p38beta磷酸化Raptor調節mRORC1的活性研究

《p38beta磷酸化Raptor調節mRORC1的活性研究》是依託廈門大學，由周化民擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：p38beta磷酸化Raptor調節mRORC1的活性研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：周化民
• 依託單位：廈門大學

項目摘要

mTOR 信號通路（mTORC1）在細胞生長、繁殖、代謝、自噬和個體發育等多個生物學過程中發揮關鍵性的作用。TSC1/TSC2複合物是mTOR上游重要的複合物，它能整合多種信號從而調節mTOR的活性。但某些信號調節mTOR活性並不通過TSC1/TSC2複合物。 近年來的研究顯示Raptor有多個可能的磷酸化位點，通過磷酸化參與調節mTORC1的活性。我們發現，在p38beta-/- MEF細胞中，Arsenite刺激的S6K的磷酸化減少，Arsenite刺激的S6K的磷酸化是mTOR依賴的，且Raptor能和激活的p38beta相互作用。本項目擬通過RT-PCR、基因克隆、基因突變、DNA轉染、病毒的包裝感染、免疫共沉澱、siRNA干擾技術、大腸桿菌原核表達、流式細胞儀檢測方法等探討p38beta如何介導的Raptor磷酸化調節Arsenite刺激的mRORC1的活性。

結題摘要

mTOR 信號通路（mTORC1）在細胞生長、繁殖、代謝、自噬和個體發育等多個生物學過程中發揮關鍵性的作用。TSC1/TSC2複合物是mTOR上游重要的複合物，它能整合多種信號從而調節mTOR的活性。但某些信號調節mTOR活性並不通過TSC1/TSC2複合物。 近年來的研究顯示Raptor有多個可能的磷酸化位點，通過磷酸化參與調節mTORC1的活性。我們發現，在p38beta-/- MEF細胞中，Arsenite刺激的S6K的磷酸化減少，Arsenite刺激的S6K的磷酸化是mTOR依賴的，且Raptor能和激活的p38beta相互作用。p38亞型成員敲除的MEF細胞中，Arsenite刺激的S6K的磷酸化狀況顯示，僅p38特異介導Arsenite刺激的mTOR信號；不同的胞外刺激中，p38特異介導Arsenite誘導的mRORC1的活性。在分析p38和Raptor相互作用時發現，p38抑制劑並不抑制p38/Raptor相互作用；使用刪除和點突變方法，確定了S863是Raptor的p38磷酸化位點。MKK3/6/ p38信號通路涉及Arsenite誘導的Raptor磷酸化；Rapamycin並不抑制Arsenite誘導p38beta磷酸化Raptor。總之，我們發現p38以刺激依賴性方式與Raptor相互作用並磷酸化RaptorS771與S863位點，調節mTORC1的活性，細胞能以不同的策略應對不同的壞境條件。