miR-33在鵝肥肝形成過程中的表達調控與作用機制研究

《miR-33在鵝肥肝形成過程中的表達調控與作用機制研究》是依託揚州大學，由張宜輝擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：miR-33在鵝肥肝形成過程中的表達調控與作用機制研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：張宜輝
• 依託單位：揚州大學

項目摘要

miR-33是由固醇調節元件結合蛋白（SREBPs）基因內含子編碼，和SREBPs協同調節機體內膽固醇和脂肪酸水平，在平衡脂類代謝相關基因的表達方面起到重要作用。肝臟是家禽脂類代謝的主要器官，肝中脂類代謝研究已成為熱點。鵝以其極強的脂肪沉積能力成為肥肝生產的主力軍，同時鵝在肥肝形成過程中不會出現明顯的病理症狀，為脂肪肝研究提供了良好的模型。本項目以miR-33為研究對象，擬通過體外實驗驗證其靶基因並檢測miR-33和靶基因mRNA及其編碼蛋白在不同填飼時期鵝肝臟中的表達情況；對miR-33和靶基因CROT進行上調和下調錶達研究，闡明miR-33在鵝肝脂類代謝過程中的生物學功能和作用機制，獲得提高鵝肥肝生產與診斷的新型靶標，並為人類脂肪肝的研究提供參考依據。

結題摘要

本研究以鵝肥肝形成過程中關鍵mirRNA為切入點，研究了miR-33 及靶基因肉鹼O辛基轉移酶基因的靶向關係，並檢測了miR-33和靶基因mRNA及其編碼蛋白在不同填飼時期鵝肝臟中的表達規律；以鵝原代肝細胞為實驗素材，通過過表達和抑制正反向、脂肪肝相關因子誘導等途徑研究miR-33 在鵝肥肝形成過程中的作用機制。實驗獲得miRNA-33靶基因CROT序列並進行了生物信息學分析，檢測出CROT基因在填飼各階段肝臟中的mRNA水平均顯著下調，且在19天填飼組中的蛋白表達水平也顯著下調，這與miRNA-33的表達趨勢正好相反。使用脂肪肝形成相關因子（葡萄糖和胰島素）處理鵝原代肝細胞發現，葡萄糖處理可以顯著抑制miRNA-33表達並誘導CROT基因，而胰島素則顯著誘導miRNA-33表達並抑制CROT基因表達，填飼引起的鵝肝臟中發生的胰島素抵抗（肝臟中胰島素水平升高）是導致miRNA-33表達上調的主要原因，繼而調控CROT基因表達，研究結果表明miRNA-33與CROT基因存在潛在的調控關係，參與鵝肥肝的形成。