微測序技術

微測序技術是對引物部分序列或接近引物的小段序列進行測序的技術。目前常用的微測序方法有 Sanger反應測序法、酶解質譜法、質譜裂 解測序法、晶片雜交法、焦磷酸測序法和 SNaPshot。Sanger反應測序法是將Sanger測序反應產物用質譜檢測,通過檢測延伸產 物的質量進行測序。酶解法是用特異性酶切 割DNA的鹼基,然後檢測酶切後的DNA 片段質量,推測被切掉的鹼基。

質譜裂解法是通過MALDI在離子化過程中將DNA 裂解為碎片離子,通過分析碎片離子信息確定DNA的序列。晶片雜交法是將晶片技術與MALDI結合進行微測序。焦磷酸測序法是對位於引物之外20〜30個單核苷酸進行合成測序,dNTP以特殊的順序加入,結合後導致焦磷酸的釋放,由此引發級聯反應。SNaPshot法是一種能進行複合分析的引物延伸分析技術,以螢光標記的ddNTPs對SNP位點進行等位基因特異性引物延伸,在每個引物的V端加上可隨機修改的尾巴,使其因空間構象不同可用電泳分離。

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