tailPCR

Tail PCR,即熱不對稱交錯PCR。Tail PCR是 Liu et al (1999)在熱不對稱 PCR基礎上發展起來的一種方法。Tail PCR是指利用一系列序列特異性的巢式引物和一個短的任意引物(arbitrary primer) 引導擴增已知序列的側翼序列的反應,它 是一種半特異性的 PCR 反應,由於兩類引物的退火溫度不同從而可以通過控制反應過程中的退火溫度,有效地控制特異性和非特異性產物的擴增。

基本介紹

  • 中文名:tailPCR
  • 外文名:tailPCR
  • 又名:即熱不對稱交錯PCR
  • 作用:退火溫度較高
特點
在 Tail PCR中序列特異性的巢式引物較長,退火溫度較高,因此在 PCR 反應中退火溫度的高低(相對)對它與目的序列的退火沒有太大的影響,在高低兩種退火溫度下都可以與已知序列發生特異性的退火,而序列短的任意引物則僅可以在退火溫度較低時與未知序列(已知序列的側翼序列)發生退火,通過高低退火溫度的交替進行,使目的基因得到有效的擴增。
Tail PCR分離法可以降低非側翼區特異產物的背景,同時它可以產生2 個以上嵌套的目的片段,與其它方法相比 TAILPCR方法具有簡便、特異、高效、快速和靈敏等特點。Hernández et al (2003) 和Yang et al (2005) 採用 Tail PCR分別獲得了MON810 和 MON863 玉米的側翼序列。

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