在弱鹼性溶液中，胺基酸的α-氨基很容易與2，4-二硝基氟苯作用，生成穩定的黃色2，4-二硝基苯胺基酸。該反應由F. Sanger首先發現，所以此反應又稱桑格反應（Sanger reaction），2，4－二硝基氟苯被稱為Sanger試劑。
基本介紹
- 中文名：sanger反應
- 外文名：Sanger reaction
- 又稱：又稱桑格反應
- 條件：在弱鹼性溶液中
在弱鹼性（pH 8~9）、暗處、室溫或40℃條件下，胺基酸的α-氨基很容易與2,4-二硝基氟苯（縮寫為FDNB或DNFB）反應，生成黃色的2,4-二硝基苯胺基酸（dinitrophenyl amino acid，簡稱DNP-胺基酸）。多肽或蛋白質的N-末端胺基酸的α-氨基也能與FDNB反應，生成一種二硝基苯肽（DNP-肽）。由於硝基苯與氨基結合牢固，不易被水解，因此當DNP-多肽被酸水解時，所有肽鍵均被水解，只有N-末端胺基酸仍連在DNP上，所以產物為黃色的DNP-胺基酸和其它胺基酸的混合液。混合液中只有DNP-胺基酸溶於乙酸乙酯，所以可以用乙酸乙酯抽提並將抽提液進行色譜分析，再以標準的DNP-胺基酸作為對照鑑定出此胺基酸的種類。因此2,4-二硝基氟苯法可用於鑑定多肽或蛋白質的N-末端胺基酸。
