《鵝肥肝形成過程中內質網應激作用的研究》是依託揚州大學，由耿拓宇擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：鵝肥肝形成過程中內質網應激作用的研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：耿拓宇
- 依託單位：揚州大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
鵝肥肝味美、有營養且生產工藝獨特。揭示其形成機制將有助於解決肥肝生產面臨的問題。研究表明哺乳動物的肝細胞內質網應激對胰島素抵抗的形成十分重要，而胰島素抵抗可誘發高胰島素血症，促進脂肪合成。由於鵝在脂肪代謝方面的特點，該機制是否適用於鵝脂肪肝/肥肝尚不清楚。本研究將利用螢光定量PCR和免疫印跡法在鵝原代肝細胞和活體水平測定高能營養因子是否激活內質網應激信號通路，誘導下游標識基因的過表達，抑制AKT的磷酸化，引起胰島素抵抗。利用干擾RNA抑制標識基因的過表達，可確定內質網應激與胰島素抵抗間的因果關係。還將使用藥物或調節飼料成分，確定調節內質網應激是否引起鵝出現胰島素抵抗（高血糖、高胰島素血症等），並促進肥肝形成。為加深對內質網應激作用的理解以及尋找相關候選基因為分子育種奠定基礎，本研究將篩選內質網應激的靶基因。總之，本研究旨在闡明內質網應激對鵝肥肝形成的作用。
結題摘要
哺乳動物肝細胞中內質網應激(ERS)對胰島素抵抗(IR)的形成十分重要，而後者可促進脂肪合成並誘發脂肪肝。相對於哺乳動物脂肪肝，鵝脂肪肝（或肥肝）是生理性的，可能有其獨特性，因此內質網應激在鵝肥肝中的作用並不明確。本項目利用螢光定量PCR 和免疫印跡法檢測ERS誘導劑、高能營養因子（葡萄糖、棕櫚酸）或飼料加糖對ERS、IR和脂肪肝形成的影響，通過鵝肥肝、棕櫚酸處理的肝細胞、ERS標記基因GRP78過表達細胞及對照的轉錄組分析，篩選鵝肥肝形成中受ERS調控的靶通路和基因，以及通過轉錄組分析和候選基因法探索鵝肝具有的特定保護成分。數據表明：在鵝肝臟或原代肝細胞中，ERS誘導劑可誘導ERS、IR和脂肪肝，在鵝原代肝細胞中高能營養因子也能誘導ERS和IR，而不飽和脂肪酸（油酸和亞油酸）可抑制棕櫚酸的誘導作用。在現有生產條件下，雖然鵝肥肝形成過程中出現IR，但ERS基因的表達受到抑制。加糖飼料雖可促進IR和脂肪肝形成，但ERS基因的表達卻受到進一步抑制。這些結果說明ERS可以誘導IR和脂肪肝形成，IR介導ERS對脂肪肝的誘導作用，調節ERS可以促進鵝肥肝形成。鵝肥肝中ERS對免疫相關基因的表達具有調節作用，並藉此參與鵝肥肝的形成。此外，鵝可能具有特殊機制保護肥肝免受嚴重脂肪變性引起的毒性作用，包括ERS、炎症。增加脂聯素受體基因、脂肪酸去飽和酶家族基因、線粒體相關基因的表達，減少促炎症因子TNFα、補體相關基因的表達為鵝肥肝提供了一定的保護。綜上所述，本項目揭示了ERS和IR在鵝肥肝形成中的作用，有助於鵝肥肝形成機制的闡明。調控ERS和IR可以影響鵝肥肝的形成，飼料加糖是有效方法之一。鵝具有的特殊保護機制可為人類和其他畜禽脂肪肝的防治提供新的思路。
