《miR-744下調TGF-β影響MSCs功能參與SLE發病機制研究》是依託南京大學，由馬曉蕾擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：miR-744下調TGF-β影響MSCs功能參與SLE發病機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：馬曉蕾
- 依託單位：南京大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
本課題組前期研究發現，SLE患者骨髓MSCs存在異常；異基因正常MSCs移植治療難治性SLE療效顯著且安全。miRNAs可參與調控幹細胞增殖、分化及免疫調節功能等，其表達及功能失調與SLE相關，可能成為SLE治療新靶點。我們前期發現SLE MSCs中miRNAs表達譜與正常相比存在多種異常，其中miR-744表達顯著升高。而SLE患者MSCs分泌TGF-β明顯低於正常人。目前已有研究表明，miR-744可負向調控TGF-β。本研究擬通過體外試驗及狼瘡鼠體內移植MSCs，深入探討miR-744能否通過下調TGF-β發揮其對MSCs的調控作用及其作用機制，闡明miR-744在異基因MSCs移植治療SLE中的作用，探討SLE可能的發病機制，尋求更有效的疾病干預新靶點，為臨床套用MSCs治療SLE及其他自身免疫病提供理論依據。
結題摘要
背景：抗黑色素瘤相關蛋白抗體（MDA5）陽性皮肌炎（DM）合併間質性肺病（ILD）預後不良。研究表明，同時注射IL-2和IL-18可以導致急性 ILD。抗MDA5陽性DM-ILD患者血清IL-18顯著高於其他類型DM患者，因此我們認為，IL-2和IL-18誘導的ILD模型能更好地模擬抗MDA5陽性DM-ILD 的發病過程。研究表明，在肺纖維化小鼠中，ILC2細胞增多，ILC2可分泌雙調蛋白（AREG），AREG-表皮生長因子受體（EGFR）通路激活可促進肺纖維化的發生，因此，ILC2細胞-AREG-EGFR信號通路可能參與ILD的發病，其具體調節機制如何有待於進一步研究。結果：①經IL-2和IL-18處理組小鼠有較典型的肺泡損傷，相鄰肺泡相互融合，肺泡壁增厚，肺間質內有較多的炎性細胞浸潤；IFN-γ的含量在小鼠血清和BALF中都有所升高，TNF-α的含量在BALF中升高；②肺臟IHC結果顯示正常上皮細胞和間質細胞中也可產生少量AREG，在由炎症因子介導的ILD中，間質內ILC2細胞增多，AREG的表達也明顯增多，且隨著疾病的發展而不斷增加；③模型鼠疾病早期在MLN中ILC2細胞的比例顯著增加，Th2細胞和Th17細胞的比例沒有明顯變化，後期ILC2細胞和Th17細胞的比例都沒有變化，Th2細胞的比例下降；在肺組織中，ILC2細胞比例在早期增加而在後期減少，Th2細胞和Th17細胞的比例都沒有變化；④利用西妥昔單抗對處於ILD不同階段的小鼠進行1次或2次處理，藥物處理組中IFN-γ和IL-25的水平增加。實驗早期血清中AREG水平沒有變化，而肺組織中AREG水平在藥物處理組中降低；實驗後期，藥物處理組中血清IFN-γ水平降低，藥物處理組和未處理組血清中IL-25、TGF-β和AREG水平沒有明顯變化。肺臟HE染色提示藥物處理組和未處理組中肺部浸潤和纖維化狀態似乎同樣嚴重。實驗早期藥物處理組MLN中ILC2細胞比例與未處理組相比顯著降低，實驗後期，藥物處理組小鼠MLN及肺組織中未觀察到ILC2細胞比例變化；⑤無論西妥昔單抗治療與否，AKT的表達水平在實驗早期均高於對照組，而磷酸化AKT表達水平明顯下降，但藥物處理組與未處理組無差異。實驗後期，AKT和磷酸化AKT在藥物處理組和未處理組的表達水平相似。但模型鼠的AKT表達水平明顯高於對照組。
