理化性質,生理功能,維生素A的重要來源,抗氧化作用,促進細胞縫隙間連線交流,其他功能,生產方法,天然β-胡蘿蔔素的提取,β-胡蘿蔔素的化學合成,生物合成法,基因工程法,主要價值,實際套用,套用方向,套用條件,套用案例,套用效果,貯存事項,攝入指南,食物來源,攝入不足,攝入過量,攝入注意,警惕濫用,
理化性質
β-胡蘿蔔素是胡蘿蔔素中的一種最普通的異構體。以異戊二烯殘基為單元組成的共軛雙鍵,屬多烯色素。
性狀深紅紫至暗紅色有光澤的斜方六面體或板狀微結晶的晶體或結晶性粉末。有輕微異臭和異味。
不溶於水、丙二醇、甘油、酸和鹼,溶於二硫化碳、苯、三氯甲烷,微溶於
乙醚、
石油醚、
環己烷及植物油,幾乎不溶於甲醇和乙醇。
稀溶液呈橙黃或黃色,濃度增大時呈橙色至橙紅色;對光、熱、氧不穩定,不耐酸,但對弱鹼性比較穩定;不受抗壞血酸等還原劑的影響,重金屬離子尤其是Fe可促使其褪色;對油脂性食品的著色性能良好。
ADI值0-5mg/kg( FAO/WHO,2001),LD50> 8000mg/kg(油溶液,狗,經口)。
屬於可以使用的食用合成橙黃色色素,具有維生素的活性,屬於天然似同化合物,安全性比其他合成著色劑高。
生理功能
維生素A的重要來源
β-胡蘿蔔素,攝入人體消化器官後,可以轉化成維生素A,是目前較安全補充維生素A的產品(單純補充化學合成維生素A,過量時會使人中毒)。它可以維持眼睛和皮膚的健康,改善夜盲症、皮膚粗糙的狀況,有助於身體免受自由基的傷害。
1919年Steenkbock發現β-胡蘿蔔素可能具有維生素A活性。1928年發現一分子的β-胡蘿蔔素在體內酶的作用下可轉變為二分子的維生素A,且在食物中含量最豐富,因而被認為是人體維生素A的主要來源。Moore(1929)通過實驗發現,缺乏VA的大鼠補飼β-胡蘿蔔素後能顯著提高體內VA水平,從而證實了β-胡蘿蔔素能在體內酶的作用下轉化為維生素A,發揮維生素A的作用,所以又稱維生素A原。該轉化酶能在體內VA缺乏時將β-胡蘿蔔素轉化為VA,當體內VA增加到需要量時,酶即停止轉化,從而通過酶的自動控制來維持體內VA的需要。全世界,特別是開發中國家人體所需的VA60%-70%來源於β-胡蘿蔔素。此外,VA是合成糖蛋白的載體,糖蛋白是細胞的重要結構物質,尤其是上皮細胞,如果缺少糖蛋白將對眼、呼吸道、消化道、泌尿道及生殖器官產生影響。免疫球蛋白也是一種糖蛋白,VA缺乏將會影響抗體的形成。因此,VA對保證正常的生長和發育及抗感染具有重要作用。
抗氧化作用
β-胡蘿蔔素的抗氧化性主要表現在它具有清除自由基的能力。β-胡蘿蔔素分子中含有多個雙鍵,在光、熱、氧氣及活潑性較強的自由基離子的存在下,易被氧化,從而保護機體不被破壞。生物體中存在大量的脂質過氧化和自由基反應,從而導致細胞功能的下降,機體的衰老以及疾病的發生,β-胡蘿蔔素的存在可減少脂質過氧化。因此,類胡蘿蔔素可以清除自由基以及淬滅單線態氧的活性受到了普遍的關注。
在人體正常的新陳代謝過程中也會產生活性氧,活性氧具有不穩定性和高能水平,可將能量迅速傳遞給其它分子而產生自由基。自由基由於含有不成對的電子,所以性質異常活躍,它可損傷核酸、蛋白質、細胞膜、細胞,導致細胞突變或死亡,從而引起人體早衰。日益增加的證據表明與衰老過程相關聯的多種缺陷是細胞內的多點位氧化損傷積累的直接後果。例如心血管疾患的發病機理之一是低密度脂蛋白的氧化損傷而導致的;一些光化學對晶體所造成的損傷會導致白內障的形成等。而β-胡蘿蔔素具有多個雙鍵是一種有效的抗氧化劑,能傳遞高能量從而使活性氧變成穩定的氧分子。現已知1分子β-胡蘿蔔素可抑制1000個分子的活性氧,同時還可作為一種弱氧化劑直接與自由基反應,阻止自由基的連鎖反應,從而減少它對細胞的損傷。馬愛國在探討抗氧化營養對DNA氧化損傷保護作用時,經實驗發現連續服用β-胡蘿蔔素、維生素E和維生素C,可顯著降低由過氧化氫誘發DNA的損傷。
建立在以人口為基礎的研究表明:人如果每日吃四份或更多富含β-胡蘿蔔素的水果和蔬菜,那么他們患心臟病或癌症的機率會更低。然而有趣的是,其他的研究卻指出刻意補充β-胡蘿蔔素的人實際上更有可能患上此類疾病。研究人員認為,健康、合理、營養豐富的飲食比單一地補充β-胡蘿蔔素將更有效。
促進細胞縫隙間連線交流
細胞間形成的間隙連線使細胞質相互溝通,通過交換小分子來調節代謝反應。早在1958年,人們已觀察到這一結果,現已清楚間隙連線的基本單位是連線子,每個連線子由2個相同或相似的跨膜蛋白亞單位環繞,中心形成一個直徑約1.5nm的孔道,相鄰細胞質膜上的兩個連線子相對便形成一個間隙單位。它允許小的代謝物、細胞內信息及離子自由出入,但蛋白質、mRNA等大分子則被排除在外,以保持各細胞的遺傳一致性。Bertram等發現β-胡蘿蔔素和其它類胡蘿蔔素可加強細胞間隙連線的交流能力。
其他功能
有研究表明高劑量的β-胡蘿蔔素會減少人們對太陽的敏感度,尤其對那些由於被太陽暴曬而引起皮膚病(例如: erythropoietic protoporphyria
紅細胞生成性原卟啉病,一種暴露在日光下而引起尋麻疹或
濕疹的病症)的人特別有幫助。他們可以在保健專業人士適當的指導下,有針對性地補充β-胡蘿蔔素,他們的症狀可在大約數個星期後慢慢地得到改善。在臨床套用方面,研究證實口服β-胡蘿蔔素髮生光敏性紅斑者數量明顯減少。
最近還有研究證明,β-胡蘿蔔素添加到動物食品中作為飼料添加劑對動物具有一定的特異功能。如在用不含β-胡蘿蔔素飼料餵養的母牛時,經常觀察到“無症狀”的發熱,以及延期排卵,卵泡囊腫,拖延和減少黃體的形成,嚴重時,可導致繁殖障礙,胎盤停滯。所有的這些症狀均可通過在飼料中添加β-胡蘿蔔素而加以糾正;吃了富含β-胡蘿蔔素飼料的產蛋雞可提高產蛋率,且蛋黃顏色加深,這是因為雞能把未水解為VA的過量β-胡蘿蔔素儲備起來。
生產方法
天然β-胡蘿蔔素的提取
工業生產中常從胡蘿蔔、玉米、沙棘等富含β-胡蘿蔔素的植物中提取β-胡蘿蔔素。從天然產物中提取β-胡蘿蔔素的方法見右圖。
酶法提取β-胡蘿蔔素目前的研究主要是提高果汁飲料中β-胡蘿蔔素的含量。研究表明果膠酶和纖維素酶處理胡蘿蔔泥可以提高出汁率,胡蘿蔔素提出率可增加2倍多,混濁度增加,穩定性提高,胡蘿蔔汁的顏色變深。但未見有酶處理工藝參數的變化對胡蘿蔔素提出率影響的詳細報導。傳統的榨汁工藝不僅出汁率低,而且只有20%的胡蘿蔔素進入汁液[。酶法液化工藝生產胡蘿蔔原汁工藝簡單,無須增加設備。但酶用量必須適宜,若量大會帶來異味。
β-胡蘿蔔素的化學合成
化學合成法是指採用有機化工原料,通過化學反應合成β-胡蘿蔔素的一種方法。自1953年β-胡蘿蔔素的工業化合成生產開始,其產業不斷得到發展。
迄今為止,已研發出兩條完全不同的工業生產規模的合成路線。
以VA為原料
將VA轉化成
視黃醛和甲基維梯希試劑,再經縮合而成β-胡蘿蔔素。
構造多聚烯鏈
以β-紫羅蘭酮為原料,經4-(2,6,6-二甲基-1-環已烯基)-2-甲基-2-丁烯醛,6-(2,6,6-三甲基-1-環已烯基)-4-甲基-2,4-己二烯醛和8-(2,6,6-三甲基-11環己烯基)-2,6-二甲基-2,4,6-辛三烯醛合成出β-胡蘿蔔素。以β-紫羅蘭酮計,β-胡蘿蔔素的總產率為21%。
Wittig反應是有機合成形成C=C鍵的重要手段,廣泛用於藥物和複雜的有機合成。1956年,BASF公司以β-紫羅蘭酮為原料,經乙烯基-β-紫羅蘭醇,以C15+C2+C15Wittig反應合成β-胡蘿蔔素。以C15烯醇計,β-胡蘿蔔素的收率為25%。
生物合成法
生物合成法即用微生物發酵法生產胡蘿蔔素,從品質、技術、資源和成本等因素考慮均優於化學合成法。國內外微生物合成β-胡蘿蔔素的研究主要集中在
絲狀真菌(三孢布拉氏黴菌)和
紅酵母方面,其提取和純化工藝見圖。除此之外,也有杜氏鹽藻提取法、螺旋藻提取法以及基因工程法用於β-胡蘿蔔素的生產研究。
紅酵母是酵母菌的一個屬,它是一類腐生菌,抗逆性較強。利用紅酵母產β-胡蘿蔔素的優點是成本低、周期短、發酵易於控制。據報導,利用高靜水壓處理過的紅酵母,通過回響面分析法最佳化發酵培養基,可使β-胡蘿蔔素得產量達13.43mg/L。
三孢布拉氏霉屬於真菌,其生長迅速,產生髮達的菌絲。曾強松在種子階段,採用正負孢子混合培養,促進了β-胡蘿蔔素的積累,而這種促進方式是由兩性配合產生的三孢酸介導的。所以研究三孢酸類似物,如青黴素、β-紫羅酮、脫落酸等都能對β-胡蘿蔔素產量的提高有很大的幫助。文獻報導,三孢布拉霉培養基中加入10-4mol/L~10-3mol/L的β-紫羅酮後,β-胡蘿蔔素的含量比空白提高了250%,而且要在對數生長期添加,這樣更有利於菌體產β-胡蘿蔔素,添加太早或太多都會抑制β-胡蘿蔔素的產量。廖春麗通過回響面法最佳化了β-胡蘿蔔素液體發酵培養基,得到了較高的β-胡蘿蔔素產量。
在杜氏鹽藻中的β-胡蘿蔔素含量最高可達幹細胞重量的0.3%,因而是提取天然β-胡蘿蔔素的理想原料。杜氏鹽藻是一類生活在富含NaCl的水(如海洋、鹽湖、鹽池、鹽鹼等)中的單細胞低等真核生物。β-胡蘿蔔素作為鹽藻光合作用的產物,受生長環境的鹽度、溫度、光照射條件及磷源的影響。根據這些條件對鹽藻生長和β-胡蘿蔔素合成的影響,採用二步法培養杜氏鹽藻,即先在鹽藻生長有利的條件下培養,此時藻體生長繁殖快,待藻體生長成熟,再收集藻體轉入不利於藻體生長但有利於合成積累β-胡蘿蔔素的強光、高鹽、低氮、高溫條件下培養。
螺旋藻是一種新興的食療食物,其成份包括β-胡蘿蔔素等。6g螺旋藻中的β-胡蘿蔔素相當於雞蛋20個。目前,由於螺旋藻中β-胡蘿蔔素的含量非常豐富而且要遠高於某些動物或植物,因此從螺旋藻中提取β-胡蘿蔔素已經成為當前研究的熱點。
中國科學院武漢植物園天然產物合成生物學學科組碩士研究生李倩在章焰生研究員的指導下,於釀酒酵母中重構了β-胡蘿蔔素的生物合成途徑,將來源於紅髮夫酵母中與β-胡蘿蔔素合成相關的基因crtYB(八氫番茄紅素合成酶及番茄紅素環化酶基因)和crtI(八氫番茄紅素脫氫酶基因)轉入釀酒酵母,並對這兩個基因進行了密碼子的最佳化;同時通過過量表達異戊稀代謝途徑中的關鍵限速酶HMGR(3-羥基-3-甲基戊二醯輔酶A還原酶)基因,發現菌株β-胡蘿蔔素的產量提高了很多,且對釀酒酵母的生長無影響,最終得到具備高效合成β-胡蘿蔔素能力的釀酒酵母工程菌株。
該研究為釀酒酵母大規模生產β-胡蘿蔔素提供依據,也為釀酒酵母中萜類物質生物合成及代謝工程改造提供了一定的理論基礎。
β-胡蘿蔔素易於氧化,所以不管採用何種製備方法,都必須防止生產過程中β-胡蘿蔔素不必要的損失。針對目前β-胡蘿蔔素供不應求的狀況,探索出一種成本低、產率高、無污染、無毒害、適於大規模工業化生產的製備β-胡蘿蔔素的方法非常必要。
基因工程法
隨著轉基因技術的迅速發展,利用基因工程菌生產類胡蘿蔔素成為研究的熱點。近年來,對其主要合成途徑的研究取得了重大進展,已從分子水平闡釋其生物合成途徑,關鍵酶基因先後得到分離,並已初步實現通過遺傳工程技術改變植物和微生物中類胡蘿蔔素的組成和含量。
主要價值
β-胡蘿蔔素,屬於四萜類化合物,有很高的藥理學及營養學價值,現在已廣泛套用於醫藥、保健品、食品添加劑及化妝品等行業。作為
食品添加劑、
營養強化劑和醫藥製劑使用。
實際套用
β-胡蘿蔔素,名字來源於拉丁文中的胡蘿蔔,是一種橘黃色脂溶性化合物,是維生素A前體,它在植物中大量存在,令水果和蔬菜擁有了飽滿的色彩。由於具有著色、抗氧化和營養增強等功能,β-胡蘿蔔素被廣泛用於普通食品和醫療保健品。
β-胡蘿蔔素作為食品添加劑和營養強化劑已被聯合國糧農組織和世界衛生組織食品添加劑聯合專家委員會推薦,被認定為A類優秀營養色素,並在世界52個國家和地區獲準套用。
套用方向
著色劑
首先,β-胡蘿蔔素具有良好的著色性能,著色範圍是黃色、橙紅,著色力強,色澤穩定均勻,能與K、Zn、Ca等元素並存而不變色,尤其適合與兒童食品配伍。它還能用於藥片糖衣著色,色澤、穩定性均優於檸檬黃、胭脂紅複色糖衣法。國內β-胡蘿蔔素已作為著色劑列入中華人民共和國國家標準(食品添加劑使用衛生標準GB-2760-96)。β-胡蘿蔔素通過合成法或發酵法套用在普通食品中。
β-胡蘿蔔素作為一種食用油溶性色素,其本身顏色因濃度的差異,可涵蓋由紅色至黃色的所有色系,因此受到食品行業關注。其非常適合油性產品及蛋白質性產品的開發,做食用橙色色素和營養強化劑,如人造奶油、膠囊、魚漿煉製品、素食產品、速食麵的調色等。而經過微膠囊處理的β-胡蘿蔔素,可轉化為水溶性色素,幾乎所有食品都可套用。
合成的β-胡蘿蔔素作為食品添加劑,已被列入《食品安全國家標準 食品添加劑使用標準》(GB 2760),以著色劑的作用用於各大類食品,賦予食品色澤。
在GB 2760中,合成的β-胡蘿蔔素可以用於調製乳(1g/kg最大使用量,下同)、風味發酵乳(1g/kg)、乾酪類似品(1g/kg)、脂肪類甜品(1g/kg)、水果罐頭(1g/kg)、果醬(1g/kg)、蜜餞涼果(1g/kg)、乾制蔬菜(0.2g/kg)、醃漬的蔬菜(0.132g/kg)、糖果(0.5g/kg)、方便米麵製品(1g/kg)、熟肉製品(0.02g/kg)等食品類別。根據GB 2760最近一次修訂,β-胡蘿蔔素的使用範圍擴大到調理肉製品(生肉添加調理料)(食品類別08.02.01)。
營養強化劑
β-胡蘿蔔素作為營養強化劑原料,廣泛套用在保健食品中。
和其他的類胡蘿蔔素一樣,β-胡蘿蔔素是一種抗氧化物。食用富含β-胡蘿蔔素中的食物,可以防止身體接觸一種稱為自由基的破壞分子,自由基通過氧化過程會對細胞造成傷害。
同時,β-胡蘿蔔素會在需要時被人體轉換成維他命A。如果人體攝入過量的維他命A,會造成中毒。而當人體有需要時,β-胡蘿蔔素才會被轉換成維他命A,這一特徵使β-胡蘿蔔素成為維他命A的一個安全來源。
抗氧化劑
而且,β-胡蘿蔔素是一種優良的抗氧化劑,它和維生素E、維生素C有相互協同的作用,它們的組合被稱為抗氧化劑的“鐵三角”,具有很強的抗氧化作用。在口紅、胭脂等化妝品中添加β-胡蘿蔔素,可使其色澤自然豐滿,又能營養皮膚、保護皮膚。
套用條件
(1)採用玻璃、搪瓷、不鏽鋼等耐腐蝕的清潔容器具。
(2)紅紫至暗紅色結晶粉末。粉狀著色劑宜少量油脂或乙醇打漿後,在攪拌下緩慢加入油脂或乙醇。一般用食用級植物油製成油脂的乳化製品或懸浮液,其中可含有乳化劑、乳化穩定劑甚至抗氧化劑(生育酚)。加於油脂中,宜加熱以提高其溶解性;固體則為可分散於水中的粉狀賦形劑。
(3)注意體系的pH,在弱鹼中較穩定。
(4)耐光性較差,遇氧、熱不穩定。過度曝曬,會導致著色劑褪色,因而要避光,儲於暗處或不透光容器中。
(5)同一色澤的色素如混合使用時,其用量不得超過單一色素允許量。用於固體飲料及高糖果汁及果味飲料,色素加入量按產品的稀釋倍數加入。
(6)易氧化,應避免與空氣接觸。
套用案例
β-胡蘿蔔素在南瓜麵包中的套用案例
原料:
高筋麵粉170g、白糖35g、老面70g、酵母2g、老南瓜泥(南瓜蒸熟後壓碎)90g、植物油15g、鹽2g、β-胡蘿蔔素0.2g
做法:
1.老面提前一天準備,南瓜泥蒸熟後壓碎備用,把以上除油和鹽外的材料放入盆中揉成團,β-胡蘿蔔素用少量水溶解後一起混合;
2.加入植物油和鹽,繼續揉至麵筋完全擴展,以能拉成均勻的薄膜狀為標準;
3.蓋上濕毛巾在室溫下(25℃左右)發酵至2倍大;
4.發酵好的麵團進行分割排氣,靜置10分鐘,取一份搓成長條;
5.扭成麻花狀,再對摺,把兩端塞進裡面;
6.剩下的按照上面一樣做法,全部做好後放進烤盤進行第二次發酵,發酵至2倍大;
7.二次發酵好的麵包胚放入預熱好的烤箱以150℃烘烤18分鐘左右即可。
套用效果
用後賦予食品黃至黃橙色色澤,改善食品的感官性狀。具有維生素的活性。
貯存事項
置遮光容器中,填充氮氣,密封,在陰涼處保存。
β-胡蘿蔔素在套用中避免氧化。由於β-胡蘿蔔素具有眾多雙建結構,因此在熱、離子和光作用下容易異構化,遇氧時容易氧化。而且除了氧、光、熱等因素外,抗氧化劑、金屬離子、pH值等,對β-胡蘿蔔素的穩定性也有影響。所以,β-胡蘿蔔素在使用時,應儘量隔絕氧氣、光照、高溫等,同時採用包埋技術解決這一問題。
此外,β-胡蘿蔔素氧化降解過程往往與脫色過程聯繫在一起,氧化降解包括光降解和熱降解,在降解過程中常伴隨著順式和反式之間的異構化。針對這一問題,使用時可以加進抗氧化性更強的物質,對β-胡蘿蔔素起到保護作用。
攝入指南
食物來源
攝入不足
可引起夜盲、黏膜乾燥、眼乾燥症及近視等症狀;可增加癌症、白內障、心血管、生殖系統、泌尿系統疾病及呼吸道感染的發生機會;出現過早衰老、失眠、渾身無力和皮炎、皮膚角質化等症狀。
攝入過量
如果一次性過量的攝取富含胡蘿蔔素的食物,其不能及時轉化為維生素A,過量的胡蘿蔔素就會流入血液進入循環系統,傳遍全身,胡蘿蔔素具有脂溶性高的特點,在經過循環到達表皮時,會與表皮親脂蛋白結合,因此對於血脂偏高的人來說,胡蘿蔔素更容易沉積在皮膚內,出現皮膚發黃的現象。一般來講,這樣就造成了胡蘿蔔素聚積在皮下脂肪組織里來不及代謝,使得皮膚暫時性變黃。
攝入注意
服用下列各項藥物的
人士應該避免同時服用β-胡蘿蔔素補充劑:
l Cholestyramine
l Colestipol
l Probucol
l Orlistat
Cholestyramine(消膽胺)和probucol(丙丁酚,或稱普羅布考)是用於降低
膽固醇的藥物。根據
瑞典的一個持續了三年的實驗表明,它們可以降低30%到40%血液中的β-胡蘿蔔素含量。Colestipol(降脂樹脂二號),一種類似於消膽胺的降
膽固醇藥物,同樣可以降低β-胡蘿蔔素的含量。
β-胡蘿蔔素和Orlistat(脂肪酶抑制劑,羅氏大藥廠商品名為Xenical,中文有仙妮蕾德,可能是
同類產品) 都是減肥的藥物,它們不能同時服用,因為Orlistat會降低30%的 β-胡蘿蔔素吸收量。因此它會減少身體裡這種營養的含量。需要同時
服用Orlistat和β-胡蘿蔔素補充劑的人必須錯開服用這兩種藥物的時間,至少要相差兩個小時。
警惕濫用
β-胡蘿蔔素只有在飲食中同時含有維他命C和E等其他的重要
抗氧化劑時才能發揮它的抗癌作用。大量吸菸或喝酒者應該小心服用β-胡蘿蔔素,因為它會提高他們患心臟病和癌症的幾率。
雖然β-胡蘿蔔素有助於保護皮膚敏感人士防止日光的傷害,但是它沒有防曬的效果。
雖然動物研究指出β-胡蘿蔔素對胎兒或嬰兒沒有毒,但沒有相關研究能證實這結論同樣適用於人類。β-胡蘿蔔素補充劑可以進入母乳,但沒有相關研究證實在哺乳期間服用它的安全性。 因此, 當
孕婦或哺乳期的母親需要服用β-胡蘿蔔素補充劑時,應該接受醫師或醫學專家的指導建議。
膳食中的胡蘿蔔素即便攝入過量,不過表現為皮膚變黃,並不會危害健康。然而大量攝入胡蘿蔔素補充劑卻存在危險,研究發現主要是其促氧化作用促進細胞分裂,破壞了體內的抗氧化物質和維生素A,對於處於較高氧化應激狀態的人士來說,這種危害更為嚴重,比如吸菸者或酗酒者。
傳統觀念認為:補充胡蘿蔔素不僅可以減少心血管疾病及白內障的發生,而且有防癌作用。但近年來許多測試結果發現:服β胡蘿蔔素的一組與正常對照組相比,肺癌發病率非但沒有減少,反而高出28%。
營養學家分析:補充生理劑量(5毫克/日)的胡蘿蔔素確有抑癌作用,而攝入過量胡蘿蔔素會阻止維生素A與相應受體結合,進而阻止腫瘤抑制基因的轉化,其結果便不是抑癌而是走向反面。
但是要注意的是,健康、合理、營養豐富的飲食比單一地補充B一胡蘿蔔素更有效。不宜與醋等酸性物質同時服用。