質量標準被收載入《中國藥典》2010年版一部，藥典上規定的猴頭健胃靈膠囊處方為：猴頭菌培養物160克、海螵蛸80克、醋延胡索40克、酒白芍40克、醋香附40克、甘草40克，生產工藝為：以上六味，取猴頭菌培養物80克，加水煎煮二次，每次2小時，濾過，合併濾液減壓濃縮至適量，加入剩餘的猴頭菌培養物，混勻，乾燥，粉碎成細粉；其餘海螵蛸等五味粉碎成細粉，過篩，與上細粉及適量的澱粉混勻，滅菌，裝入膠囊製成1000粒，即得。
猴頭健胃靈療效好、知名度高、美譽度好、市場潛力大，是一個有特色的產品，是生物技術藥與傳統醫藥完美結合的產物，主要原料猴頭菌培養物發揮了重要的藥效活性。
猴頭菌培養物性平，味甘，能利五臟助消化，具有抗潰瘍、抗炎症、抗腫瘤、抗衰老、保肝護肝、降血糖、降血脂和降血壓等療效，並具有抑殺幽門螺旋桿菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌等作用，藥用價值高，市場使用潛力大。
猴頭菌培養物富含纖維素酶，而纖維素酶作用於消化道，在分解纖維素時起生物催化作用，可改善消化道環境，增加酸度，激活胃蛋白酶，增加胃腸道酶分泌量和活性，降低消化道內容物粘度，有利於胃腸道對食物的消化吸收，可配伍其他中藥用於腹脹、不消化、食欲不振等症狀，其活力的強弱直接關係到產品的療效。作為一種複合蛋白質，其穩定性及活性的發揮受到很多因素的影響，如何保持滅菌前後活性不變，成為關鍵性的核心技術。
但猴頭健胃靈按照2012年的生產工藝，其療效並未達到最佳，猴頭菌培養物的生物活性物質特別是蛋白質類的纖維素酶，經過濕熱滅菌、高溫加熱而被滅活，因而還需要進行進一步改進，以達到最佳效果。通過檢測，猴頭菌培養物中羧甲基纖維素酶活力為133U/g，二次猴頭菌培養物中羧甲基纖維素酶活力為183U/g，猴頭健胃靈按原生產工藝生產後纖維素酶活力幾乎為0。
發明內容
專利目的
為了克服2012年前技術中存在的纖維素酶失活的問題，《一種腸胃疾病用藥組合物》提供一種新的腸胃疾病用藥組合物，使藥物中的纖維素酶活力最大限度地保存下來。《一種腸胃疾病用藥組合物》的藥用組合物，羧甲基纖維素酶活力為20~40U/g，有效地提高了藥品的療效。
技術方案
《一種腸胃疾病用藥組合物》是按照如下技術方案實現的：
一種腸胃疾病用藥組合物，其中每1克成品酸性羧甲基纖維素酶活性不低於20U。
上述的腸胃疾病用藥組合物，其中包含二次猴頭菌培養物、海螵蛸、酒白芍、醋延胡索、醋香附、甘草，所述的二次猴頭菌培養物採用如下方法製備：
（1）無菌培養：猴頭菌培養物通過培養基滅菌，10萬級潔淨區內接種、無菌條件下培養40-50天，溫度為20攝氏度-30攝氏度，防止污染；
（2）二次培養：一次培養掏瓶後即得猴頭菌培養物，再轉入塑膠袋中在培養室培養5-10天，培養溫度為20-30攝氏度，取出；
（3）低溫乾燥：在溫度未超過60攝氏度的條件下乾燥；
（4）低溫滅菌：在溫度未超過60攝氏度的條件下滅菌。
上述的腸胃疾病用藥組合物，其中所述的二次猴頭菌培養物中含酸性羧甲基纖維素酶活性不低於150U/g。
上述的腸胃疾病用藥組合物，其中所述二次猴頭菌培養物製備方法的步驟（3）採用微波乾燥技術或真空低溫連續乾燥技術。
上述的腸胃疾病用藥組合物，其中所述二次猴頭菌培養物製備方法的步驟（4）採用鈷-60照射滅菌、紫外照射滅菌中的一種。
上述的腸胃疾病用藥組合物，其中二次猴頭菌培養物、海螵蛸、酒白芍、醋延胡索、醋香附、甘草的質量比為4∶2∶1∶1∶1。
上述的腸胃疾病用藥組合物，其中海螵蛸、酒白芍、醋延胡索、醋香附、甘草均經過滅菌處理。
改善效果
採用《一種腸胃疾病用藥組合物》的產品，保留了纖維素酶活性，提高了藥效。具體如下：
1、《一種腸胃疾病用藥組合物》所述的中藥組合物中纖維素酶活性高，適用於腸胃疾病，促消化作用好，明顯區別於其他中成藥產品。纖維素酶作用於消化道，可改善消化道環境，增加酸度，激活胃蛋白酶，增加胃腸道酶分泌量和活性，降低消化道內容物粘度，有利於胃腸道對食物的消化吸收，其活力的強弱直接關係到產品的療效。
2、採用真空低溫連續乾燥技術，保存活性成分。猴頭菌培養物含有酶、蛋白質等生物活性成分及多種揮發性成分，屬熱敏感性藥材，加熱易變性失活，且其經提取濃縮製得的浸膏粘度高，不易乾燥，如何保持乾燥、滅菌前後活性不變，成為關鍵性的技術難關，採用全自動真空低溫連續乾燥技術，既可以最大化地保留有效活性成分，發揮藥材最好的療效，又使猴頭菌培養物及其浸膏充分乾燥，外觀色澤好，同時全封閉自動化，具有一定的殺菌作用。
3、《一種腸胃疾病用藥組合物》採用二次固體發酵培養物，更有利於菌絲體轉化成有效成分，這樣產生了質的改變，藥效更好，擬將二次猴頭菌培養物準確表述為猴頭菌菌質。一次固體發酵培養後，因瓶內局部缺氧，特別是瓶底部分，菌絲未能將培養基徹底分解轉化，顏色較深，為了使菌絲體徹底轉化培養基，進行二次培養。一次培養掏瓶後，再轉入塑膠袋中在培養室培養一定時間，取出，烘乾，即得。通過對猴頭菌培養物與二次猴頭菌培養物進行檢測比較，結果如下：
猴頭菌培養物與二次猴頭菌培養物檢測比較
猴頭菌培養物與二次猴頭菌培養物檢測比較
猴頭菌培養物與二次猴頭菌培養物的羧甲基纖維素酶活力比較
4、藥粉無菌對接混合提高羧甲基纖維素酶活力，增強療效。猴頭健胃靈原工藝將混合藥粉在製劑最終成型前採用121攝氏度蒸汽滅菌處理30分鐘，以使微生物限度達到國家藥典規定，但高溫長時間操作，使君藥猴頭菌培養物這種特殊生物藥用菌質中的揮發性成分、酶及蛋白質等多種藥效物質被破壞，尤其是酸性羧甲基纖維素酶活力，嚴重影響了猴頭健胃靈的療效發揮。為此，採用將海螵蛸、白芍等其他藥粉滅菌處理後與無菌培養獲得的猴頭菌培養物直接進行無菌對接混合。經檢驗測定，結果表明藥粉無菌對接猴頭健胃靈不僅微生物限度符合國家藥典相關規定，而且酸性羧甲基纖維素酶活力大大提高。
原工藝猴頭健胃靈與無菌對接猴頭健胃靈酸性羧甲基纖維素酶活力比
酸性羧甲基纖維素酶活力檢測方法如下：
對照品溶液的製備：取經105攝氏度乾燥至恆重的無水葡萄糖對照品適量，精密稱定，加水製成每1毫升含1毫克的溶液，即得。
標準曲線的製備：精密量取對照品溶液2.0毫升、4.0毫升、6.0毫升、8.0毫升、10.0毫升，分別置10毫升容量瓶中，各加水至刻度，搖勻。分別精密量取上述溶液1.5毫升，置25毫升具塞刻度試管中，各精密加pH4.8檸檬酸鹽緩衝液0.5毫升，混勻，立即精密加入DNS試劑1.5毫升，搖勻，置沸水浴中保溫15分鐘，取出，迅速自來水冷卻10分鐘，再加水至刻度，搖勻，靜置1.5小時，以相應的試劑為空白，照紫外-可見分光光度法（《中國藥典》2010年版一部附錄VA），在540納米波長處測定吸光度，以吸光度為縱坐標，葡萄糖量為橫坐標，繪製標準曲線。
供試品溶液的製備：取猴頭菌培養物或二次猴頭菌培養物細粉（過二號篩）約2.0克，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入水200毫升，密塞，稱定重量，振搖3小時，再稱定重量，用水補足減失的重量，搖勻，即得。該液應臨用新制。
測定法：精密量取1%羧甲基纖維素鈉溶液1.5毫升置25毫升具塞刻度試管中，精密加供試品溶液0.5毫升，混勻，置50攝氏度水浴中保溫30分鐘，取出，照標準曲線的製備項下的方法，自“立即精密加入DNS試劑1.5毫升”起，依法測定吸光度，從標準曲線上讀出供試品溶液中還原糖的重量（毫克）。空白管加1%羧甲基纖維素鈉溶液1.5毫升，置50攝氏度水浴中保溫30分鐘，取出，精密加供試品溶液0.5毫升，混勻，照標準曲線的製備項下的方法，自“立即精密加入DNS試劑1.5毫升”起，依法進行。按下式計算：
U=A×1/0.5×n×2
式中U——每1克含酸性羧甲基纖維素酶活力單位，U/g；
A——吸光度在標準曲線上查得的還原糖重量，毫克；
n——樣品稀釋倍數；
2——時間換算係數。
1克固體酶在50±1攝氏度、pH4.8條件下，1小時水解1%羧甲基纖維素鈉底物，產生出相當於1毫克葡萄糖的還原糖量為一個酸性羧甲基纖維素酶活力單位，以U/g表示。
二次猴頭菌培養物中每1克酸性羧甲基纖維素酶活性應不低於150U，猴頭健胃靈中每1克酸性羧甲基纖維素酶活性應不低於20U。
附圖說明
圖1為《一種腸胃疾病用藥組合物》所述的腸胃疾病用藥組合物中酶促反應溫度對酶活力測定的影響。
技術領域
《一種腸胃疾病用藥組合物》涉及一種腸胃疾病用藥組合物。
權利要求
1.一種腸胃疾病用藥組合物，其特徵在於包含二次猴頭菌培養物、海螵蛸、酒白芍、醋延胡索、醋香附、甘草，所述的二次猴頭菌培養物採用如下方法製備：（1）無菌培養：猴頭菌培養物通過培養基滅菌，10萬級潔淨區內接種、無菌條件下培養40-50天，溫度為20攝氏度-30攝氏度，防止污染；（2）二次培養：一次培養掏瓶後即得猴頭菌培養物，再轉入塑膠袋中在培養室培養5-10天，培養溫度為20-30攝氏度，取出；（3）低溫乾燥：在溫度未超過60攝氏度的條件下乾燥；（4）低溫滅菌：在溫度未超過60攝氏度的條件下滅菌；每1克成品中含酸性羧甲基纖維素酶活性不低於20U；二次猴頭菌培養物、海螵蛸、酒白芍、醋延胡索、醋香附、甘草的質量比為4∶2∶1∶1∶1∶1。
2.如權利要求1所述的腸胃疾病用藥組合物，其特徵在於所述的二次猴頭菌培養物中含酸性羧甲基纖維素酶活性不低於150U。
3.如權利要求1所述的腸胃疾病用藥組合物，其特徵在於所述二次猴頭菌培養物製備方法的步驟（3）採用微波乾燥技術或真空低溫連續乾燥技術。
4.如權利要求1所述的腸胃疾病用藥組合物，其特徵在於所述二次猴頭菌培養物製備方法的步驟（4）採用鈷-60照射滅菌、紫外照射滅菌中的一種。
5.如權利要求1所述的腸胃疾病用藥組合物，其特徵在於海螵蛸、酒白芍、醋延胡索、醋香附、甘草均經過滅菌處理。
實施方式
- 實施例1
1、無菌培養：培養基通過滅菌，10萬級潔淨區內接種、無菌條件下培養45天，溫度為25攝氏度，防止污染；
2、二次培養：一次培養掏瓶後即得猴頭菌培養物，再轉入塑膠袋中在培養室培養7天，培養溫度為25攝氏度，取出；
3、低溫乾燥：在溫度為45攝氏度的條件下，採用真空低溫連續乾燥技術乾燥；
4、低溫滅菌：在溫度為45攝氏度的條件下採取紫外滅菌的方式滅菌；
5、製備清膏：取上述製備的二次猴頭菌培養物80克，加水煎煮，濾過，濾液減壓濃縮成相對密度為1.15（70攝氏度）的清膏；
6、加入粉末：將上述製備的清膏與海螵蛸粉末80克、酒白芍粉末40克、醋延胡索粉末40克、醋香附粉末40克、甘草粉末40克混合均勻，乾燥，粉碎成細粉，過篩，滅菌，加入二次猴頭菌培養物粉末80克，混勻，裝入膠囊製成1000粒。
榮譽表彰
2020年7月14日，《一種腸胃疾病用藥組合物》獲得第二十一屆中國專利優秀獎。
