sFRP1在促進胃癌細胞生長和轉移的作用及其機制研究

《sFRP1在促進胃癌細胞生長和轉移的作用及其機制研究》是依託上海交通大學，由瞿穎擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：sFRP1在促進胃癌細胞生長和轉移的作用及其機制研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：瞿穎
• 依託單位：上海交通大學

項目摘要

Wnt信號通路在胃癌中常被異常激活，在胃癌的發生和惡性進展中起重要作用。sFRP1是Wnt通路的調節分子，以往研究多將其作為wnt信號負調控因子。而我們的初步研究發現，sFRP1在胃癌中高表達，且表達水平與淋巴結轉移及患者生存期相關。為評價sFRP1作為轉移復發的臨床指標的套用性，我們以胃癌細胞株SGC-7901為模型，首先研究sFRP1高表達在胃癌中的生物學作用，研究sFRP1高表達對胃癌細胞增殖、凋亡、轉移和血管擬態等多方面的機制。然後在此基礎上研究sFRP1對調控胃癌相關細胞外微環境的通路。研究sFRP1蛋白對腫瘤微環境重塑，著重從細胞因子和對成纖維細胞以及血管內皮細胞作用三方面進行研究。以前期預實驗結果為基礎，選取sFRP1的候選靶基因，通過基因轉染、基因沉默，結合免疫螢光染色、螢光素酶報告基因等方法進行功能研究。以闡明sFRP1的生物學作用及其分子機制以及臨床套用前景。

結題摘要

胃癌是我國最為常見的惡性腫瘤之一，且進展期胃癌患者占我國胃癌患者大多數。進展期胃癌患者接受胃癌標準根治術後的5年生存率仍不容樂觀，其根本原因在於胃癌的病因及發病機制未明。約有30-50%的胃癌中存在Wnt信號通路異常激活， sFRP1是Wnt信號通路的調控蛋白，本課題研究的主要目的在於探討sFRP1在胃癌組織中的表達和功能，並探索其調控機制。sFRP1蛋白在胃癌組織中高表達，在正常胃上皮細胞中無/極弱表達。sFRP1蛋白表達高與淋巴結轉移及患者生存期短相關，可作為評判胃癌病人預後的潛在指標。過表達sFRP1可促進胃癌細胞在二維和三維條件下的生長。過表達sFRP1可促胃癌細胞遷移、侵襲能力和創傷修復速度。過表達sFRP1可促進胃癌細胞發生EMT轉換，過表達sFRP1細胞培養上清可以促進體外血管形成。過表達sFRP1胃癌細胞的裸鼠皮下成瘤能力增強，免疫組化染色發現sFRP1過表達細胞形成的皮下瘤中分裂相細胞增多、凋亡細胞減少、腫瘤微血管密度增加、MMP蛋白表達增高，與體外實驗結果一致。使用人全基因組晶片檢測sFRP1過表達引起的基因表達改變發現多種增強成瘤能力的基因（RUNX2、ZEB2、DNMT3L、CD44等），同時也誘導與腫瘤基質重建相關基因（TGFβ1、VEGF、SEPP1、ILs等）和免疫逃逸相關基因（HLA-DRA、PD-L2等）的表達。共表達調控網路分析發現18個與sFRP1過表達具有共表達情況的基因，而在空載體對照組中僅有4個基因。通過Realtime-PCR和ELISA驗證了差異表達基因，信號通路研究發現TGFβ1信號通路是介導sFRP1下游的重要途徑。我們的研究結果提示sFRP1蛋白是調控胃癌細胞生長和腫瘤微環境重建的關鍵分子，可作為胃癌預後的潛在指標和治療靶點。