《miRNA在人類生物性體液中的法醫學鑑定研究》是依託四川大學，由白鵬擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：miRNA在人類生物性體液中的法醫學鑑定研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：白鵬
- 依託單位：四川大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
尋求高效穩定的分子生物學方法對人類生物性體液進行鑑定，是法醫物證學的發展方向，而miRNA具有保守性和組織特異性，可用於體液性質鑑定。本研究以中國漢族的血液、精液、唾液、陰道分泌液和月經血等5種體液的大量群體樣本為對象，改進體液斑痕的RNA提取方法，利用miRNA基因晶片篩選，確定具有鑑定意義的miRNA位點。通過定量PCR，獲得位點的△Ct值（目標基因與內參基因的循環閾值的差值）。通過這些基礎研究可以建立：1.基於2種特定位點的△Ct值的組合，構建二維組合鑑定系統；2.以特定位點的△Ct值構建進化樹，構建進化樹鑑定系統。利用兩種系統的聯合套用，對斑痕檢材和混合檢材進行特異性鑑定，可以解決法醫相關性體液的性質鑑定。
結題摘要
生物性體液是最重要的物證檢材，而它們常以斑痕形式存在。傳統的鑑定方法不能實現體液性質的複合鑑定（即通過一次實驗對多種體液進行性質鑑定）。 miRNA具有保守性和組織特異性，可用於體液性質鑑定。如果能找到具有體液組織特異性的miRNA位點，無疑為體液性質鑑定的方法開創了新的技術路線。 本研究以中國漢族的血液、精液、唾液、陰道分泌液和月經血等5種體液和皮屑拭子的大量群體樣本為對象，利用miRNA基因晶片篩選，確定具有鑑定意義的miRNA位點。通過實時螢光定量PCR，獲得位點的△Ct值。以此作為數據基礎，從而構建二維組合鑑定系統和進化樹鑑定系統，對斑痕檢材和混合檢材進行特異性鑑定，為解決法醫體液性質鑑定做出一定的基礎貢獻和套用研究。主要取得以下學術成績： 1、完成了法醫相關的5種體液和皮屑拭子的大量群體樣本收集，為後續研究做好樣本基礎。 2、利用生物信息學和miRNA基因晶片，篩選出具有鑑定意義的miRNA位點。然後對這些位點進行螢光定量PCR實驗，得到位點的Ct值和△Ct值，為下一步研究奠定數據基礎。 3、改進RNA提取方法，以此解決法醫實踐中斑痕檢材的RNA難以提取的問題，為今後相關研究奠定了一定的基礎。 4、篩選出一系列具有體液性質特異性的miRNA位點，對建立中國漢族人群體液鑑定miRNA基因庫進行了基礎性工作。 5、初步構建了體液性質鑑定的二維組合鑑定系統：建立了5種體液對應的多組miRNA位點系統（每組由特定的2個miRNA位點構成），以此進行體液鑑定。經過實踐套用，初步確認該系統的可行性。為後續研究提供良好的基礎。 6、初步構建了體液性質鑑定的進化樹鑑定系統：建立了5種體液對應的多組NJ樹系統，以此進行體液鑑定。經過實踐套用，初步確認該系統的可行性。為相關研究提供新的研究方向。 7、篩選能夠鑑別月經血與外周血的miRNA位點，並且以此構建血液類樣本的性質鑑定miRNA策略，為今後該領域的套用提供基礎性研究。 8、對實時螢光定量PCR的兩種定量方法（Taqman探針和SYBR Green染料）進行了對比研究，以此探討不同定量方法對miRNA體液鑑定的影響，為相關研究的完備性提供基礎性補充。 總之，在該項目的資助下，課題組在國際法醫遺傳學主流雜誌上共發表SCI論文5篇，參加2次高水平的國際會議，協助培養碩士研究生1名。
